發(fā)布時(shí)間：2024-03-10 03:53

　　類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA,rheumatoid arthritis)是最常見且嚴(yán)重的自身免疫性疾病之一,可導(dǎo)致患者喪失生活自理能力乃至殘疾。迄今為止,類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的病因和發(fā)病機(jī)制仍未明確、闡明,且針對類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎病因的研究在可期的時(shí)間內(nèi)難以取得突破,致力于開發(fā)對因治療藥物或治療方式的研究更是難以實(shí)施。因此,阻止病程發(fā)展是治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的首要任務(wù)和最佳選擇�；ぱ装Y起始于疾病初期,貫穿整個(gè)病程,是驅(qū)使類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎病程發(fā)展,導(dǎo)致患病關(guān)節(jié)功能喪失,致使患者殘疾的主導(dǎo)因素之一,也是類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的主要且關(guān)鍵的病征。在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的臨床治療中,控制炎癥是首選且必要的策略,是阻止病程發(fā)展的關(guān)鍵。但是,滑膜炎癥的發(fā)病機(jī)理及其分子機(jī)制仍未完全闡明,針對炎癥反應(yīng)過程開發(fā)的藥物和治療方式只能緩解滑膜炎癥,并不能控制或阻止滑膜炎癥的發(fā)生發(fā)展。這導(dǎo)致接受治療的類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者的病情仍在發(fā)展,且隨著病程的延長,患病關(guān)節(jié)會喪失功能,患者最終喪失生活自理能力乃至殘疾。所以,闡明滑膜炎癥的發(fā)病機(jī)制是控制滑膜炎癥發(fā)生發(fā)展以阻止類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎病程發(fā)展的關(guān)鍵所在。酸敏感離子通道1a(acid sensing ion channel...

【文章頁數(shù)】：155 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
英文縮略詞
中文摘要
英文摘要
1. 前言
2. 實(shí)驗(yàn)材料
    2.1. 組織收集與保存
    2.2. 藥品與試劑
    2.3. 耗材、儀器與設(shè)備
    2.4. 主要溶液的配制
3. 實(shí)驗(yàn)方法
    3.1. 人原代滑膜成纖維細(xì)胞的提取分離
    3.2. 人原代滑膜成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)與傳代
    3.3. 細(xì)胞凍存
    3.4. 細(xì)胞復(fù)蘇
    3.5. 臺盼藍(lán)染色
    3.6. 細(xì)胞計(jì)數(shù)
    3.7.Western blotting 法檢測細(xì)胞中目的蛋白的表達(dá)情況
    3.8. 流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度
    3.9.激光共聚焦顯微鏡檢測細(xì)胞外 Ca²⁺內(nèi)流或細(xì)胞內(nèi) Ca²⁺濃度
    3.10. 蘇木精-伊紅染色
    3.11. 免疫組化法
    3.12. 雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)
    3.13.染色質(zhì)免疫共沉淀-實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 實(shí)驗(yàn)(ChIP-qPCR)
    3.14.流式細(xì)胞術(shù)鑒定人原代滑膜成纖維細(xì)胞及檢測目的蛋白表達(dá)
    3.15.免疫熒光法檢測細(xì)胞內(nèi)目的蛋白的表達(dá)和定位
    3.16.Luminex 液相芯片技術(shù)測定炎癥因子 RANTES、sTNF RI、IL-8、sTNF RII、ICAM-1 表達(dá)量
    3.17.固相抗體芯片檢測 40 個(gè)炎癥因子表達(dá)量
    3.18.酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定 MIP-1a 的表達(dá)量
    3.19. 體內(nèi)實(shí)驗(yàn)
    3.20. 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
4. 結(jié)果
    4.1. ASIC1a在RA滑膜組織中高表達(dá)
    4.2. ASIC1a在RA滑膜成纖維細(xì)胞中高表達(dá)
    4.3. ASIC1a在RASF中具有介導(dǎo)細(xì)胞外Ca²⁺內(nèi)流的離子通道活性
    4.4. ASIC1a通過介導(dǎo)細(xì)胞外Ca²⁺內(nèi)流上調(diào)炎癥因子的表達(dá)
    4.5. ASIC1a通過介導(dǎo)體內(nèi)炎癥因子的表達(dá)促進(jìn)關(guān)節(jié)炎癥
    4.6. ASIC1a通過介導(dǎo)細(xì)胞外Ca²⁺內(nèi)流增強(qiáng)NFATc3核易位水平
    4.7. ASIC1a通過激活NFATc3調(diào)控RANTES基因轉(zhuǎn)錄
5. 討論
6. 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄 個(gè)人簡介
致謝
綜述
    參考文獻(xiàn)



本文編號：3924203