本文關(guān)鍵詞：rSjFBPA和rSjCystatin對(duì)NOD小鼠1型糖尿病的干預(yù)

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【摘要】：目的1型糖尿病(T1DM)是以T細(xì)胞介導(dǎo)的特異性胰島β細(xì)胞損傷為特征的自身免疫性疾病,大量的研究已經(jīng)證實(shí),多數(shù)慢性器官特異性損傷的自身免疫性疾病都與Th1/Th2免疫失衡、調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(CD4+CD25+highFox P3+,Treg)和Th17異常增殖有關(guān)。此外,也有研究報(bào)道,蠕蟲(chóng)感染、蟲(chóng)體或蟲(chóng)卵的抗原免疫能夠誘導(dǎo)調(diào)節(jié)T細(xì)胞和Th2細(xì)胞的增殖,可以阻止或減輕自身免疫病的發(fā)生,在T1DM動(dòng)物模型試驗(yàn)中同樣取得滿意的結(jié)果。本研究擬利用從血吸蟲(chóng)成蟲(chóng)已篩選和鑒定出的Th2型優(yōu)勢(shì)應(yīng)答的免疫調(diào)節(jié)分子重組日本血吸蟲(chóng)果糖二磷酸醛縮酶(rSjFBPA)和半胱氨酸蛋白酶抑制劑(rSjCystatin),在NOD小鼠糖尿病發(fā)生前進(jìn)行干預(yù),評(píng)估免疫后NOD小鼠糖尿病發(fā)生及發(fā)展情況,觀察干預(yù)后NOD小鼠體內(nèi)Th1、Th2、Th17和Treg細(xì)胞以及相應(yīng)細(xì)胞因子的水平,闡明重組抗原的免疫調(diào)節(jié)機(jī)制,為糖尿病的預(yù)防和治療開(kāi)辟新的途徑。方法將4w齡NOD小鼠隨機(jī)分成三組,每周分別用相同劑量或體積的PBS(100μl/只)、rSjFBPA(50μg/只)和rSjCystatin(50μg/只)腹腔注射,連續(xù)注射四周。為了加速NOD小鼠T1DM的發(fā)生,在小鼠7w齡和9w齡時(shí)用200g/kg環(huán)磷酰胺作兩次大劑量腹腔注射。小鼠從第四周開(kāi)始每周檢測(cè)一次血糖和體重。在第二次注射環(huán)磷酰胺3周后將小鼠麻醉處死,取胰腺進(jìn)行HE染色和免疫組化檢測(cè)胰島素分泌情況,觀察小鼠胰腺的β細(xì)胞數(shù)量和胰小島等病理變化,評(píng)估糖尿病的發(fā)生和發(fā)展情況。分離免疫小鼠的脾臟單個(gè)核細(xì)胞,體外PMA和離子霉素重新刺激,收集培養(yǎng)細(xì)胞和培養(yǎng)上清,分別用Real-time PCR、FCM、ELISA檢測(cè)Th1、Th2、Treg和Th17細(xì)胞增殖及相關(guān)細(xì)胞因子表達(dá)情況,比較PBS對(duì)照組與rSjFBPA和rSjCystatin干預(yù)后NOD小鼠糖尿病的發(fā)生和發(fā)展情況。結(jié)果相對(duì)于PBS處理組,rSjFBPA和rSjCystatin處理組的NOD小鼠T1DM的發(fā)病率明顯減少,平均血糖水平明顯降低,并且發(fā)病時(shí)間也有明顯延遲,體重明顯增加;rSjFBPA和rSjCystatin處理組的胰腺組織HE染色和免疫組化也顯示了炎癥浸潤(rùn)減輕、胰島功能保留相對(duì)較好。Real-time PCR、FCM和ELISA測(cè)定的Th1、Th2、Th17和Treg細(xì)胞以及相應(yīng)細(xì)胞因子水平結(jié)果表明,以IL-4為代表的Th2和以IL-10和TGF-β為代表的Tregs上調(diào),而以IFN-γ為代表的Th1下調(diào),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,以IL-17A為代表的Th17無(wú)明顯變化,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論rSjFBPA和rSjCystatin重組蛋白可以預(yù)防或延緩NOD小鼠T1DM的發(fā)生、減輕NOD小鼠T1DM的病理發(fā)展,因此,rSjFBPA或rSjCystatin可能是類似T1DM等以Th1為優(yōu)勢(shì)應(yīng)答的自身免疫性疾病的潛在的新藥物。
【關(guān)鍵詞】：T1DM 日本血吸蟲(chóng) rSjFBPA rSjCystatin 免疫調(diào)節(jié)
【學(xué)位授予單位】：蚌埠醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R587.1
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 1. 前言9-11
• 2. 材料與方法11-21
• 3. 結(jié)果21-28
• 4. 討論28-30
• 5. 結(jié)論30
• 參考文獻(xiàn)30-34
• 致謝34-35
• 附錄35-49
• 附錄A 英文縮略詞對(duì)照表35-37
• 附錄B 綜述37-48
• 參考文獻(xiàn)41-48
• 附錄C 個(gè)人簡(jiǎn)介48-49

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 董光富,葉任高,史偉,劉雙信,汪濤,陽(yáng)曉,楊念生,余學(xué)清;IL-17 induces autoantibody overproduction and peripheral blood mononuclear cell overexpression of IL-6 in lupus nephritis patients[J];Chinese Medical Journal;2003年04期

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本文編號(hào)：585336