背景及目的輕鏈型淀粉樣變（light chain amyloidosis,AL）是一種由異常錯配的免疫球蛋白輕鏈沉積于組織或器官并造成器官損害的致死性漿細(xì)胞病。患者的預(yù)后主要取決于心臟受累的嚴(yán)重程度。目前認(rèn)為,異常輕鏈通過在心臟內(nèi)沉積,以及輕鏈對心肌細(xì)胞的直接細(xì)胞毒作用這兩種機(jī)制造成了心臟功能的嚴(yán)重?fù)p傷。然而,其造成心肌損傷的關(guān)鍵步驟以及具體機(jī)制尚不清楚。本文旨在對AL輕鏈進(jìn)入心肌細(xì)胞的方式、其亞細(xì)胞器定位、心肌細(xì)胞損傷的具體表現(xiàn)及其分子機(jī)制進(jìn)行研究。方法使用真核細(xì)胞表達(dá)并提取具有心肌嗜性的致淀粉樣變輕鏈（AL輕鏈）。選取H9C2細(xì)胞系,使用熒光共聚焦顯微鏡觀察AL輕鏈進(jìn)入細(xì)胞隨時間的變化,以及加入不同種類內(nèi)吞抑制劑后細(xì)胞中AL輕鏈含量的差異。使用熒光染料標(biāo)記細(xì)胞的溶酶體與線粒體,在共聚焦顯微鏡下觀察AL輕鏈進(jìn)入細(xì)胞后的亞細(xì)胞器定位及其對亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的影響;使用透射電鏡觀察細(xì)胞線粒體形態(tài)變化。通過TUNEL法與CCK-8法檢測AL輕鏈對H9C2細(xì)胞凋亡與活力的影響;使用DCFH-DA標(biāo)記的流式細(xì)胞技術(shù)檢測H9C2細(xì)胞內(nèi)的ROS水平;并通過Western blot、免疫熒光、透射電鏡檢測自... 

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 輕鏈進(jìn)入心肌細(xì)胞的途徑及其亞細(xì)胞定位研究
    材料與方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    討論
    結(jié)論
第二部分 輕鏈對心肌細(xì)胞的毒性機(jī)制研究
    材料與方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    討論
    結(jié)論
第三部分 輕鏈作用于心肌細(xì)胞的表達(dá)譜分析
    材料與方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    討論
    結(jié)論
參考文獻(xiàn)
縮略詞表
致謝



本文編號：3706153