背景與目的脂聯(lián)素是防治肥胖及相關(guān)疾病極具價(jià)值的分子靶點(diǎn)。PUFA對(duì)脂聯(lián)素的調(diào)節(jié)一直備受關(guān)注,現(xiàn)有研究提示n-3、n-6PUFA對(duì)脂聯(lián)素的影響很可能不同,但無直接證據(jù)。因此,本研究擬在正常及炎癥狀態(tài)下比較n-3、n-6PUFA調(diào)節(jié)脂聯(lián)素的效應(yīng)差異,并首次從PPARγ、CDK5/p-PPARγ兩條信號(hào)通路探討二者調(diào)節(jié)脂聯(lián)素的分子機(jī)理,試圖揭示n-3、n-6PUFA作用差異的產(chǎn)生原因。其結(jié)果將為合理攝入PUFA提供新的科學(xué)依據(jù),為預(yù)防和治療肥胖等疾病提供新思路。方法3T3-L1前體脂肪細(xì)胞100%融合后加入地塞米松、胰島素、IBMX,誘導(dǎo)分化至≥80%細(xì)胞變?yōu)槌墒熘炯?xì)胞。正常狀態(tài):10Oμmol/L n-3(EPA、DHA、α-ALA)、n-6PUFA(LA、AA)作用于脂肪細(xì)胞24h;n-3、n-6PUFA加或不加GW9662作用于脂肪細(xì)胞24h;EPA、α-ALA、LA作用于脂肪細(xì)胞24h后加或不加roscovitine繼續(xù)培養(yǎng)2h;DHA、AA作用干脂肪細(xì)胞24h后加或不加TNF-α繼續(xù)培養(yǎng)2h。炎癥狀態(tài):100、200、300μmol/LPA作用于脂肪細(xì)胞24h;PA加或不加羅格列...

【文章頁數(shù)】：122 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 前言
    1 研究背景
    2 研究目的與意義
    3 創(chuàng)新之處
第二章 材料與方法
    1 3T3-L1脂肪細(xì)胞的培養(yǎng)
    2 油紅O染色鑒定成熟脂肪細(xì)胞
    3 細(xì)胞受試
    4 MTT法測定細(xì)胞活性
    5 TBA法測定細(xì)胞培養(yǎng)液中MDA含量
    6 Real-time RT-PCR測定mRNA含量
    7 Western blot測定蛋白含量
    8 ELISA測定細(xì)胞培養(yǎng)液中脂聯(lián)素含量
    9 免疫共沉淀(Co-IP)測定p-PPARγ (Ser273)含量、CDK5與PPARγ的相互作用
    10 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析
    11 技術(shù)路線圖
第三章 結(jié)果
    第一節(jié) 正常狀態(tài)下n-3和n-6 PUFA調(diào)節(jié)脂聯(lián)素表達(dá)的作用差異及CDK5/PPARγ介導(dǎo)的機(jī)制研究
        1 3T3-L1脂肪細(xì)胞的誘導(dǎo)分化
        2 n-3和n-6 PUFA調(diào)節(jié)脂聯(lián)素表達(dá)的作用差異
        3 n-3和n-6 PUFA調(diào)節(jié)脂聯(lián)素表達(dá)的PPARγ分子機(jī)制研究
        4 n-3和n-6 PUFA調(diào)節(jié)脂聯(lián)素表達(dá)的CDK5/p-PPARγ分子機(jī)制研究
        小結(jié)
    第二節(jié) 炎癥狀態(tài)下n-3和n-6 PUFA調(diào)節(jié)脂聯(lián)素表達(dá)的作用差異及CDK5/PPARγ介導(dǎo)的機(jī)制研究
        1 PA構(gòu)建3T3-L1脂肪細(xì)胞炎癥模型
        2 PA調(diào)節(jié)脂聯(lián)素表達(dá)的CDK5/PPARγ分子機(jī)制研究
        3 炎癥狀態(tài)下n-3和n-6 PUFA調(diào)節(jié)脂聯(lián)素表達(dá)的作用差異
        4 炎癥狀態(tài)下n-3和n-6 PUFA調(diào)節(jié)CDK5/PPARγ的分子機(jī)制研究
        小結(jié)
第四章 討論
    第一節(jié) 正常狀態(tài)下n-3和n-6 PUFA調(diào)節(jié)脂聯(lián)素表達(dá)的作用差異及其分子機(jī)制研究
        1 n-3和n-6 PUFA調(diào)節(jié)脂聯(lián)素表達(dá)的作用差異
        2 n-3和n-6 PUFA調(diào)節(jié)脂聯(lián)素表達(dá)的PPARy分子機(jī)制
        3 n-3和n-6 PUFA調(diào)節(jié)脂聯(lián)素表達(dá)的CDK5/p-PPARγ分子機(jī)制
        4 n-3和n-6 PUFA調(diào)節(jié)脂聯(lián)素表達(dá)的效應(yīng)差異主要與二者對(duì)PPARγ含量的不同影響有關(guān)
    第二節(jié) 炎癥狀態(tài)下n-3和n-6 PUFA調(diào)節(jié)脂聯(lián)素表達(dá)的作用差異及其分子機(jī)制研究
        1 炎癥狀態(tài)下PA抑制脂聯(lián)素表達(dá)的CDK5/PPARγ分子機(jī)制研究
        2 炎癥狀態(tài)下n-3和n-6 PUFA調(diào)節(jié)脂聯(lián)素表達(dá)的效應(yīng)差異
        3 炎癥狀態(tài)下n-3和n-6 PUFA調(diào)節(jié)脂聯(lián)素表達(dá)的CDK5/PPARγ分子機(jī)制研究
    第三節(jié) 正常及炎癥狀態(tài)下n-3和n-6 PUFA調(diào)節(jié)脂聯(lián)素、CDK5/PPARγ的作用比較
        1 正常及炎癥狀態(tài)下同一脂肪酸調(diào)節(jié)脂聯(lián)素、CDK5/PPARγ的作用差異
        2 不同狀態(tài)下n-3和n-6 PUFA調(diào)節(jié)脂聯(lián)素、CDK5/PPARγ的現(xiàn)實(shí)意義
        3 研究局限性
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀博士學(xué)位期間成果
致謝



本文編號(hào)：3899250