目的探討臍帶間充質(zhì)干細胞(UCMSCs)對原發(fā)性卵巢功能不全(POI)大鼠的治療作用及卵巢中卵泡膜間質(zhì)細胞表達的NR4A1在此治療過程中的機制。方法選用5周齡雌性wistar大鼠,隨機分為對照組、POI組、POI+UCMSCs組,POI組腹腔注射順鉑(CP),對照組腹腔注射等量的0. 9%生理鹽水,注射7 d。POI+UCMSCs組待注射順鉑后,觀察1周,尾靜脈注射UCMSCs懸液。注射1周后,酶聯(lián)免疫吸附法檢測3組大鼠血清中E2、FSH水平,HE染色觀察卵巢的形態(tài)學(xué)改變,TUNEL檢測大鼠卵巢中顆粒細胞的凋亡情況。體外培養(yǎng)大鼠卵泡膜間質(zhì)細胞(TICs),并進行鑒定及檢測NR4A1的表達,隨機分組給予順鉑及UCMSCs處理,western blot檢測NR4A1的表達變化,Annexin V-FITC細胞凋亡檢測試劑盒檢測細胞的凋亡情況。結(jié)果與對照組相比,POI組大鼠卵巢中各級卵泡的數(shù)目明顯減少(P <0. 05),而"類黃體樣"結(jié)構(gòu)明顯增多(P <0. 05),UCMSCs處理后卵巢中卵泡的數(shù)目明顯增加(P <0. 05)。與對照組相比,POI組血清中E2水平明顯下...

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圖4CP及UCMSCs處理后TICs的凋亡情況

如圖4和表5所示，CP處理后能夠增加TICs的凋亡情況，而CP+UCMSCs組凋亡比例明顯下降(P<0.01)。3討論

圖3TICs的形態(tài)學(xué)特點、特異性分子Cyp17a1、FSHR的表達(400×)及CP及UCMSCs對TICs的NR4A1表達水平的影響

如圖3所示，對體外離體培養(yǎng)的TICs的形態(tài)及特異性標(biāo)記分子Cyp17a1表達的觀察發(fā)現(xiàn)，P1代TICs呈長梭形，免疫熒光和westernblot結(jié)果顯示TICs細胞質(zhì)中Cyp17a1表達陽性，而FSHR表達陰性。另外，在TICs的細胞核中有NR4A1的表達。其中FSHR、NR4....

圖2三組大鼠卵巢中凋亡的顆粒細胞數(shù)目分析

在卵泡閉鎖過程中，顆粒細胞比卵泡膜細胞更容易凋亡。如圖2和表3所示，三組大鼠卵巢中均有顆粒細胞凋亡的發(fā)生。并且與對照組相比，POI組大鼠卵巢中凋亡細胞的數(shù)目明顯增多(P<0.01)。POI+UCMSCs組顆粒細胞凋亡的數(shù)目明顯減少(P<0.01)，這提示UCMSCs能夠明顯減少顆....

圖1三組大鼠血清中E2、FSH水平及卵巢形態(tài)學(xué)的改變

卵巢的形態(tài)學(xué)改變及血清中E2、FSH水平反映了卵巢的功能。如圖1和表1、2所示，與對照組相比，POI組大鼠卵巢中各級卵泡的數(shù)目明顯減少，而“類黃體樣”結(jié)構(gòu)明顯增多，UCMSCs處理后卵巢中卵泡的數(shù)目明顯增加(P<0.05)。與對照組相比，POI組血清中E2水平明顯下降(P<0.0....

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