目的探討外源性硫化氫（H2S）能否通過調(diào)控瘦素/瘦素受體（LEPR）通路抑制高糖引起的人臍靜脈內(nèi)皮細胞（HUVECs）損傷。方法 CCK-8法檢測細胞存活率;Hoechst 33258核染色熒光顯微鏡照相檢測凋亡細胞的形態(tài)學(xué)和數(shù)量改變;雙氯熒光素（DCFH-DA）染色熒光顯微鏡照相法檢測細胞內(nèi)活性氧（ROS）水平;羅丹明123（Rh123）染色熒光顯微鏡照相法檢測線粒體膜電位（MMP）水平;Western blotting法測定瘦素及瘦素受體蛋白的表達水平。結(jié)果應(yīng)用40 mmol/L葡萄糖處理HUVECs 3~24 h可以明顯上調(diào)瘦素、瘦素受體的表達水平,在高糖處理9 h時瘦素、瘦素受體的表達水平達到峰值;在高糖處理HUVECs前,400μmol/L硫氫化鈉（NaHS,為H2S的供體）預(yù)處理30 min能明顯抑制高糖對瘦素及瘦素受體表達的上調(diào)作用;400μmol/L NaHS預(yù)處理HUVECs 30 min、50 ng/m L瘦素拮抗劑（LA）預(yù)處理HUVECs 1 h均可明顯抑制高糖引起的HUVECs損傷,使細胞存活率升高,細胞凋亡數(shù)量減少,胞內(nèi)活性氧（ROS）堆積及MMP降低（P＜... 

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 細胞培養(yǎng)
    1.3 實驗分組
    1.4 CCK-8法檢測細胞存活率
    1.5 Western blot法檢測瘦素、瘦素受體(LEPR)蛋白的表達
    1.6 Hoechst 33258核染色法檢測細胞凋亡
    1.7 DCFH-DA染色測定ROS水平
    1.8 羅丹明123(Rh123)染色法檢測HUVECs線粒體膜電位(MMP)
    1.9 統(tǒng)計學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 外源性H2S和LA抑制高糖引起的HUVECs細胞毒性
    2.2 外源性H2S抑制高糖對HUVECs瘦素表達的上調(diào)作用
    2.3 外源性H2S抑制高糖對HUVECs瘦素受體表達的上調(diào)作用
    2.4 外源性H2S和LA抑制高糖引起的致HUVECs凋亡作用
    2.5 外源性H2S和LA抑制高糖引起的HUVECs氧化應(yīng)激反應(yīng)
    2.6外源性H2S和LA抑制高糖對HUVECs線粒體的損傷作用
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]硫化氫對氧化型低密度脂蛋白誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細胞凋亡的影響[J]. 任重,趙戰(zhàn)芝,彭湘萍,謝巍,劉艷文,索榮,姜志勝.  中國動脈硬化雜志. 2011(11)
[2]抑制胞漿型磷脂酶A2活性對內(nèi)毒素誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細胞分泌瘦素的影響[J]. 齊菲,顏光濤.  中國危重病急救醫(yī)學(xué). 2011 (02)



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