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染色質(zhì)組蛋白乙;瘜IGF誘導(dǎo)的胰島素基因及其轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)的影

發(fā)布時(shí)間:2017-07-29 03:08

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【摘要】:目的探索C-Fos誘導(dǎo)生長因子(C-Fos-Induced Growth Factor,FIGF)對胰島素基因(Insulin)及其轉(zhuǎn)錄因子神經(jīng)源素3(neurogenin3,Ngn3)、肌腱膜的纖維肉瘤腫瘤基因系物A(Fibrosar-coma oncogene family,protein A,MafA)的表達(dá)水平的影響,并進(jìn)一步在表觀遺傳學(xué)上探索組蛋白乙;谶@一胰島素基因表達(dá)體系中的調(diào)節(jié)作用。方法培養(yǎng)小鼠胎肝細(xì)胞系(BNL),用帶FIGF基因的腺病毒載體轉(zhuǎn)染小鼠胎肝細(xì)胞,設(shè)置綠色熒光蛋白空載體腺病毒為對照組;Real time-PCR檢測FIGF基因相對表達(dá)量,胰島素基因及轉(zhuǎn)錄因子Ngn3、MafA基因的相對表達(dá)量;用帶FIGF基因的腺病毒載體轉(zhuǎn)染小鼠胎肝細(xì)胞,設(shè)置綠色熒光蛋白空載體腺病毒為對照組;提取核蛋白應(yīng)用ELISA方法檢測組蛋白乙酰化酶(HAT)活性水平,組蛋白去乙;(HDAC)活性水平,提取全基因組組蛋白檢測組蛋白H3、組蛋白H4乙;健=Y(jié)果RT-PCR結(jié)果顯示:實(shí)驗(yàn)組較對照組和空白組FIGF基因相對表達(dá)量顯著增高差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),實(shí)驗(yàn)組胰島素基因及轉(zhuǎn)錄因子Ngn3、MafA較對照組有不同程度的增高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。Western Blot結(jié)果顯示轉(zhuǎn)錄因子Ngn3、MafA蛋白表達(dá),在檢測組蛋白乙酰化酶(HAT)活性,組蛋白去乙;(HDAC)活性,組蛋白H3/H4乙;胶蟀l(fā)現(xiàn),實(shí)驗(yàn)組HAT活性較對照組和空白組明顯增高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),實(shí)驗(yàn)組HDAC活性較對照組和空白組明顯降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),組蛋白H3/H4乙;綄(shí)驗(yàn)組高于對照組和空白組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論FIGF基因在小鼠胎肝細(xì)胞中高表達(dá),激活胰島素基因,胰島素轉(zhuǎn)錄因子Ngn3、MafA不同程度高表達(dá),說明FIGF在胰島素基因表達(dá)過程中調(diào)控胰島素基因及其轉(zhuǎn)錄因子表達(dá);HAT活性增高說明FIGF促進(jìn)組蛋白乙;傅淖饔,調(diào)節(jié)乙酰化修飾作用,組蛋白H3/H4乙;皆黾颖砻鲗(shí)驗(yàn)組組蛋白H3/H4存在明顯乙酰化修飾作用,FIGF過表達(dá)在非β細(xì)胞內(nèi)激活胰島素因,這一激活過程伴隨MafA、Ngn3等轉(zhuǎn)錄因子基因的表達(dá)增高,而這一過程中可能的調(diào)節(jié)機(jī)制之一是通過染色質(zhì)組蛋白乙酰化修飾作用來進(jìn)行。
【關(guān)鍵詞】:FIGF 胰島素 組蛋白乙;
【學(xué)位授予單位】:寧夏醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R587.1
【目錄】:
  • 摘要4-6
  • ABSTRACT6-8
  • 符號(hào)說明8-11
  • 前言11-15
  • 第一部分 FIGF在BNL中過表達(dá)誘導(dǎo)胰島素基因及轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)15-28
  • 材料與方法15-24
  • 實(shí)驗(yàn)結(jié)果24-28
  • 第二部分 ELISA法檢測組蛋白乙;揎椀淖饔28-41
  • 材料與方法28-38
  • 實(shí)驗(yàn)結(jié)果38-41
  • 討論41-44
  • 結(jié)論44-45
  • 參考文獻(xiàn)45-49
  • 綜述49-59
  • 參考文獻(xiàn)54-59
  • 致謝59-60
  • 攻讀學(xué)位期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文60-61
  • 個(gè)人簡歷61

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本文編號(hào):587192

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