研究背景:骨質(zhì)疏松是臨床上最常見的骨代謝疾病之一,主要表現(xiàn)為疼痛、易骨折,嚴重者可致呼吸功能下降,顯著影響病患的生活質(zhì)量,因而骨質(zhì)疏松的治療越來越受到人們的關注。甲狀旁腺的主細胞能夠分泌PTH,從而來調(diào)控骨組織代謝以及來維持機體的鈣平衡。然而,PTH能夠雙向地調(diào)節(jié)骨組織的代謝。具體言之,間斷PTH刺激下,小劑量時能夠促進骨組織的形成;持續(xù)PTH刺激下,大劑量則可以促進骨組織的吸收。但其具體的作用機制尚未探明,因而未能應用于臨床上骨質(zhì)疏松患者的治療,因此進一步闡明PTH促進骨形成的機制將為其應用于臨床提供更多的理論依據(jù)。ClC-3電壓門控氯通道存在于成骨譜系細胞中,在對成骨細胞的作用上與PTH有許多共同點。前期研究發(fā)現(xiàn),PTH刺激能顯著上調(diào)成骨細胞中ClC-3的表達。并且PTH能通過ClC-3調(diào)節(jié)下游成、破骨相關基因的表達,但其分子機制并不十分明確。有研究認為,pth與tgf-β1在膜受體水平上可相互影響,共同調(diào)節(jié)骨吸收和骨形成,但其作用機制非常復雜還不清楚。在前期研究中我們發(fā)現(xiàn)clc-3也參與了成骨細胞中tgf-β1信號的調(diào)控,tgf-β可以調(diào)節(jié)成骨細胞的增殖與分化,其中tgf-β1通過...

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圖1MC3T3-E1細胞中Tgfb1基因轉(zhuǎn)染結(jié)果*P<0.05

-27-A：亮視野下MC3T3-E1細胞；B：熒光顯微鏡下細胞內(nèi)見FAM綠色熒光；C：實定量RT-PCR結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染TGF-β1-87714后，TGF-β1基因表達量最低，與陰性照組比較。*P<0.05圖1MC3T3-E1細胞中Tgfb1基因轉(zhuǎn)染結(jié)果....

圖3PTH刺激下不同Clcn3基因表達水平對Tgfb1基因和TGF-β1蛋白表達情況的

-28-圖3PTH刺激下不同Clcn3基因表達水平對Tgfb1基因和TGF-β1蛋白表達情況的影響*P<0.053.3各組MC3T3-E1細胞中CLC-3氯通道蛋白的表達水平由免疫熒光結(jié)果可以看出，在PTH濃度為10-9M、間斷刺激條件下，未轉(zhuǎn)染....

圖5PTH刺激下不同Clcn3基因和Tgfb1基因表達水平對Runx2mRNA、AlpmRNA、BspmRNA、OcmRNA表達的影響

5PTH刺激下不同Clcn3基因和Tgfb1基因表達水平對Runx2mRNA、AlpNA、BspmRNA、OcmRNA表達的影響。*P<0.05干擾TGF-β1和ClC-3基因表達對成骨相關基因的表達的影響實時定量RT-PCR結(jié)果顯示，PTH....

圖6PTH刺激下不同Clcn3基因和Tgfb1基因表達水平對RanklmRNA、OpgmRNA表達的影響

圖6PTH刺激下不同Clcn3基因和Tgfb1基因表達水平對RanklmRNA、OpmRNA表達的影響。*P<0.053.3干擾TGF-β1和ClC-3基因表達對其下游Smad2/3因子表達的影響實時定量RT-PCR結(jié)果顯示，PTH間斷刺激....

本文編號：4026669