本文關(guān)鍵詞：二甲雙胍在3T3-L1前脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)過(guò)程中對(duì)v-SNAREs蛋白家族mRNA表達(dá)的影響

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【摘要】：目的:通過(guò)觀察3T3-L1前脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化過(guò)程中二甲雙胍對(duì)v-SNAREs m RNA表達(dá)變化,探討二甲雙胍在GLUT4轉(zhuǎn)運(yùn)中的作用機(jī)制。方法:購(gòu)買3T3-L1前脂肪細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)至融合度達(dá)到100%或過(guò)融合時(shí)開(kāi)始誘導(dǎo),予以誘導(dǎo)液誘導(dǎo)分化,A液3天、B液1天,交替3次,共12天,在誘導(dǎo)過(guò)程中,分別給予不同濃度二甲雙胍(0、0.5、1、2mmol/L)持續(xù)干預(yù),第12天收集標(biāo)本。誘導(dǎo)成脂通過(guò)油紅O染色鑒定。運(yùn)用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)脂肪細(xì)胞中AMPK、GLUT4、VAMP2、3、4、5、7、8的m RNA水平。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,組間差異采用單因素方差分析,組間多重比較用LSD檢驗(yàn),檢驗(yàn)水準(zhǔn)取a=0.05。結(jié)果:AMPK、VAMP4、VAMP7 m RNA結(jié)果以單因素方差分析無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。GLUT4、VAMP2、3、5、8 m RNA結(jié)果以單因素方差分析達(dá)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,再行LSD檢驗(yàn)結(jié)果:1)與0mmol/L組相比,0.5mmol/L組GLUT4、VAMP2、3、8 m RNA水平無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);2)與0mmol/L組相比,1mmol/L組GLUT4、VAMP2、3、8 m RNA水平上調(diào),差異達(dá)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);3)與1mmol/L組相比,2mmol/L組GLUT4、VAMP2、3、8 m RNA水平下調(diào),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:二甲雙胍可以作用于前脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化過(guò)程中,在1mmol/L濃度范圍內(nèi),隨著二甲雙胍濃度增加,可以上調(diào)脂肪細(xì)胞中GLUT4、VAMP2、3、8 m RNA的表達(dá),且具有一定的劑量依賴效應(yīng)。1mmol/L可能是二甲雙胍在3T3-L1前脂肪細(xì)胞作用的最大濃度。二甲雙胍可能通過(guò)調(diào)節(jié)v-SNAREs蛋白家族發(fā)揮對(duì)脂肪細(xì)胞GLUT4的轉(zhuǎn)運(yùn)的調(diào)控。當(dāng)二甲雙胍濃度達(dá)到2mmol/L,則下調(diào)脂肪細(xì)胞中GLUT4、VAMP2、3、8 m RNA的表達(dá)。本實(shí)驗(yàn)為進(jìn)一步探索二甲雙胍在GLUT4轉(zhuǎn)運(yùn)中的具體作用機(jī)制提供理論依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：可溶性N-乙基馬來(lái)酰亞胺敏感性因子附著型的蛋白受體 3T3-L1前脂肪細(xì)胞 二甲雙胍
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R587.1
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 縮略詞表9-10
• 前言10-12
• 1 材料與方法12-18
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料12-14
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法14-17
• 1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法17-18
• 2 結(jié)果18-30
• 2.1 3T3-L1前脂肪細(xì)胞的誘導(dǎo)分化及鑒定18-20
• 2.2 不同濃度二甲雙胍對(duì)成脂分化能力的影響20-22
• 2.3 RT-PCR結(jié)果22-30
• 3 討論30-32
• 4 結(jié)論32-33
• 參考文獻(xiàn)33-38
• 綜述38-47
• 參考文獻(xiàn)42-47
• 致謝47-48
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷48

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