目的:研究多聚左旋精氨酸(Poly-L-arginine,PLA)誘導氣道上皮細胞NCI-H292細胞凋亡的通路機制以及對細胞內Bcl-2/Bax、Caspase-3表達的影響,從而揭示PLA參與哮喘氣道上皮損傷的部分機制。方法:1、細胞培養(yǎng)常規(guī)培養(yǎng)基(RPMI1640+10%胎牛血清)培養(yǎng)NCI-H292細胞,于37℃、5%二氧化碳環(huán)境的培養(yǎng)箱內孵育。每2³天換液一次,細胞分裂鋪展至培養(yǎng)瓶70%⁸0%時用0.25%胰酶消化傳代,用于后續(xù)實驗。2、透射電鏡制片觀察NCI-H292細胞凋亡NCI-H292細胞分為對照組、PLA(60 mg/L)組兩組,PLA作用24 h后,收集細胞,固定后脫水,包埋干燥,切片浸染后用透射電鏡攝片觀察兩組細胞的超微結構。3、Annexin V-FITC/PI雙染色法檢測細胞凋亡率按加入PLA濃度不同將細胞分為空白對照組、10 mg/L PLA組、20 mg/L組PLA、40 mg/L PLA組、60 mg/L PLA組,按是否加入ERK1/2信號通路抑制劑PD98059分為空白對照組、PD組、PLA組、PLA+P...

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【學位級別】：碩士

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中文摘要
Abstract
1 前言
2 實驗材料
    2.1 實驗細胞
    2.2 實驗試劑
    2.3 實驗器材
    2.4 實驗試劑配制
3 實驗方法
    3.1 細胞培養(yǎng)
    3.2 細胞分組
    3.3 透射電鏡制片觀察NCI-H292細胞凋亡
    3.4 Annexin V-FITC/PI法檢測細胞凋亡率
    3.5 Western Blot 法檢測凋亡相關蛋白 Bax、Bcl-2、Caspase-3 及信號通路 ERK1/2的表達
    3.6 統(tǒng)計學處理
4 實驗結果
5 討論
6 結論
7 參考文獻
附錄
致謝
綜述
    參考文獻



本文編號：3976662