目的初步探究強(qiáng)骨飲調(diào)節(jié)破骨細(xì)胞來(lái)源外泌體影響成骨細(xì)胞分化的內(nèi)在機(jī)制。方法制備強(qiáng)骨飲含藥血清,構(gòu)建破骨分化和成骨分化模型。設(shè)置對(duì)照血清組和含藥血清組,共同干預(yù)破骨細(xì)胞分化,找到最佳含藥血清濃度。采用免疫印跡法檢測(cè)兩組細(xì)胞外泌體釋放情況。將兩組外泌體加入成骨分化模型中,采用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)堿性磷酸酶（ALP）含量,采用實(shí)時(shí)熒光定量測(cè)量成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子（Runx2）、骨橋蛋白（OPN）、骨鈣素（OCN）表達(dá)情況。最后運(yùn)用免疫印跡法檢測(cè)強(qiáng)骨飲干預(yù)下破骨分化的β環(huán)狀蛋白表達(dá)以及外泌體作用成骨分化的β環(huán)狀蛋白表達(dá)。結(jié)果細(xì)胞染色顯示含藥血清可明顯抑制TRAP活性。在兩組破骨分化模型外泌體中均表達(dá)CD9、CD63、CD81蛋白。在兩組外泌體干預(yù)下,ALP、Runx2、OPN和OCN的表達(dá)較對(duì)照組均降低,但含藥血清組中成骨因子表達(dá)較對(duì)照血清組增加。兩組成骨分化模型在外泌體干預(yù)下β環(huán)狀蛋白檢測(cè)較對(duì)照組均減少,但含藥血清組β環(huán)狀蛋白較對(duì)照血清組增加。含藥血清組破骨細(xì)胞檢測(cè)β環(huán)狀蛋白較對(duì)照血清組增加。結(jié)論強(qiáng)骨飲可抑制破骨分化,改善破骨來(lái)源外泌體對(duì)成骨分化的抑制作用。破骨來(lái)源外泌體可能傳遞miRNA作用wnt/... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)骨質(zhì)疏松雜志. 2020,26(11)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【部分圖文】：

RAW264.7細(xì)胞的TRAP染色A:對(duì)照組，無(wú)任何處理;B:加入M-CSF和RANKL誘導(dǎo)破骨與不同濃度對(duì)照血清;C:加入M-CSF和RANKL誘導(dǎo)破骨與不同濃度含藥血清(**P<0.01)。

圖1 RAW264.7細(xì)胞的TRAP染色A:對(duì)照組，無(wú)任何處理;B:加入M-CSF和RANKL誘導(dǎo)破骨與不同濃度對(duì)照血清;C:加入M-CSF和RANKL誘導(dǎo)破骨與不同濃度含藥血清(**P<0.01)。2.3 外泌體對(duì)OB模型ALP活性的影響

OB模型均能促進(jìn)OCN、OPN、RUNX2基因轉(zhuǎn)錄，加入外泌體Exo-Con和Exo-Drug均抑制OCN、OPN、RUNX2基因轉(zhuǎn)錄，但Exo-Drug對(duì)OCN、OPN、RUNX2基因轉(zhuǎn)錄抑制作用弱于Exo-Con。表明外泌體抑制OB分化，破骨分化誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞外泌體抑制BM-MSC的成骨分化，加入含藥血清降低對(duì)OB分化的抑制作用(圖4)。2.5 強(qiáng)骨飲含藥血清對(duì)wnt/β-catenin通路的影響

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]強(qiáng)骨飲對(duì)去卵巢大鼠骨折愈合骨小梁Micro-CT改變研究[J]. 姚建亮,王博,吳鵬,劉康,史曉林.  中國(guó)骨質(zhì)疏松雜志. 2016(11)
[2]強(qiáng)骨飲對(duì)去卵巢骨質(zhì)疏松大鼠骨顯微結(jié)構(gòu)的影響[J]. 王博,吳鵬,史曉林.  中醫(yī)正骨. 2016(07)



本文編號(hào)：3433435