本文關鍵詞：Beclin1、LC3、Atg9a mRNA及氧化應激指標在類風濕關節(jié)炎中的表達及臨床意義

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【摘要】：目的:本研究檢測分析RA患者和健康人群外周血單個核細胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中自噬相關基因Beclin1、LC3、Atg9a的表達;RA患者、健康人群及其他自身免疫性疾病,包括骨性關節(jié)炎(osteoarthritis,OA)、強直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)、痛風患者血清中氧化應激指標水平;RA、其他自身免疫性疾病患者關節(jié)滑液中氧化應激指標水平,并分析Beclin1、LC3、Atg9a mRNA相對表達量與氧化應激指標的相關性。旨在探討自噬、氧化應激在RA中的作用及三者之間的關系,以期發(fā)現(xiàn)有效的藥物治療靶點、診斷標志物和監(jiān)測指標。方法:選取符合診斷標準的RA患者54例、健康人群44例作為研究對象,采集其空腹外周血,差速密度梯度離心法分離PBMCs后提取總RNA,采用反轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)和實時熒光定量PCR(real-time PCR)方法檢測并分析Beclin1、LC3、Atg9a mRNA的表達量;選取RA患者54例,健康人群44例,其他自身免疫性疾病患者24例收集血清,另選取RA患者、其他自身免疫性疾病患者各18例收集關節(jié)滑液,比色法檢測分析研究對象血清、關節(jié)滑液中氧化應激指標丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)的水平,并對RA患者這三項氧化應激指標與自噬相關基因Beclin1、LC3、Atg9a進行相關性分析。結(jié)果:real-time PCR結(jié)果:1.RA組相較健康對照組,LC3 mRNA在PBMCs中相對表達量顯著升高,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);Beclin1、Atg9a mRNA表達量略有升高,但差異不具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。2.與RA治療前組相較,治療后組Beclin1、LC3 mRNA相對表達量顯著降低(P0.05),而Atg9a mRNA治療后相對表達量略有下降但沒有統(tǒng)計學差異(P0.05);3.LC3 mRNA在RA疾病活動期相對表達量升高且在四個活動期亞組間均有差異,活動度越高,LC3mRNA表達量越高(P0.05),而Beclin1、Atg9a mRNA在疾病活動期和疾病緩解期無明顯差異(P0.05)。氧化應激檢測結(jié)果:1.血清中,RA組MDA、NO水平相較健康對照組顯著升高,SOD水平顯著下降(P0.05);2.關節(jié)滑液中,RA組與其他自身免疫性疾病組MDA、NO二者無統(tǒng)計學差異;SOD在兩組中水平降低,但無明顯差異(P0.05);3.RA組治療后血清中MDA、NO水平較治療前下降,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);治療后SOD水平顯著升高,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。4.MDA水平在RA疾病活動期升高(P0.05),而在不同活動度組間沒有差異(P0.05)。SOD水平在RA疾病活動期降低,緩解期升高(P0.05),且隨疾病活動度的降低,SOD的水平逐漸升高,組間差異明顯(P0.05)。NO水平在疾病活動期和緩解期無明顯差異(P0.05)。5.NO水平與自噬呈正相關(r=0.389,0.394;P0.05),而MDA、SOD水平與自噬相關基因不相關。結(jié)論:RA患者存在自噬增高和氧化應激的狀態(tài),且自噬與活性氧水平相關。自噬可作為治療靶點改善RA患者的病情,氧化應激指標可成為監(jiān)測療效新指標。
【關鍵詞】：細胞自噬 氧化應激 類風濕關節(jié)炎
【學位授予單位】：蘭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R593.22
【目錄】：

• 中文摘要3-5
• Abstact5-9
• 緒論9-14
• 1.1 類風濕關節(jié)炎概況9
• 1.2 細胞自噬的概況9-10
• 1.3 細胞自噬與RA10-11
• 1.4 氧化應激概況11-12
• 1.5 氧化應激與細胞自噬12-13
• 1.6 氧化應激與RA13-14
• 第一章材料與方法14-24
• 2.1 研究對象14-16
• 2.2 實驗儀器設備16-17
• 2.3 試劑與耗材17
• 2.4 實驗方法17-22
• 2.5 數(shù)據(jù)整理及統(tǒng)計學分析22-24
• 第二章實驗結(jié)果24-36
• 3.1 Beclin-1、LC3、Atg9a mRNA在RA中的臨床意義24-29
• 3.2 氧化應激在RA中的臨床意義29-36
• 第三章討論36-40
• 4.1 細胞自噬與RA36-38
• 4.2 氧化應激與RA38-40
• 第四章結(jié)論40-41
• 參考文獻41-46
• 在校期間研究成果46-47
• 縮略詞表47-48
• 致謝48

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本文編號：541981