本文關(guān)鍵詞：CIP2A在皮膚惡性黑素瘤中的表達及意義

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【摘要】：目的探究蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子(cancerous inhibitor of protein phosphatase 2A,CIP2A)在皮膚惡性黑素瘤(CMM)中的表達情況及臨床意義,并進一步分析CIP2A對CMM細胞(A375)侵襲、遷移的影響。方法(1)采用免疫印跡法檢測3例CMM組織及其瘤旁組織中CIP2A蛋白表達情況。(2)采用免疫組化法檢測65例CMM、30例痣細胞痣和30例正常人上皮組織中CIP2A蛋白表達情況,并分析CMM組織中CIP2A蛋白表達水平與患者臨床病理特征及總體生存率的關(guān)系。(3)通過免疫印跡、定量實時聚合酶鏈反應(yīng)(quantitative real-time polymerase chain reaction,QRT-PCR)法檢測A375細胞及正常皮膚黑素細胞(NHMs)中CIP2A蛋白和m RNA表達水平。(4)利用Lipofectamine2000將CIP2A si RNA轉(zhuǎn)染到A375細胞中,并通過免疫印跡、QRT-PCR法檢測A375細胞轉(zhuǎn)染48h后CIP2A蛋白及m RNA表達水平。(5)通過侵襲試驗探究CIP2A對A375細胞侵襲能力的影響。(6)通過劃痕實驗及遷移試驗探究CIP2A對A375細胞遷移能力的影響。結(jié)果(1)CMM組織中CIP2A蛋白表達水平顯著高于其瘤旁組織。(2)65例CMM中,CIP2A在50例CMM中高表達,在15例CMM中低表達;30例痣細胞痣中,CIP2A在21例中低表達,在9例中無表達;CIP2A在30例正常皮膚組織中幾乎無表達(P0.001)。CIP2A表達水平與CMM患者腫瘤Breslow厚度(P=0.0021)、Clark’s分級(P=0.0024)和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P=0.0008)之間密切相關(guān),與腫瘤患者性別(P=0.5483)、年齡(P=0.7851)、腫瘤部位(P=0.5634)以及潰瘍的發(fā)生(P=0.8962)之間無明顯相關(guān)性。Kaplan-Meier分析顯示,CMM患者死亡率與CIP2A蛋白表達水平(P=0.046)及CIP2A浸潤深度(P=0.002)成正比。(3)免疫印跡、QRT-PCR結(jié)果顯示,A375細胞中CIP2A蛋白及m RNA表達水平顯著高于NHMs。(4)免疫印跡、QRT-PCR結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)染組A375細胞中的CIP2A蛋白及m RNA表達水平顯著低于對照組細胞。(5)侵襲實驗表明,沉默CIP2A基因能削弱A375細胞的侵襲能力。(6)劃痕實驗及遷移試驗表明,沉默CIP2A基因能削弱A375細胞的遷移能力。結(jié)論(1)CIP2A在CMM標本中高表達,提示CIP2A可能參與了CMM的發(fā)病過程。(2)CIP2A高表達與CMM患者術(shù)后生存率有顯著相關(guān)性,提示CIP2A可能與患者預(yù)后有關(guān)。(3)CIP2A的高表達能促進惡性黑素瘤A375細胞的侵襲遷移,提示CIP2A可能與CMM的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：南通大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R739.5
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本文編號：1143393