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生漆致癢機(jī)理初探

發(fā)布時(shí)間:2017-12-29 18:03

  本文關(guān)鍵詞:生漆致癢機(jī)理初探 出處:《吉首大學(xué)》2016年碩士論文 論文類(lèi)型:學(xué)位論文


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【摘要】:生漆憑借合成涂料無(wú)法比擬的優(yōu)勢(shì)被廣泛應(yīng)用于工業(yè)、農(nóng)業(yè)、國(guó)防、科技、民用等領(lǐng)域,素有“涂料之王”的美譽(yù),但因其對(duì)人體的高致敏性,使得生漆在采集和應(yīng)用中存在諸多不便。大量研究已經(jīng)證明生漆的致敏活性是其所含漆酚類(lèi)化合物所致;颊咂ぱ滋帯捌姘W難忍”是生漆過(guò)敏的病理反應(yīng)之一,本論文為探究生漆過(guò)敏的致癢機(jī)理,進(jìn)行了以下研究工作:采用石油醚萃取,硅膠柱層析粗分,MCI、ODS等填料以中壓制備色譜儀進(jìn)行純化,產(chǎn)物以~1H-NMR、~(13)C-NMR、高分辨質(zhì)譜進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定的實(shí)驗(yàn)方法,分離得到一個(gè)三烯漆酚單體[3-(8'Z,11'E,13'Z-pentadecatrienyl)catechol],用HPLC進(jìn)行純度表征,采用峰面積歸一法計(jì)算其純度達(dá)95%。根據(jù)人對(duì)生漆過(guò)敏的臨床觀(guān)察結(jié)果,采用小鼠一次涂漆酚致急性皮炎的方法,通過(guò)皮膚腫脹度進(jìn)行劑量摸索最后確定漆酚涂藥方法為:純化得到的三烯漆酚用無(wú)水乙醇稀釋10倍,小鼠皮膚涂10μL(約1mg)。小鼠背頸部皮膚涂漆酚后第5h時(shí)腫脹程度達(dá)到最大值,第24h時(shí)出現(xiàn)紅腫、滲出、潰爛等明顯炎癥癥狀。小鼠皮炎皮膚HE染色顯示,漆酚致急性皮炎后導(dǎo)致皮膚中大量炎性細(xì)胞的聚集,依次出現(xiàn)水腫,潰爛,結(jié)痂,脫痂等癥狀,7~8天后皮損康復(fù)。用Elisa的方法對(duì)小鼠造模前后的血清和皮膚分別進(jìn)行相關(guān)炎癥因子的檢測(cè),發(fā)現(xiàn)造模后血清中炎癥因子含量無(wú)顯著變化,而皮膚中TNF-α、IL-1β的表達(dá)升高,說(shuō)明漆酚過(guò)敏為局部皮膚的炎癥反應(yīng)。行為實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明漆酚會(huì)導(dǎo)致小鼠急性皮炎既產(chǎn)生嚴(yán)重的癢覺(jué)反應(yīng)又產(chǎn)生嚴(yán)重的痛覺(jué)反應(yīng),且癢覺(jué)表現(xiàn)為皮炎出現(xiàn)前和皮炎出現(xiàn)后兩個(gè)相的抓撓行為。通過(guò)鈣成像、實(shí)時(shí)熒光定量PCR、酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)的方法,發(fā)現(xiàn)漆酚引起小鼠急性皮炎產(chǎn)生的癢覺(jué)和TRPA1通道(transient receptor potential A1)相關(guān)。在小鼠用漆酚造模皮炎24h后,背根神經(jīng)節(jié)(DRG)中trpa1基因的表達(dá)下調(diào),trpa1基因敲除小鼠抓撓次數(shù)明顯比野生型小鼠增加,且參與癢覺(jué)或痛覺(jué)形成的P物質(zhì)在皮炎皮膚中的含量下降。以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果建立了小鼠生漆急性皮炎癢覺(jué)研究的基本方法,且通過(guò)機(jī)理的初步研究發(fā)現(xiàn)生漆致癢和TRPA1通道相關(guān)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:吉首大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類(lèi)號(hào)】:R758.2

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本文編號(hào):1351250

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