本文關(guān)鍵詞：內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在糖尿病腎組織足細(xì)胞損傷中的表達(dá)和意義，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究背景 糖尿病腎病是糖尿病最常見的微血管并發(fā)癥之一,中晚期以大量蛋白尿及彌漫腎小球硬化為主要表現(xiàn)。糖尿病腎病是引起終末期腎衰竭(End Stage Renal Disease, ESRD)的重要原因之一。研究表明在糖尿病腎病發(fā)病過程中,足細(xì)胞數(shù)目明顯減少,并且減少的程度與蛋白尿量成正相關(guān),足細(xì)胞數(shù)目越少,患者進(jìn)展至終末期腎衰竭的速度越快。足細(xì)胞是高度分化的細(xì)胞,沒有再生功能。因此,足細(xì)胞數(shù)量減少所造成的腎小球?yàn)V過屏障破壞將無法修復(fù)。足細(xì)胞的特異性突觸連接蛋白(Synaptopodin)主要表達(dá)在細(xì)胞膜上,WT-1是足細(xì)胞特異性核蛋白,表達(dá)在細(xì)胞核上,通過對(duì)這兩者的觀察可以間接了解足細(xì)胞的損傷情況。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激是細(xì)胞的一種適應(yīng)性反應(yīng),細(xì)胞在受到外界刺激時(shí)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)會(huì)通過增加蛋白的降解和運(yùn)輸來加強(qiáng)細(xì)胞對(duì)有害刺激的抵抗能力。GRP78是一種內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激分子伴侶,它的表達(dá)在一定程度上反映了內(nèi)質(zhì)網(wǎng)對(duì)應(yīng)激調(diào)節(jié)的強(qiáng)度,有研究證實(shí)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與腎組織損傷存在一定的關(guān)系,但是在糖尿病腎病腎組織的足細(xì)胞上還缺乏深入的研究。 我院陶建瓴副教授等曾在早期糖尿病腎病動(dòng)物模型上觀察到ERS與腎組織足細(xì)胞損傷具有相關(guān)性,但是目前仍然缺乏有關(guān)ERS在糖尿病腎病中晚期及糖尿病前期腎組織足細(xì)胞損傷的體內(nèi)研究。本研究通過臨床和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)兩部分分別對(duì)中晚期糖尿病腎病和糖尿病前期兩個(gè)階段進(jìn)行研究,以期了解內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在糖尿病腎臟足細(xì)胞損傷中的表達(dá)和意義。 研究目的 1、觀察內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激蛋白GRP78在中晚期糖尿病腎病患者腎組織足細(xì)胞中的表達(dá)： 2、檢測(cè)糖尿病前期動(dòng)物模型中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激是否激活,及與足細(xì)胞損傷的關(guān)系。 研究方法 1、選取2001年1月至2011年1月北京協(xié)和醫(yī)院腎內(nèi)科接受腎活檢確診為DN的48例患者,分析其臨床資料,將患者分為尿蛋白量3.5g/d組(n=31)和尿蛋白量3.5g/d組(n=17)兩組。行威廉姆斯腫瘤蛋白1(WT-1)免疫組化染色。腎組織足細(xì)胞骨架蛋白Synaptopodin和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激蛋白GRP78行免疫熒光雙染,在激光共聚焦顯微鏡下觀察。 2、以SPF級(jí)Wistar大鼠36只為研究對(duì)象,分成實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組,每組大鼠18只,對(duì)實(shí)驗(yàn)組進(jìn)行棕櫚酸鹽的飼養(yǎng),對(duì)照組進(jìn)行正常飲食喂養(yǎng),分別在3、6、9周檢測(cè)血清胰島素水平,進(jìn)行WT-1免疫組化染色檢測(cè)足細(xì)胞數(shù)量變化,同時(shí)免疫印記法(Western blotting)檢測(cè)Synaptopodin和GRP78的表達(dá),觀察糖尿病前期腎組織足細(xì)胞骨架蛋白Synaptopodin的損傷情況,及與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激狀態(tài)之間的關(guān)系。 研究結(jié)果 1、48例DN患者平均年齡為45.4±11.2歲,男女比例1：1,病理類型表現(xiàn)為彌漫硬化型22例(46%),結(jié)節(jié)硬化型26(54%)例。兩組之間足細(xì)胞WT-1陽性表達(dá)面積有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.003),足細(xì)胞密度隨著尿蛋白量的增加逐漸降低,兩者之間呈負(fù)相關(guān)(P=0.005)。免疫熒光檢測(cè)腎小球Synaptopodin及GRP78表達(dá)呈線樣沿基底膜排列,并且隨著尿蛋白量增加Synaptopodin和GRP78的表達(dá)量均降低,具有顯著差異性(P=0.004、P=0.001)。 2、36只大鼠分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,結(jié)果顯示：1)實(shí)驗(yàn)組血清胰島素水平在飼養(yǎng)6周后發(fā)生明顯升高,和對(duì)照組比較在3周沒有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),在第6和9周胰島素水平實(shí)驗(yàn)組明顯高于對(duì)照組(P0.05)。2)實(shí)驗(yàn)組血脂、血糖及尿素氮等輕度升高,但與對(duì)照組比較無明顯差異(P0.05)。3)腎組織足細(xì)胞核蛋白WT-1表達(dá)實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組一致,均無明顯下降(P0.05),實(shí)驗(yàn)組腎組織足細(xì)胞骨架蛋白Synaptopodin與對(duì)照組沒有明顯的差別(P0.05),但內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激蛋白GRP78在6周開始明顯高于對(duì)照組(P0.05),與胰島素升高狀態(tài)基本平行。 結(jié)論 1.糖尿病腎病中晚期患者隨著尿蛋白量的增加,足細(xì)胞損傷情況逐漸加重,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激蛋白GRP78也隨著足細(xì)胞損傷的加重表達(dá)下降,并且兩者具有相關(guān)性。 2.內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激蛋白GRP78在糖尿病前期動(dòng)物模型腎組織足細(xì)胞上表達(dá)升高,表明此時(shí)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激已經(jīng)激活,但并未觀察到足細(xì)胞特異性核蛋白WT-1和骨架蛋白Synaptopodin表達(dá)量的下降。
【關(guān)鍵詞】：糖尿病 糖尿病腎病 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激 棕櫚酸鹽 糖調(diào)節(jié)蛋白78 突觸連接蛋白
【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：R587.2;R692
【目錄】：

• 主要英文縮略詞4-6
• 中文摘要6-9
• ABSTRACT9-12
• 前言12-15
• 第一部分：內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在中晚期糖尿病腎病患者腎組織足細(xì)胞損傷中的表達(dá)和意義15-28
• 研究對(duì)象15
• 實(shí)驗(yàn)儀器及耗材15-16
• 試驗(yàn)材料及試劑16-18
• 實(shí)驗(yàn)方法18-20
• 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法20-21
• 結(jié)果21-27
• 結(jié)論27-28
• 第二部分：內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在糖尿病前期動(dòng)物模型腎組織足細(xì)胞損傷中的表達(dá)和意義28-47
• 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組28
• 實(shí)驗(yàn)材料28-31
• 腎組織標(biāo)本留取31-32
• 腎臟標(biāo)本常規(guī)染色32-33
• 血、尿標(biāo)本檢測(cè)33
• 免疫組化33-34
• 免疫印記檢測(cè)（Western Blotting)34-36
• 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法36-37
• 結(jié)果37-46
• 結(jié)論46-47
• 討論47-52
• 參考文獻(xiàn)52-57
• 綜述57-71
• 參考文獻(xiàn)65-71
• 致謝71-72

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 周潔;向紅丁;;北京市2型糖尿病患者糖尿病腎病流行病學(xué)分析[J];醫(yī)學(xué)研究通訊;2004年06期

  本文關(guān)鍵詞：內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在糖尿病腎組織足細(xì)胞損傷中的表達(dá)和意義，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：405842