本文關(guān)鍵詞：大鼠皮膚成纖維細(xì)胞在低密度培養(yǎng)條件下基質(zhì)金屬蛋白酶9和13基因表達(dá)的抑制

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【摘要】：為探索體外促進(jìn)原代皮膚成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)分化為肌成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)條件及原代皮膚成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)分化前后兩種狀態(tài)下經(jīng)腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)刺激,其MMP基因的表達(dá)情況。利用Wistar大鼠真皮分離出的原代成纖維細(xì)胞為模型,分別以高密度與低密度將細(xì)胞培養(yǎng)于塑料界面,通過(guò)Western Blot和q RT-PCR檢測(cè)肌成纖維細(xì)胞的標(biāo)志物α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)的表達(dá)量;同時(shí)經(jīng)TNF-α刺激后,利用q RT-PCR和明膠酶譜檢測(cè)高密度與低密度兩種狀態(tài)下MMP-9和MMP-13的表達(dá)及兩種狀態(tài)下MMP-9的活性。發(fā)現(xiàn)大鼠真皮中分離出的原代成纖維細(xì)胞在低密度培養(yǎng)條件下,可以有效地轉(zhuǎn)分化為肌成纖維細(xì)胞,其標(biāo)志物α-SMA顯著上調(diào);經(jīng)腫瘤壞死因子刺激,成纖維細(xì)胞在低密度培養(yǎng)條件下MMP-9和MMP-13對(duì)TNF-α刺激的響應(yīng)程度較高密度培養(yǎng)時(shí)顯著降低。初步表明在大鼠真皮(dermis)中,原代成纖維細(xì)胞體外轉(zhuǎn)分化為肌成纖維細(xì)胞且MMP-9和MMP-13在肌成纖維細(xì)胞中下調(diào)的現(xiàn)象是細(xì)胞密度依賴型。
【作者單位】： 四川大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 基質(zhì)金屬蛋白酶 原代成纖維細(xì)胞 密度培養(yǎng) 轉(zhuǎn)分化 腫瘤壞死因子
【基金】：四川省科技支撐項(xiàng)目(2014SZ0194)
【分類號(hào)】：R751
【正文快照】： 0引言基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)是一類鋅離子依賴的肽鏈內(nèi)切酶,屬于金屬蛋白酶家族。目前已發(fā)現(xiàn)至少20種MMPs,按照作用底物可分為明膠酶、膠原酶、基質(zhì)溶解酶和膜型基質(zhì)金屬蛋白酶[1]。MMPs在結(jié)構(gòu)上具有較高的同源性,大多數(shù)MMPs都包括前肽結(jié)構(gòu)域、催化，

本文編號(hào)：1053880