本文關(guān)鍵詞：乳桿菌對(duì)高脂膳食誘導(dǎo)小鼠肥胖形成抑制作用及機(jī)制研究

  更多相關(guān)文章： 乳桿菌 肥胖 脂肪因子 氧化應(yīng)激 腸道菌群

【摘要】：肥胖與高血脂、糖尿病等代謝綜合征密切相關(guān),已經(jīng)成為全球公共健康問題。肥胖的發(fā)生與很多因素相關(guān),其中長期的高脂膳食是引起肥胖的一個(gè)重要因素。由于藥物及手術(shù)等控制體重會(huì)引起一些副作用,因此,在食品科學(xué)領(lǐng)域,尋求治療高脂膳食引起的肥胖受到廣泛關(guān)注。益生菌作為一種對(duì)人體健康有益的活的微生物,現(xiàn)如今被用于治療肥胖的一種手段。然而益生菌治療肥胖的機(jī)制尚不明確,需要進(jìn)一步研究。本課題擬從三株乳酸菌中篩選出對(duì)高脂膳食誘導(dǎo)Balb/c小鼠肥胖有明顯抑制作用的益生菌株,研究其對(duì)肥胖小鼠肝臟的影響;探究肥胖小鼠腸道菌群變化及脂肪因子的改變,進(jìn)而推斷乳桿菌抑制小鼠肥胖形成的機(jī)制。開發(fā)出具有減少機(jī)體脂肪沉積的專用益生菌產(chǎn)品,為肥胖的預(yù)防和控制提供新的思路。給高脂膳食Balb/c小鼠以108及109CFU/mL劑量灌胃由本實(shí)驗(yàn)室分離鑒定得到的Lactobacillus paracasei subsp.Paracasei M5(M5),Lactobacillus paracasei subsp.Paracase I X12(X12),Lactobacillus coryniformis subsp.torquens T3(T3)三株乳桿菌,6周末,M5及T3顯著降低小鼠體重,體脂率及Lee’s指數(shù)(P0.05),并且呈現(xiàn)出劑量依賴性。通過測定小鼠血清甘油三酯(TG),總膽固醇(TC),高密度脂蛋白(HDL),低密度脂蛋白含量(LDL),結(jié)果顯示,M5及T3高劑量組顯著降低血清TG、TC、LDL含量,顯著升高HDL含量(P0.05)。同時(shí)三株乳桿菌以相同劑量灌胃對(duì)照膳食組小鼠,并未對(duì)小鼠產(chǎn)生不良影響。綜上結(jié)果提示,M5及T3菌株能抑制高脂膳食引起的小鼠肥胖及血脂升高。三株乳桿菌通過抑制肝臟脂質(zhì)累積及氧化應(yīng)激,從而抑制了非酒精性脂肪肝的發(fā)生:通過肝臟HE染色切片可見,乳桿菌灌胃高脂膳食小鼠后,T3及M5兩株菌明顯改善小鼠肝臟脂肪病變;通過對(duì)肝臟甘油三脂含量的測定可知,乳桿菌的灌胃降低了高脂膳食小鼠的肝臟TG含量,抑制了肝臟脂質(zhì)的累積,從而抑制了脂肪肝的發(fā)生,其中T3及M5兩株菌效果顯著(P0.05);長期高脂膳食使小鼠肝臟受到氧化損傷,乳桿菌灌胃小鼠后,小鼠肝臟抗氧化酶SOD,GSH-Px,CAT水平顯著升高(P0.05),且呈現(xiàn)出劑量依賴性;同時(shí)肝臟MDA水平下降,T-AOC水平升高,抗氧化能力增強(qiáng),同樣是T3及M5兩株菌效果好于X12;并且小鼠體脂率與SOD、GSH-Px、CAT及T-AOC呈負(fù)相關(guān),與MDA呈正相關(guān)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示乳桿菌T3及M5有效抑制了肝臟的損傷,為預(yù)防肥胖引起的脂肪肝提供了新思路。乳桿菌通過調(diào)節(jié)脂肪因子的表達(dá)來控制肥胖發(fā)生:采用ELISA法測定小鼠血清瘦素及脂聯(lián)素的含量,結(jié)果顯示M5及T3灌胃6周后,血清瘦素水平降低,及脂聯(lián)素水平顯著升高(P0.05);RT-PCR法檢測小鼠脂肪組織中相關(guān)脂肪因子的表達(dá),結(jié)果顯示高脂膳食使PPAR-γ、TNF-α及FAS表達(dá)量顯著升高,經(jīng)M5及T3灌胃6周后顯著降低了其表達(dá)量;X12效果不顯著(P0.05)。通過高通量測序方法對(duì)小鼠腸道菌群多樣性進(jìn)行分析。高脂膳食誘導(dǎo)的小鼠肥胖使小鼠腸道菌群發(fā)生變化,肥胖使厚壁桿菌與擬桿菌門的比值降低,乳桿菌M5、T3灌胃6周后,小鼠腸道菌群多樣性發(fā)生變化,通過PCoA分析可知,M5、T3干預(yù)使高脂膳食小鼠腸道菌群組成趨近于普通膳食小鼠。通過對(duì)結(jié)腸組織MDA和T-AOC含量的測定,結(jié)果顯示M5及T3顯著降低MDA,提高T-AOC含量(P0.05)。結(jié)合高通量測序結(jié)果的比較分析可知,灌胃M5、T3后有效控制了由高脂膳食引起的腸道氧化還原環(huán)境的改變,對(duì)維護(hù)腸道菌群平衡起到了重要作用。乳桿菌可能通過改變小鼠腸道菌群來抑制小鼠肥胖的形成。
【關(guān)鍵詞】：乳桿菌 肥胖 脂肪因子 氧化應(yīng)激 腸道菌群
【學(xué)位授予單位】：哈爾濱工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：TS201.3;R589.2
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-12
• 第1章 緒論12-23
• 1.1 課題研究背景及研究目的和意義12-13
• 1.2 肥胖概述13-14
• 1.2.1 肥胖的產(chǎn)生原因及危害13
• 1.2.2 治療肥胖的措施13-14
• 1.3 腸道菌群與肥胖14-17
• 1.3.1 腸道菌群組成14-15
• 1.3.2 高脂膳食與腸道菌群15
• 1.3.3 腸道菌群與能量平衡15-17
• 1.4 益生菌與肥胖17-21
• 1.4.1 益生菌概述17
• 1.4.2 益生菌與肥胖17-20
• 1.4.3 益生菌控制肥胖的作用機(jī)制20-21
• 1.5 本課題主要研究內(nèi)容21-23
• 1.5.1 研究內(nèi)容21-22
• 1.5.2 本課題的技術(shù)路線22-23
• 第2章 材料和方法23-39
• 2.1 材料及儀器23-26
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑23-24
• 2.1.2 主要試劑配制24
• 2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器24-25
• 2.1.4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及飼料25-26
• 2.2 基本實(shí)驗(yàn)操作26-28
• 2.2.1 實(shí)驗(yàn)菌種26
• 2.2.2 菌落計(jì)數(shù)26-27
• 2.2.3 菌株準(zhǔn)備27
• 2.2.4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組27-28
• 2.2.5 實(shí)驗(yàn)樣本的制備28
• 2.3 小鼠肥胖相關(guān)指標(biāo)的測定28-29
• 2.3.1 肥胖一般性指標(biāo)的測定28
• 2.3.2 血清血脂及膽固醇含量的測定28-29
• 2.4 乳桿菌對(duì)高脂膳食小鼠肝臟的影響29-31
• 2.4.1 肝臟脂質(zhì)含量的測定29-30
• 2.4.2 肝臟組織切片HE染色30
• 2.4.3 肝臟氧化還原指標(biāo)的測定30-31
• 2.5 乳桿菌對(duì)高脂膳食小鼠脂肪因子表達(dá)的影響31-35
• 2.5.1 乳桿菌對(duì)小鼠血清瘦素及脂聯(lián)素的影響31
• 2.5.2 RT-PCR檢測脂肪組織中肥胖相關(guān)脂肪因子的表達(dá)31-35
• 2.6 高通量測序技術(shù)分析小鼠腸道菌群35-38
• 2.6.1 小鼠糞便DNA提取35-36
• 2.6.2 PCR擴(kuò)增36-37
• 2.6.3 瓊脂糖凝膠DNA回收37-38
• 2.6.4 序列生物信息基本分析38
• 2.6.5 結(jié)腸組織MDA及T-AOC含量測定38
• 2.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析38-39
• 第3章 乳桿菌對(duì)高脂膳食誘導(dǎo)小鼠肥胖抑制作用研究39-47
• 3.1 前言39
• 3.2 菌落計(jì)數(shù)39
• 3.3 灌胃三株乳桿菌對(duì)小鼠肥胖相關(guān)指標(biāo)的影響39-42
• 3.3.1 灌胃三株乳桿菌對(duì)小鼠體重的影響39-41
• 3.3.2 灌胃三株乳桿菌對(duì)小鼠Lee’s指數(shù)的影響41-42
• 3.3.3 灌胃三株乳桿菌對(duì)小鼠體脂率的影響42
• 3.4 灌胃三株乳桿菌對(duì)小鼠臟器指數(shù)的影響42-43
• 3.5 灌胃三株乳桿菌對(duì)小鼠血清TG、TCH、HDL、LDL的影響43-46
• 3.6 本章小結(jié)46-47
• 第4章 乳桿菌對(duì)高脂膳食小鼠肝臟脂質(zhì)累積及氧化應(yīng)激的影響47-54
• 4.1 前言47
• 4.2 乳桿菌對(duì)肥胖小鼠肝臟脂肪性病變的影響47-48
• 4.3 乳桿菌對(duì)高脂膳食小鼠肝臟甘油三酯含量的影響48-49
• 4.4 乳桿菌對(duì)高脂膳食小鼠肝臟抗氧化酶的影響49-51
• 4.5 乳桿菌對(duì)高脂膳食小鼠肝臟MDA的影響51
• 4.6 乳桿菌對(duì)高脂膳食小鼠肝臟T-AOC的影響51-52
• 4.7 肥胖與肝臟抗氧化相關(guān)性分析52-53
• 4.8 本章小結(jié)53-54
• 第5章 乳桿菌對(duì)高脂膳食小鼠脂肪組織中脂肪因子表達(dá)的影響54-62
• 5.1 前言54
• 5.2 灌胃三株乳桿菌對(duì)高脂膳食小鼠血清瘦素含量的影響54-55
• 5.3 灌胃三株乳桿菌對(duì)高脂膳食小鼠血脂聯(lián)素含量的影響55-56
• 5.4 三株乳桿菌對(duì)高脂膳食小鼠PPAR-γ 及CEBP-α 表達(dá)量的影響56-57
• 5.5 三株乳桿菌對(duì)高脂膳食小鼠TNF-α 表達(dá)量的影響57-59
• 5.6 三株乳桿菌對(duì)高脂膳食小鼠FAS表達(dá)量的影響59-60
• 5.7 本章小結(jié)60-62
• 第6章 乳桿菌對(duì)高脂膳食小鼠腸道菌群的影響62-73
• 6.1 前言62
• 6.2 小鼠糞便細(xì)菌 16SrDNA V3-V4可變區(qū)PCR擴(kuò)增結(jié)果62
• 6.3 數(shù)據(jù)優(yōu)化統(tǒng)計(jì)62-63
• 6.4 OTU分析結(jié)果63-64
• 6.5 菌群多樣性分析64-65
• 6.6 Alpha多樣性分析65-67
• 6.6.1 Chao、ACE、Shannon和Simpson指數(shù)計(jì)算65-66
• 6.6.2 稀疏曲線繪制結(jié)果66-67
• 6.7 Beta多樣性分析67-69
• 6.8 小鼠結(jié)腸組織氧化應(yīng)激與腸道菌群關(guān)系69-71
• 6.8.1 小鼠結(jié)腸組織勻漿MDA含量與腸道菌群關(guān)系69-70
• 6.8.2 小鼠結(jié)腸組織勻漿T-AOC含量與腸道菌群關(guān)系70-71
• 6.9 小鼠結(jié)腸組織HE染色結(jié)果71-72
• 6.10 本章小結(jié)72-73
• 結(jié)論73-75
• 參考文獻(xiàn)75-84
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文及其他成果84-86
• 致謝86

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 王小梅;張艷秋;景會(huì)鋒;;有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)高脂膳食大鼠血液中胃促生長素及血脂的影響[J];職業(yè)與健康;2014年08期

2 李翠珍;趙剛;;不同游泳時(shí)間對(duì)高脂膳食大鼠血清瘦素及胰島素水平的影響[J];中國科技信息;2009年24期

3 李翠珍;趙剛;;耐力訓(xùn)練對(duì)雄性高脂膳食大鼠脂代謝異常及胰島素水平的影響[J];遼寧大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2008年04期

4 ;[J];;年期

中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王建設(shè);羅艷蕊;李新;梅濤;孫景權(quán);崔迪;;有氧運(yùn)動(dòng)和茶多酚對(duì)高脂膳食大鼠體重及脂代謝的影響[A];中國生理學(xué)會(huì)第23屆全國會(huì)員代表大會(huì)暨生理學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要文集[C];2010年

2 孫長顥;于新鳳;李穎;劉榮;王海英;;膳食鈣對(duì)高脂膳食大鼠血糖、血脂及激素的影響[A];達(dá)能營養(yǎng)中心青年科學(xué)工作者論壇優(yōu)秀論文集2004年第2期[C];2004年

3 陳偉強(qiáng);;高脂膳食增加健康青年人心血管對(duì)應(yīng)激的反應(yīng)性[A];營養(yǎng)健康新觀察（第三十五期）：膳食營養(yǎng)與血脂異常[C];2007年

4 信延寧;張海峰;范秋菊;;生長期游泳運(yùn)動(dòng)對(duì)高脂膳食大鼠脂肪細(xì)胞體積和數(shù)目影響的研究[A];第九屆全國體育科學(xué)大會(huì)論文摘要匯編(4)[C];2011年

5 白慧稱;李軍;劉敬浩;田永路;朱德生;;高脂膳食對(duì)小鼠生化及病理形態(tài)的影響[A];實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與藥理學(xué)、毒理學(xué)研究學(xué)術(shù)交流會(huì)論文匯編[C];2009年

6 王玲;王一洋;王衛(wèi)香;王德春;柯生良;李蓓;許祥子;;孕哺期高脂膳食對(duì)仔鼠血脂及學(xué)習(xí)能力的影響[A];中國西部第六屆營養(yǎng)與健康學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2011年

7 王玲;王衛(wèi)香;王一洋;柯生良;王德春;;孕哺期高脂膳食對(duì)成年后仔鼠脂代謝及學(xué)習(xí)能力的影響[A];營養(yǎng)與老年代謝病——達(dá)能營養(yǎng)中心第十四屆學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2011年

8 李寧川;胡玉龍;陳小燕;李鈴;陳婧s，

本文編號(hào)：609618