目的:體外研究外源性硫化氫(GYY4137)對絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥患者骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMMSC)增殖和成骨分化的生物學(xué)影響及探討其可能機(jī)制。方法:取絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松性骨折行全髖置換治療的患者20名,術(shù)中自股骨近端做骨髓取樣用于細(xì)胞培養(yǎng)。采用全骨髓貼壁法行原代細(xì)胞培養(yǎng)獲得h-BMMSC,利用流式細(xì)胞技術(shù)鑒定。以有限稀釋法純化獲得純度較高的原代h-BMMSC。MTT法檢測外源性H₂S供體GYY4137對h-BMMSC增殖能力的影響并篩選GYY4137的最佳干預(yù)量-效濃度。進(jìn)一步實驗,取培養(yǎng)至第3代的h-BMMSC,將其分為對照組(h-BMMSC)和實驗組(GYY4137+h-BMMSC)。將細(xì)胞分別培養(yǎng)至1^th/7^th/14^th/21^th,使用裂解法收集兩組h-BMMSC的RNA,并實施RT-PCR檢測,將兩組細(xì)胞成骨相關(guān)性基因的mRNA表達(dá)變化進(jìn)行比較。于培養(yǎng)至第7^th/14^th/21^th時,采用茜素紅(ARS)染色...

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖2-1(a)h-BMMSC體外培養(yǎng)6天2-1h-BMMSC

河北工程大學(xué)碩士學(xué)位論文82.5實驗結(jié)果2.5.1h-BMMSC分離、培養(yǎng)及純化結(jié)果從PMOP患者骨髓中成功分離出h-BMMSC，用倒置顯微鏡觀察h-BMMSC的形態(tài)。在接種后24小時內(nèi)，可見少許的h-BMMSC貼附于瓶壁上，形態(tài)學(xué)上觀察可見貼壁的h-BMMSC呈現(xiàn)出密集生長的細(xì)....

圖2-1(b)h-BMMSC體外培養(yǎng)14天SC

河北工程大學(xué)碩士學(xué)位論文82.5實驗結(jié)果2.5.1h-BMMSC分離、培養(yǎng)及純化結(jié)果從PMOP患者骨髓中成功分離出h-BMMSC，用倒置顯微鏡觀察h-BMMSC的形態(tài)。在接種后24小時內(nèi)，可見少許的h-BMMSC貼附于瓶壁上，形態(tài)學(xué)上觀察可見貼壁的h-BMMSC呈現(xiàn)出密集生長的細(xì)....

圖2-2體外培養(yǎng)的h-BMMSC流式細(xì)胞儀鑒定Fig.2-2H-BMMSCflowcytometryidentificationinvitro

第2章人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)、純化及鑒定9細(xì)胞對CD90、CD73抗體表現(xiàn)出了雙重陽性，使用對照抗體可見，細(xì)胞對CD34和CD45抗體的表達(dá)甚微，這一鑒定結(jié)果符合定義h-BMMSC的最低標(biāo)準(zhǔn)。與相應(yīng)文獻(xiàn)報道的h-BMMSC表面抗原一致（圖2-2）。圖2-2體外培養(yǎng)的h-B....

圖3-1GYY4137對h-BMMSC的劑量-效應(yīng)結(jié)果對比（相同濃度）

第3章外源性硫化氫對人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖能力影響13圖3-1GYY4137對h-BMMSC的劑量-效應(yīng)結(jié)果對比（相同濃度）Fig.3-1DoseeffectcomparisonofGYY4137onh-BMMSC(Sameconcentration)注：GYY4137刺激h-B....

本文編號：3944516