發(fā)布時間：2017-05-29 16:10

  本文關(guān)鍵詞：糖化血紅蛋白相關(guān)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的糖化血紅蛋白(HbA1c)是監(jiān)測糖尿病患者血糖長期控制情況的金標(biāo)準(zhǔn),也是糖尿病診斷和觀察治療效果的重要標(biāo)志物,已經(jīng)被美國糖尿病協(xié)會(ADA)首先推薦為診斷糖尿病的新標(biāo)準(zhǔn)。而HbA1c的臨床應(yīng)用是基于實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果的準(zhǔn)確一致。由于許多實(shí)驗(yàn)室間的HbA1c檢測結(jié)果不一致,所以HbA1c檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和一致性一直是國際上的研究熱點(diǎn)。許多因素可以影響HbA1c檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。本文旨在分析血紅蛋白變異體對糖化血紅蛋白檢測結(jié)果的干擾及臨床解決辦法,同時探討標(biāo)本保存條件對Tosoh G7糖化血紅蛋白分析儀測定結(jié)果穩(wěn)定性的影響和新診2型糖尿病患者糖化血紅蛋白水平與頸動脈內(nèi)中膜厚度相關(guān)性,為提高HbA1c檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和一致性及通過適時干預(yù)糖化血紅蛋白的水平預(yù)防糖尿病患者心血管疾病的發(fā)生提供理論依據(jù)。方法1.收集糖化血紅蛋白色譜圖異常和HbA1c值與空腹血糖水平不相符的標(biāo)本。患者焦某某,男,71歲,有2型糖尿病病史,門診患者。血常規(guī)檢查結(jié)果：RBC 4.25×1012/L, Hb132g/L, HCT39.8%, MCV93.6fl, MCH31pg, MCHC 332 g/L。生化檢查結(jié)果：ALT 14.4 U/L, AST 22.4 U/L, Cre 70 μmol/L, UA397μ mol/L, BUN 5.7 mmol/L, FBG 6.0 mmol/L, HbAlc 4.0%。HbA1c色譜圖有異常峰出現(xiàn)且HbAlc值低于正常范圍�；颊邚埬衬�,男,84歲,神經(jīng)內(nèi)科,住院患者。血常規(guī)檢查結(jié)果：RBC 4.05 ×1012/L, Hb130g/L, HCT38.1%,MCV94.1fl, MCH32.1pg, MCHC341g/L。生化檢查結(jié)果：ALT 14.4 U/L, AST 18.3 U/L, Cre 126 μmol/L, UA 502 μmol/L, BUN 10.4 mmol/L, FBG 6.48 mmol/L, HbA1c 4.4%。HbA1c色譜圖有異常峰出現(xiàn)。患者花某某,女,51歲,有2型糖尿病病史,門診患者。血常規(guī)檢查結(jié)果：RBC 5.11 X 1012/L, Hb 154 g/L, HCT 48.0%, MCV 93.9 fl, MCH 30.1 pg, MCHC 321 g/L。生化檢測結(jié)果：ALT 19.7 U/L, AST 24.3 U/L, Cre41 μmol/L, UA306 μmol/L, BUN 4.3 mmol/L, FBG 11.68 mmol/L, HbA1c 7.0%。出現(xiàn)HbA1c值與血糖水平不相符的情況�；颊咧苣衬�,女,36歲,有2型糖尿病病史,門診患者。血常規(guī)檢查結(jié)果：RBC 4.11 ×1012/L, Hb 134 g/L, HCT 37.8%, MCV 92.0 fl, MCH 32.6 pg, MCHC 354g/L。生化檢測結(jié)果：ALT 112.2 U/L, AST 11.6 U/L, Cre 51 μmol/L, UA 313 μmol/L, BUN 5.3 mmol/L, FBG 7.35 mmol/L, HbAlc 5.2%。HbA1c色譜圖有異常峰在HbA0峰之后。2.血液生化指標(biāo)檢測：紅細(xì)胞參數(shù)分析采用XE-5000全自動血細(xì)胞分析儀進(jìn)行檢測,生化參數(shù)分析采用Beckman AU5421全自動生化分析儀,HbA1c采用G7糖化血紅蛋白分析儀,血紅蛋白電泳采用法國Sebia全自動電泳儀。3.提取研究對象外周血全血細(xì)胞的DNA：取靜脈全血400μL,根據(jù)Gentra Puregene Blood Kit血液DNA提取試劑盒提供的操作規(guī)程,提取外周全血細(xì)胞基因組DNA,置于-20℃環(huán)境中保存?zhèn)溆谩?.PCR反應(yīng)及基因分析：參考文獻(xiàn)中的引物和條件,以提取的DNA為模板進(jìn)行DNA擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物送往上海美吉生物技術(shù)有限公司進(jìn)行雙向測序(ASUApplier Biosysterms 2720)。測序結(jié)果與Genbank上已知序列進(jìn)行比對分析。5.血紅蛋白瓊脂糖凝膠電泳：取EDTA-K2抗凝全血500μl,5000rpm離心5 min,除去血漿,用10倍生理鹽水清洗紅細(xì)胞2次(5000 rpm×5min),取10μl紅細(xì)胞溶于130μl細(xì)胞裂解液,溶解后按照廠商給出的步驟行血紅蛋白瓊脂糖凝膠電泳,電泳圖用氨基黑染液進(jìn)行染色,觀察有無異常血紅蛋白區(qū)帶。6.病例對照研究。選取南京市鼓樓醫(yī)院2013年1月至2014年2月確診的159例新診2型糖尿病患者,按HbA1c數(shù)值分為A組(HbAlc≤7.0%, n=44), B組(7.0% HbA1c≤9.0%, n=58)和C組(HbA1c9.0%, n=57)。檢測新診2型糖尿病患者糖化血紅蛋白、血脂水平,并對患者進(jìn)行頸動脈超聲檢查。采用Pearson直線相關(guān)對HbA1c與各指標(biāo)的相關(guān)性進(jìn)行分析；采用單因素方差檢驗(yàn)分析三組間的臨床資料。同時采用logistic回歸分析進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。7.收集5例HbA1c水平不同的全血樣本,用Tosoh G7糖化分析儀于當(dāng)天3小時內(nèi)測定其結(jié)果,每例樣本充分混勻后分裝成4小管,分組保存在室溫(20～22℃)、冷藏(4-6℃)、低溫冷凍(≤-20℃)和超低溫冷凍(≤-74℃)條件下,并于保存的第2、5、6、7、14、20和21天及第2和6個月測定。每個樣本的結(jié)果在超低溫冷凍組均數(shù)±3SD或者±0.2%HbA1c范圍內(nèi)視為可接受。當(dāng)每組5個樣本的結(jié)果都在可接受范圍內(nèi),說明樣本在特定時間、特定溫度下穩(wěn)定。結(jié)果1.患者焦某某和張某某為Hb J-Bangkok,血紅蛋白基因型為βN、βJBangko,患者華某某和周某某為Hb D-Los Angeles,血紅蛋白基因型為βN/βD-Los Angeles。2. Hb J-Bangkok和Hb D-Los Angeles應(yīng)用Tosoh G7糖化血紅蛋白分析儀標(biāo)準(zhǔn)模式檢測,導(dǎo)致HbA1c檢測結(jié)果偏低。3.單因素方差分析顯示,C組右CIMT、左CIMT、平均CIMT和最大CIMT水平高于B組和A組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。Logistic逐步回歸分析顯示年齡和HbA1c是最大CIMT的危險因素[年齡,風(fēng)險比(OR)=1.103,95%置信區(qū)間(CI)=1.038-1.173, P0.05; HbA1c, OR=2.531,95%CI=1.558-4.111, P0.05]。4.標(biāo)本用Tosoh G7糖化血紅蛋白分析儀測定的穩(wěn)定性分別為：室溫和-18--20℃可穩(wěn)定5d,4-6℃可穩(wěn)定20d；-74--76℃至少可穩(wěn)定180d。結(jié)論1.2種變異體Tosoh G7糖化血紅蛋白分析儀HbA1c檢測結(jié)果受干擾,而免疫比濁法HbA1c檢測結(jié)果不受干擾。2.新診2型糖尿病患者中,HbA1c水平與CIMT顯著相關(guān),HbA1c是最大CIMT增厚的獨(dú)立危險因素,HbA1c水平升高與最大CIMT增厚顯著相關(guān)。3.不同溫度、不同貯存時間對Tosoh G7糖化血紅蛋白分析儀測定HbA1c結(jié)果穩(wěn)定性有影響。
【關(guān)鍵詞】：糖化血紅蛋白 Hb J-Bangkok Hb D-Los Angeles Tosoh G7糖化血紅蛋白分析儀 新診2型糖尿病患者 頸動脈內(nèi)中膜厚度 時間 溫度
【學(xué)位授予單位】：南京大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R587.1;R446.1
【目錄】：

• 主要英文縮略詞索引4-7
• 摘要7-10
• ABSTRACT10-17
• 第一章 緒論17-23
• 1.1 研究背景17-18
• 1.2 國內(nèi)外研究現(xiàn)狀18-20
• 1.2.1 糖化血紅蛋白結(jié)構(gòu)及功能18
• 1.2.2 血紅蛋白變異的概述18-19
• 1.2.3 糖化血紅蛋白和頸動脈內(nèi)中膜厚度的相關(guān)性19
• 1.2.4 標(biāo)本貯存條件對檢測HbA1c結(jié)果的影響19-20
• 1.3 研究的目的、方法、實(shí)驗(yàn)設(shè)計和意義20-23
• 1.3.1 研究目的20
• 1.3.2 研究方法20-21
• 1.3.3 實(shí)驗(yàn)方案21
• 1.3.4 研究意義21-23
• 第二章 Hb變異體對HbA1c檢測結(jié)果的干擾及臨床處理23-38
• 2.1 引言23
• 2.2 材料和方法23-31
• 2.2.1 材料23-26
• 2.2.2 方法26-31
• 2.3 結(jié)果31-36
• 2.3.1 HbA1c檢測結(jié)果31-34
• 2.3.2 外周血全血細(xì)胞Hb電泳結(jié)果34
• 2.3.3 PCR反應(yīng)擴(kuò)增目的片段34-35
• 2.3.4 PCR產(chǎn)物測序圖譜35-36
• 2.4 討論36-38
• 第三章 新診2型糖尿病患者HbA1c水平與CIMT相關(guān)性研究38-44
• 3.1 引言38
• 3.2 材料和方法38-40
• 3.2.1 材料38-39
• 3.2.2 方法39-40
• 3.3 結(jié)果40-42
• 3.3.1 HbA_(1c)與各指標(biāo)的Pearson相關(guān)分析40
• 3.3.2 三組間臨床資料比較40-41
• 3.3.3 危險因素分析41-42
• 3.4 討論42-44
• 第四章 標(biāo)本貯存條件對Tosoh G7測定HbA1c結(jié)果穩(wěn)定性的影響研究44-49
• 4.1 引言44
• 4.2 材料和方法44-45
• 4.2.1 材料44
• 4.2.2 方法44-45
• 4.3 結(jié)果45-47
• 4.3.1 -74～-76℃貯存條件下HbA1c變化趨勢45-46
• 4.3.2 其他貯存條件下HbA1c的穩(wěn)定性46-47
• 4.4 討論47-49
• 第五章 結(jié)論和創(chuàng)新49-50
• 5.1 結(jié)論49
• 5.2 創(chuàng)新49-50
• 參考文獻(xiàn)50-56
• 致謝56-57
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的文章與參加的學(xué)術(shù)會議57-58
• 一、攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的文章57
• 二、攻讀碩士學(xué)位期間參加的學(xué)術(shù)會議57-58

【共引文獻(xiàn)】

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 王鵬鴿;基于苯硼酸的單糖和多巴胺電化學(xué)傳感器研究[D];西北大學(xué);2015年

  本文關(guān)鍵詞：糖化血紅蛋白相關(guān)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：405240