發(fā)布時間：2017-08-16 16:28

  本文關(guān)鍵詞：哮喘患者循環(huán)血中嗜酸性粒細(xì)胞微粒的變化及臨床意義研究

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【摘要】：研究背景及目的:支氣管哮喘(簡稱哮喘)是呼吸系統(tǒng)常見病、多發(fā)病。近年來發(fā)病率呈逐漸上升的趨勢。它是由多種細(xì)胞和細(xì)胞組分參與的氣道慢性變態(tài)反應(yīng)性炎癥,發(fā)病機制目前尚不完全清楚,但免疫-炎癥機制被認(rèn)為是其發(fā)病的重要機制,而嗜酸性粒細(xì)胞作為主要的免疫效應(yīng)細(xì)胞參與整個炎癥反應(yīng)過程。微粒是細(xì)胞活化、損傷或凋亡后從細(xì)胞膜脫落的直徑100nm至2μm的小囊泡顆粒,具有細(xì)胞間信號傳導(dǎo)、促炎、免疫調(diào)節(jié)、組織修復(fù)等生物學(xué)活性[1],可通過與靶細(xì)胞的相互作用,啟動靶細(xì)胞的生物學(xué)效應(yīng),與疾病的發(fā)生、發(fā)展息息相關(guān)�，F(xiàn)已證實它與自身免疫性疾病(如系統(tǒng)性紅斑狼瘡)關(guān)系密切[2]。在子癇、糖尿病、膿毒血癥、腫瘤、心血管疾病[3]中發(fā)現(xiàn)循環(huán)微粒水平明顯升高,并與疾病的嚴(yán)重程度、分期及預(yù)后相關(guān)。因此,通過對微粒的檢測、分析,可能優(yōu)化疾病的診斷與治療。我們課題組前期發(fā)現(xiàn)在COPD患者BALF中淋巴細(xì)胞微粒是增高的,并證實T淋巴細(xì)胞來源的微粒通過AKT/FOXO1通路阻滯氣道上皮細(xì)胞于G1期,抑制氣道上皮生長,活化p38-MAPK通路,介導(dǎo)上皮細(xì)胞凋亡。最新研究表明,呼吸道感染可以觸發(fā)微粒的釋放,通過ATP活化,微粒依賴P2X7/caspase-1通路釋放IL-1β、IL-18,參與氣道內(nèi)中性粒細(xì)胞聚集、巨噬細(xì)胞活化和慢性炎癥反應(yīng)的維持[4-5],而感染常引起哮喘急性發(fā)作,使氣道炎癥、呼吸道癥狀加重,肺功能下降[6-7]。由此可見,微粒參與了氣道慢性炎癥過程,并起著促炎癥反應(yīng)作用。在哮喘的慢性氣道炎癥中,嗜酸性粒細(xì)胞作為主要的效應(yīng)細(xì)胞在其活化或凋亡過程中必然會產(chǎn)生微粒,然而迄今為止有關(guān)嗜酸性粒細(xì)胞微粒的變化和作用國內(nèi)外尚未見報道。因此,本研究擬檢測哮喘患者循環(huán)血中嗜酸性粒細(xì)胞微粒數(shù)目的變化,并初步探討該變化與疾病嚴(yán)重程度以及治療療效之間的可能關(guān)系,以期為哮喘診治提供新的思路。方法:按照入組標(biāo)準(zhǔn)納入研究對象共65例,其中哮喘組32例,健康對照組33例。采集外周靜脈血,將所采集的樣本進(jìn)行離心處理后,用相應(yīng)抗體標(biāo)記,應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測每100μL外周血上清液中嗜酸性粒細(xì)胞微粒的水平。哮喘組還需完成ACT量表、肺功能(FEV1、FEV1%)、Fe NO測定、血常規(guī)(Eos count)、皮膚過敏原點刺試驗等檢查,在正規(guī)抗哮喘治療(以吸入型糖皮質(zhì)激素+長效β2受體激動劑為主)3個月后再次抽取相同體積的靜脈血,檢測循環(huán)血嗜酸性粒細(xì)胞微粒水平,復(fù)查上述指標(biāo),計算各指標(biāo)前后變化率(Δ)=(治療前值-治療后值)/治療前值×100%,并將微粒變化與各指標(biāo)變化情況作相關(guān)性分析。分別按照過敏情況、哮喘控制水平將哮喘組分為過敏組、非過敏組和良好控制組、未控制組,并比較各組微粒水平。結(jié)果:1.哮喘組與對照組嗜酸性粒細(xì)胞微粒數(shù)目比較1.1檢測發(fā)現(xiàn)嗜酸性粒細(xì)胞微粒在哮喘組治療前、治療后及對照組的數(shù)目分別為:(136.81±150.08)/100μl、(50.65±33.09)/100μl、(36.78±19.99)/100μl。1.2哮喘組治療前循環(huán)血中嗜酸性粒細(xì)胞微粒數(shù)目高于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(Z=-4.069,P0.01)。1.3哮喘組治療后循環(huán)血中嗜酸性粒細(xì)胞微粒數(shù)目高于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=2.052,P=0.044)。1.4經(jīng)治療哮喘患者循環(huán)血中嗜酸性粒細(xì)胞微粒數(shù)目明顯下降,即哮喘組治療前高于治療后,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(Z=-4.526,P0.01)。2.哮喘亞組嗜酸性粒細(xì)胞微粒數(shù)目比較2.1檢測發(fā)現(xiàn)治療前良好控制組、未控制組嗜酸性粒細(xì)胞微粒數(shù)目分別為:(119.05±112.41)/100μl、(156.93±186.06)/100μl,治療后分別為:(39.76±20.83)/100μl、(63.00±40.29)/100μl,經(jīng)比較治療前兩亞組嗜酸性粒細(xì)胞微粒數(shù)目無明顯差異(Z=-0.227,P=0.821),治療后哮喘良好控制組微粒數(shù)目低于未控制組(t=-2.086,P=0.046)。2.2檢測發(fā)現(xiàn)治療前過敏組、非過敏組嗜酸性粒細(xì)胞微粒數(shù)目分別為:(149.64±154.10)/100μl、(126.83±150.58)/100μl,治療后分別為:(50.50±31.30)/100μl、(49.77±35.16)/100μl,經(jīng)比較兩亞組治療前、后微粒數(shù)目均無明顯差異(t=0.421,P=0.677;t=0.006,P=0.952)。2.3過敏組哮喘良好控制率[9(64.3%)]略高于非過敏組[8(44.4%)],但差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=1.245,P=0.265)。3.嗜酸性粒細(xì)胞微粒變化與其他臨床指標(biāo)變化的相關(guān)性3.1哮喘患者治療后肺功能指標(biāo)FEV1、FEV1%改善(P0.01),Δ微粒與ΔFEV1、ΔFEV1%呈負(fù)相關(guān)(r=-0.558,P0.01;r=-0.453,P=0.005)。3.2哮喘患者治療后血嗜酸性粒細(xì)胞計數(shù)減少(P0.01),Δ微粒與ΔEos count呈正相關(guān)(r=0.625,P0.01)。3.3哮喘患者治療后Fe NO水平減低(P0.01),Δ微粒與ΔFe NO呈正相關(guān)(r=0.313,P=0.041)。3.4哮喘患者治療后ACT評分增加(P0.01),Δ微粒與ΔACT呈負(fù)相關(guān)(r=-0.399,P=0.012)。結(jié)論:1.哮喘患者循環(huán)血中嗜酸性粒細(xì)胞微粒數(shù)目明顯高于健康對照組,并與外周血嗜酸性粒細(xì)胞、Fe NO等炎癥指標(biāo)變化一致,提示嗜酸性粒細(xì)胞微粒可能參與了哮喘慢性氣道炎癥反應(yīng)的病理生理過程。2.哮喘患者循環(huán)血中嗜酸性粒細(xì)胞微粒與FEV1、FEV1%、ACT評分之間呈負(fù)相關(guān),提示嗜酸性粒細(xì)胞微粒可能與哮喘嚴(yán)重程度有關(guān)。3.哮喘患者循環(huán)血中嗜酸性粒細(xì)胞微粒數(shù)目增多,經(jīng)正規(guī)治療微粒數(shù)目減少,其減少程度與哮喘控制水平有關(guān),提示動態(tài)監(jiān)測循環(huán)血中嗜酸性粒細(xì)胞微粒有助于哮喘控制評估。
【關(guān)鍵詞】：哮喘 嗜酸性粒細(xì)胞 微粒
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R562.25
【目錄】：

• 縮略語表4-6
• 英文摘要6-10
• 中文摘要10-13
• 前言13-15
• 1 臨床資料與方法15-16
• 2 實驗方法16-18
• 3 統(tǒng)計方法18
• 4 結(jié)果18-22
• 5 討論22-25
• 結(jié)論25-26
• 參考文獻(xiàn)26-30
• 文獻(xiàn)綜述 微粒在慢性氣道炎癥性疾病中的作用30-41
• 參考文獻(xiàn)36-41
• 附錄41-42
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果42-43
• 致謝43

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