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骨形態(tài)發(fā)生蛋白7在高糖環(huán)境下對成骨細胞分化的影響

發(fā)布時間:2017-07-20 03:15

  本文關鍵詞:骨形態(tài)發(fā)生蛋白7在高糖環(huán)境下對成骨細胞分化的影響


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【摘要】:目的:研究對于重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白7(bone morphogenetic protein7,BMP7)在持續(xù)穩(wěn)定高糖環(huán)境下對成骨細胞生物學性能及成骨活性的影響。方法:細胞取小鼠顱頂前成骨細胞亞克隆14(MC3T3-E1Subclone 14,MC3T3),分為4組:正常生理糖濃度組(葡萄糖濃度為5.5mmol/L)為對照組,生理糖濃度+BMP7組高糖組(葡萄糖濃度為5.5mmol/L,BMP7濃度為100μg/L)(葡萄糖濃度為25 mmol/L),高糖+BMP7組(葡萄糖濃度為25mmol/L,BMP7濃度為100μg/L)。甲基噻唑基四唑(MTT)法檢測不同條件培養(yǎng)后1d、3d、5d、7d后的細胞增殖情況,成骨誘導檢測細胞堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性。羅丹明-鬼筆環(huán)肽染色后以激光共聚焦顯微鏡觀察MC3T3細胞骨架于BMP7作用24h后的形態(tài)變化,熒光實時定量PCR(quantitative real-time PCR,RT-qPCR)檢測BMP7作用48h后成骨基因特異性轉錄因子2(Runx2),骨鈣素(osteocalcin,OCN)、堿性磷酸酶(ALP)的mRNA表達。結果:MTT實驗顯示25mmol/L葡萄糖可抑制MC3T3增殖(P0.05),加入BMP7后可提高細胞增值率(P0.05)。并可上調高糖導致的ALP活性下降。細胞骨架觀察結果顯示,對照組細胞骨架成束狀鋪開,交織成網,較為均勻。高糖組細胞微絲解聚成團狀,模糊不清。RT-qPCR結果顯示BMP7可促進MC3T3細胞的ALP、OCN及Runx2(P0.05)的表達。結論:持續(xù)穩(wěn)定高糖環(huán)境能夠抑制成骨細胞的增殖及ALP活性,影響細胞骨架結構,抑制成骨基因表達,添加BMP7可以在不同程度上反轉該趨勢,但仍較正常水平低。
【作者單位】: 濱州醫(yī)學院口腔醫(yī)學院修復科;
【關鍵詞】骨形態(tài)發(fā)生蛋白 成骨細胞高糖細胞骨架
【分類號】:R587.1;R783
【正文快照】: 糖尿病(diebetes mellitus,DM)是一種常見的慢性內分泌代謝性疾病,骨質疏松是2型DM并發(fā)癥之一[1],同時也影響其頜骨和牙槽骨的再生,在種植體周圍則表現為種植體周圍骨喪失,種植體周圍炎等,而其骨代謝紊亂的機制尚未明確[2,3]。骨形態(tài)發(fā)生蛋白7(bone morphogenetic protein7,BM

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