發(fā)布時間：2017-10-20 04:42

  本文關鍵詞：RNAi干擾黑色素瘤細胞Notch1基因表達對小鼠腫瘤免疫機制影響

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【摘要】：目的探討靶向Notch1的siRNA抑制惡性黑色素瘤Notch通路對小鼠機體抗腫瘤免疫的影響。方法采用RNA干擾小鼠黑色素瘤細胞B16F1Notch1基因的表達,酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)法檢測轉染前后腫瘤細胞分泌免疫抑制因子轉化生長因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)、白細胞介素10(interleukin-10,IL-10)和血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的變化。制作小鼠黑色素瘤模型,在腫瘤生長過程中瘤內注射siNotch1,記錄腫瘤生長情況,手術切除腫瘤組織,流式細胞術檢測腫瘤組織中gp100抗原特異性CD8+T細胞的比例,ELISA法比較各組腫瘤勻漿上清中IFN-γ和免疫抑制因子TGF-β的含量變化,免疫組化法分析腫瘤組織中FoxP3+Treg細胞的數量。結果 siNotch1轉染后,成功下調了黑色素瘤細胞Notch1基因的表達。ELISA實驗結果顯示,轉染后siNotch1組、siNC組和mock組細胞上清TGF-β分泌量分別為(0.665±0.242)、(1.413±0.153)和(1.623±0.111)ng/mL,F=40.237,P=0.000 48;VEGF的分泌量分別為(399.9±79.42)、(397.3±107.0)和(388.6±136.8)ρg/mL,差異無統(tǒng)計學意義,F=0.015,P=0.986;IL-10的分泌量為(38.93±12.45)、(41.84±9.85)和(45.81±9.36)ρg/mL,差異無統(tǒng)計學意義,F=0.525,P=0.604。siNotch1瘤內注射之后,小鼠腫瘤生長明顯減慢。流式細胞術檢測結果顯示,siNotch1組、siNC組和mock組gp100抗原特異性CD8+T細胞的比例分別為(5.54±1.68)%、(2.43±1.09)%和(2.57±1.16)%,F=12.643,P=0.000 25。免疫組化結果顯示,FoxP3平均陽性細胞數分別為23.13±6.75、38.63±10.68和41.75±12.10,F=7.802,P=0.003。腫瘤組織勻漿ELISA結果顯示,siNotch1組、siNC組和mock組IFN-γ的濃度分別為(10.047±1.775)、(4.121±1.379)和(3.698±1.253)ng/mL,F=45.660,P=0.000 23;TGF-β的濃度分別為(3.738±1.203)、(7.663±2.114)和(7.545±2.080)ng/mL,F=11.687,P=0.000 39。結論 siNotch1抑制黑色素瘤細胞Notch通路后,可以降低其分泌TGF-β的含量,從而降低其對淋巴細胞的抑制作用,增加腫瘤組織中gp100抗原特異性CD8+T細胞的浸潤,促進IFN-γ的分泌,降低Treg細胞的比例,增強機體抗腫瘤免疫功能。
【作者單位】： 南方醫(yī)科大學中西醫(yī)結合醫(yī)院腫瘤中心;懷化市第一人民醫(yī)院腫瘤中心;
【關鍵詞】： 惡性黑色素瘤 抗腫瘤免疫 siRNA瘤內注射 siNotch
【基金】：廣東省自然科學基金(10251051501000008) 南方醫(yī)科大學中西醫(yī)結合醫(yī)院院長基金(1201301001)
【分類號】：R739.5
【正文快照】： 中華腫瘤防治雜志,2015,22(12):917-923Chin J Cancer Prev Treat,2015,22(12):917-923黑色素瘤的免疫治療在惡性黑色素瘤綜合治療中占有重要地位,免疫治療早期效果好,但腫瘤細胞具有免疫逃逸功能,阻礙了免疫治療療效的有效發(fā)揮,成為惡性黑色素瘤免疫治療方案急需跨越的最后障

【參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前3條

1 樊敏;霍介格;;調節(jié)性T細胞與腫瘤免疫逃逸相關性及中醫(yī)藥治療研究進展[J];浙江中醫(yī)藥大學學報;2013年06期

2 馮素玲;李建國;羅澤如;王敏;李依群;;肺癌患者外周血CD4~+CD25~+調節(jié)性T細胞檢測的臨床意義[J];中華腫瘤防治雜志;2009年19期

3 侯清玉;楊秀萍;;腫瘤免疫逃逸的研究進展[J];中華腫瘤防治雜志;2010年03期

【共引文獻】

中國期刊全文數據庫 前10條

1 丁穎;于妍妍;申華莉;楊們原;;差異熒光凝膠電泳法分析不同轉移潛能人肝癌細胞系的蛋白質組[J];分析化學;2013年11期

2 黃麗斌;石磊;楊衛(wèi)兵;;非小細胞肺癌抗腫瘤免疫應答與免疫逃逸相關研究[J];貴州醫(yī)藥;2014年02期

3 袁茵;陳丹亮;陳璇;邵紅偉;黃樹林;;人臍帶間充質干細胞通過激活Notch信號通路促進白血病細胞株Jurkat的體外存活(英文)[J];南方醫(yī)科大學學報;2014年04期

4 劉穎;尹瑋;楊曉暉;李榮耀;侯振江;;Notch信號在免疫系統(tǒng)中的作用[J];國際檢驗醫(yī)學雜志;2014年08期

5 歐建鋒;任暉;李莎;;胃癌組織中Fas/FasL表達及T淋巴細胞亞群分析[J];臨床誤診誤治;2011年12期

6 劉迎輝;林海紅;杜鋼軍;;復方馬錢子的抗腫瘤作用探討[J];河南大學學報(醫(yī)學版);2013年01期

7 葛超卓;劉星霞;任少達;趙春華;;MEF來源的間充質干細胞誘導生成的調節(jié)型樹突狀細胞的基因表達譜分析[J];基礎醫(yī)學與臨床;2014年04期

8 郭淦華;沈哲;;調節(jié)性T細胞分化在炎癥性腸病中作用機制的綜述[J];現代實用醫(yī)學;2014年07期

9 邵翔宇;陶慶松;嵇振嶺;;上皮-間質轉化信號轉導途徑研究進展[J];東南大學學報(醫(yī)學版);2014年06期

10 浦雯綺;;DC-CIK聯(lián)合TC方案治療卵巢癌臨床觀察[J];醫(yī)藥論壇雜志;2014年11期

中國博士學位論文全文數據庫 前10條

1 丁可;基因修飾成肌細胞結合可注射溫敏凝膠支架構建組織工程骨的實驗研究[D];第三軍醫(yī)大學;2013年

2 張大偉;HAb18G/CD147促進肝纖維化發(fā)生的作用及分子機制研究[D];第四軍醫(yī)大學;2013年

3 蔡洪科;microRNA-194在大腸癌上皮間質轉化中的作用及機制研究[D];浙江大學;2013年

4 張昕霞;彌漫大B細胞淋巴瘤中Notch2受體截短突變的生物學功能研究[D];浙江大學;2013年

5 王磊;PI3K/Akt抑制劑和傳統(tǒng)化療藥物對急性髓系白血病中Eps8的作用及分子機制研究[D];南方醫(yī)科大學;2013年

6 漆劍;microRNA調控Notch信號通路在白塞氏病發(fā)病機制中的作用及其遺傳易感性研究[D];重慶醫(yī)科大學;2013年

7 劉濤;靶向抑制NOTCH信號通路誘導胃癌細胞凋亡的網絡調控研究[D];蘭州大學;2014年

8 袁茵;人臍帶間充質干細胞對不同類型腫瘤細胞惡性表型的調控作用研究[D];南方醫(yī)科大學;2014年

9 陳國慶;急慢性病理條件下Notch通路調控腸粘膜屏障功能的作用及機制研究[D];第三軍醫(yī)大學;2014年

10 羅柏花;EGFL7誘導EMT促進胃癌細胞侵襲和轉移機制的研究[D];中南大學;2014年

中國碩士學位論文全文數據庫 前10條

1 張蓓;CIK細胞治療婦科惡性腫瘤的近期療效觀察[D];山東大學;2011年

2 廖貽達;FAP-α在非小細胞肺癌中的表達與意義及與外周血淋巴細胞比例的關系[D];山東大學;2012年

3 成日華;枸杞多糖對P-糖蛋白影響的研究[D];中南大學;2012年

4 石穎鵬;二甲肼聯(lián)合間斷飲用葡聚糖硫酸鈉誘導的小鼠潰瘍性結腸炎相關性大腸癌模型的建立[D];鄭州大學;2013年

5 羅艷超;納米顆粒對腫瘤免疫逃逸影響的研究[D];河北科技大學;2013年

6 黃旭暉;健脾化瘀方促進小鼠肝癌休眠的機制研究[D];廣州中醫(yī)藥大學;2013年

7 林天旗;RNA干擾Notch1基因表達對腎透明細胞癌細胞增殖、凋亡及Akt信號通路的影響[D];福建醫(yī)科大學;2013年

8 鄭旭;肺肉瘤樣癌中血管生成擬態(tài)的形成及其與上皮間充質轉化的關系[D];天津醫(yī)科大學;2013年

9 王媛;Jagged-1抑制Th17細胞分化的機制初探[D];暨南大學;2013年

10 龍海波;大鼠損傷脊髓提取液對胚胎大鼠神經干細胞增殖能力及Notch1、Hes1表達的影響[D];瀘州醫(yī)學院;2013年

【二級參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前7條

1 徐德國;王明艷;;幾種抗腫瘤藥物研究進展[J];中醫(yī)學報;2011年12期

2 于明薇;孫桂芝;吳潔;李道睿;祁鑫;張培彤;;黃芪、蘇木及其組方對荷瘤小鼠脾調節(jié)性T細胞表達及血清細胞因子水平的干預作用[J];北京中醫(yī)藥大學學報;2010年04期

3 劉莉;丁乾;姚軍霞;黃士昂;;結直腸癌患者外周血CD4~+CD25~(high)調節(jié)性T細胞分析[J];中華腫瘤防治雜志;2007年02期

4 楊宜娥;曲儀慶;林梅青;宮奇林;馬萬山;;肺癌患者胸腔積液和外周血CD4~+CD25~+調節(jié)性T細胞與細胞因子表達及其意義的研究[J];中華腫瘤防治雜志;2008年04期

5 樊慧婷;林洪生;李杰;祁鑫;裴迎霞;吳皓;;人工蛹蟲草子實體對Leiws肺癌荷瘤小鼠CD4~+CD25~+調節(jié)性T細胞的影響[J];中華腫瘤防治雜志;2009年15期

6 宋彥;朱喜科;;腫瘤免疫逃逸機制的研究新進展[J];現代腫瘤醫(yī)學;2011年06期

7 唐東昕;楊柱;龍奉璽;;葛根散對結直腸癌小鼠模型肝臟微環(huán)境Treg細胞的影響[J];時珍國醫(yī)國藥;2012年06期

中國碩士學位論文全文數據庫 前1條

1 盧琳;健脾理氣中藥對大鼠肝癌微環(huán)境Treg細胞的影響[D];湖北中醫(yī)藥大學;2010年

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中國期刊全文數據庫 前10條

1 付文波;李大主;丁世芳;何少林;王妍;黎明;馮義柏;;氧化型低密度脂蛋白對人THP1細胞Notch1表達及分泌細胞因子的影響[J];第二軍醫(yī)大學學報;2012年02期

2 楊東虹;唐文淵;徐倫山;肖華亮;周椿;許民輝;;Notch1胞內結構域在星形細胞腫瘤中的表達及其臨床意義[J];第三軍醫(yī)大學學報;2010年20期

3 李永軍;史敏;秦永亮;;Notch1信號通路與白藜蘆醇抗急性T淋巴細胞白血病作用機制研究進展[J];臨床檢驗雜志;2012年10期

4 王明義;呂瑜玫;易棵;王林;辛曉燕;王雨;;Notch1信號蛋白在卵巢癌中的表達及臨床意義[J];現代婦產科進展;2013年12期

5 王學玖;毛麗莎;葛麗華;宿穎;楊晶;王立平;張春梅;;Notch1蛋白在小鼠下頜切牙發(fā)育中的表達[J];北京口腔醫(yī)學;2014年03期

6 肖迎,唐仕波,王琪,孟晶,李斌,林少芬;維甲酸對胚胎干細胞分化過程中Notch1表達的影響[J];眼科研究;2005年03期

7 勾朝陽;哈敏文;李紅;;Notch1在人胃癌組織中的表達及意義[J];中國醫(yī)科大學學報;2010年05期

8 牛煥付;王文龍;;Notch1受體在乳腺癌組織中的表達及臨床意義的研究[J];中國現代醫(yī)生;2011年01期

9 趙春霞;李棟梁;曹玉文;付欣鴿;李鋒;;Notch1基因單核苷酸多態(tài)性與乳腺癌和增生性病變的相關性研究[J];農墾醫(yī)學;2011年02期

10 趙麗;張姣;付麗;馬勇杰;谷峰;;乳腺癌細胞Notch1蛋白表達及其與紫杉醇敏感性的關系[J];中國腫瘤臨床;2012年09期

中國重要會議論文全文數據庫 前10條

1 王季石;吳穎亞;梅麗娜;胡曉彥;楊遠;;Notch1信號系統(tǒng)對再生障礙性貧血和慢性粒細胞白血病病人骨髓造血干細胞分化和增殖的調節(jié)研究[A];第11次中國實驗血液學會議論文匯編[C];2007年

2 周敏;郭雪君;;Notch1在支氣管哮喘發(fā)生中的作用[A];中華醫(yī)學會第七次全國呼吸病學術會議暨學習班論文匯編[C];2006年

3 周小建;王衛(wèi)平;楊毅;;Notch1信號途徑在視黃酸對胸腺細胞分化發(fā)育中的作用的初步研究[A];營養(yǎng)健康新觀察（第二十四期）：營養(yǎng)與免疫專題[C];2004年

4 齊潤姿;安華章;于益芝;張明徽;劉書遜;徐紅梅;曹雪濤;;Notch1和TRAIL對肝癌細胞凋亡的影響及作用機制的研究[A];中國免疫學會第四屆學術大會會議議程及論文摘要集[C];2002年

5 隋毓秀;張志s，

本文編號：1065311