目的:體外研究外源性硫化氫(GYY4137)對絕經后骨質疏松癥患者骨髓間充質干細胞(BMMSC)增殖和成骨分化的生物學影響及探討其可能機制。方法:取絕經后骨質疏松性骨折行全髖置換治療的患者20名,術中自股骨近端做骨髓取樣用于細胞培養(yǎng)。采用全骨髓貼壁法行原代細胞培養(yǎng)獲得h-BMMSC,利用流式細胞技術鑒定。以有限稀釋法純化獲得純度較高的原代h-BMMSC。MTT法檢測外源性H₂S供體GYY4137對h-BMMSC增殖能力的影響并篩選GYY4137的最佳干預量-效濃度。進一步實驗,取培養(yǎng)至第3代的h-BMMSC,將其分為對照組(h-BMMSC)和實驗組(GYY4137+h-BMMSC)。將細胞分別培養(yǎng)至1^th/7^th/14^th/21^th,使用裂解法收集兩組h-BMMSC的RNA,并實施RT-PCR檢測,將兩組細胞成骨相關性基因的mRNA表達變化進行比較。于培養(yǎng)至第7^th/14^th/21^th時,采用茜素紅(ARS)染色...

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖2-1(a)h-BMMSC體外培養(yǎng)6天2-1h-BMMSC

河北工程大學碩士學位論文82.5實驗結果2.5.1h-BMMSC分離、培養(yǎng)及純化結果從PMOP患者骨髓中成功分離出h-BMMSC，用倒置顯微鏡觀察h-BMMSC的形態(tài)。在接種后24小時內，可見少許的h-BMMSC貼附于瓶壁上，形態(tài)學上觀察可見貼壁的h-BMMSC呈現出密集生長的細....

圖2-1(b)h-BMMSC體外培養(yǎng)14天SC

河北工程大學碩士學位論文82.5實驗結果2.5.1h-BMMSC分離、培養(yǎng)及純化結果從PMOP患者骨髓中成功分離出h-BMMSC，用倒置顯微鏡觀察h-BMMSC的形態(tài)。在接種后24小時內，可見少許的h-BMMSC貼附于瓶壁上，形態(tài)學上觀察可見貼壁的h-BMMSC呈現出密集生長的細....

圖2-2體外培養(yǎng)的h-BMMSC流式細胞儀鑒定Fig.2-2H-BMMSCflowcytometryidentificationinvitro

第2章人骨髓間充質干細胞的分離、培養(yǎng)、純化及鑒定9細胞對CD90、CD73抗體表現出了雙重陽性，使用對照抗體可見，細胞對CD34和CD45抗體的表達甚微，這一鑒定結果符合定義h-BMMSC的最低標準。與相應文獻報道的h-BMMSC表面抗原一致（圖2-2）。圖2-2體外培養(yǎng)的h-B....

圖3-1GYY4137對h-BMMSC的劑量-效應結果對比（相同濃度）

第3章外源性硫化氫對人骨髓間充質干細胞增殖能力影響13圖3-1GYY4137對h-BMMSC的劑量-效應結果對比（相同濃度）Fig.3-1DoseeffectcomparisonofGYY4137onh-BMMSC(Sameconcentration)注：GYY4137刺激h-B....

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