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銀杏葉提取物對大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成脂分化能力的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-04-29 10:06

  本文關(guān)鍵詞:銀杏葉提取物對大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成脂分化能力的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:一、研究背景 隨著我國經(jīng)濟(jì)、醫(yī)療的快速發(fā)展,人民的生活條件的穩(wěn)步提高,老年人在人口中的比例也大幅增加,我國正步入老齡化社會(huì),伴隨而來的老齡化疾病也越發(fā)凸顯,如骨質(zhì)疏松癥,這常發(fā)生于老年人的疾病,可引起骨組織低骨量和顯微結(jié)構(gòu)惡化。在青少年體內(nèi),骨代謝是平衡的,但老年人,這種平衡被打破,骨量不斷減少,骨強(qiáng)度逐漸降低,增加了骨折的風(fēng)險(xiǎn),這迫使學(xué)者們找尋骨質(zhì)疏松的病因并加以治療。 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMMSCs)在骨髓中發(fā)現(xiàn),數(shù)量稀少,其多向分化的能力使其引起學(xué)者們的關(guān)注,如果BMMSCs過多地向脂肪細(xì)胞分化,則相應(yīng)減少了向成骨細(xì)胞分化的細(xì)胞數(shù)目,這會(huì)引起成骨缺陷致使骨質(zhì)疏松癥的發(fā)生,而相反,則為骨質(zhì)疏松癥的治療提供了一個(gè)新的方向。 如何防治骨質(zhì)疏松癥并在治療的過程中減少治療產(chǎn)生的副作用一直是學(xué)者們研究的熱點(diǎn)問題。近年來,學(xué)者們再次關(guān)注一種選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑—銀杏葉提取物(ginkgo biloba extract,GBE),在其抗氧化、調(diào)節(jié)血管活性、清除自由基、抗血小板活化因子、神經(jīng)保護(hù)、增加血流量等主要藥理作用之外,發(fā)現(xiàn)其可促進(jìn)BMMSCs在體外成骨分化,但有關(guān)BMMSCs在GBE作用下成脂分化能力的變化尚未見報(bào)道。本研究旨在探討不同濃度GBE對BMMSCs成脂分化能力的影響,闡明在細(xì)胞水平上GBE對骨質(zhì)疏松的治療和預(yù)防意義。 二、研究目的: 探討不同濃度銀杏葉提取物(GBE)對大鼠的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMMSCs)成脂分化能力的影響,闡明在細(xì)胞水平上GBE對骨質(zhì)疏松治療及預(yù)防的意義。 三、研究內(nèi)容: 1、將50、100、150、200和400mg·L-1GBE與成脂誘導(dǎo)液加入到已純化的第三代BMMSCs中(50、100、150、200、400mg·L-1GBE組),與不加藥對照組共培養(yǎng)7d,觀察BMMSCs的形態(tài)學(xué)和表面抗原CD44、CD105和CD34的表達(dá)。 2、采用油紅O染色觀察BMMSCs中脂滴形成情況;采用吸光值(A)對BMMSCs的成脂能力進(jìn)行定量分析。 3、采用RT-PCR法檢測BMMSCs中脂肪組織脂肪酸結(jié)合蛋白(AP2)和過氧化物酶體增殖物激活受體(PPAR)的亞型(PPAR-γ)mRNA的表達(dá)水平。 四、研究結(jié)果: 1、形態(tài)學(xué)檢測,體外培養(yǎng)的原代BMMSCs3d后可見細(xì)胞呈梭形,7d后細(xì)胞呈漩渦狀生長,同向排列,表面抗原標(biāo)記物染色顯示CD44及CD105陽性表達(dá),而CD34表達(dá)呈陰性,證明其為BMMSCs。 2、油紅O染色約7天后顯微鏡下見大量脂滴形成,并隨著GBE濃度的增大脂滴數(shù)量減少;吸光值檢測結(jié)果顯示,與對照組相比,隨著GBE濃度的提高A510值逐漸減。≒0.05)。 3、RT-PCR結(jié)果顯示,與對照組相比,隨著GBE濃度的提高,PPAR-γ、AP2mRNA表達(dá)量逐漸降低(P0.05)。 五、研究結(jié)論: GBE在體外可抑制BMMSCs的成脂分化能力,,且抑制能力隨著GBE濃度的增高而逐漸增強(qiáng)。
【關(guān)鍵詞】:銀杏葉提取物 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 成脂分化 骨質(zhì)疏松
【學(xué)位授予單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R580
【目錄】:
  • 中文摘要4-7
  • Abstract7-11
  • 縮略詞表11-14
  • 第一章 引言14-16
  • 第二章 綜述16-23
  • 2.1 骨質(zhì)疏松的發(fā)病機(jī)制16-18
  • 2.2 骨質(zhì)疏松治療藥物18-20
  • 2.3 銀杏葉提取物的組成及其成骨作用20-23
  • 第三章 材料與方法23-28
  • 3.1 主要實(shí)驗(yàn)試劑23
  • 3.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器23-24
  • 3.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物24
  • 3.4 GBE 的配置24
  • 3.5 BMMSCs 的分離培養(yǎng)24-25
  • 3.6 BMMSCs 形態(tài)學(xué)觀察及表面抗原鑒定25
  • 3.7 油紅 O 染色鑒定 GBE 對 BMMSCs 成脂分化能力的影響25-26
  • 3.8 GBE 對 BMMSCs 成脂分化能力影響的檢測26
  • 3.9 RT-PCR 法檢測各組 BMMSCs 中 AP2、PPAR-γ mRNA 的表達(dá)水平26
  • 3.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析26-28
  • 第四章 結(jié)果28-32
  • 4.1 BMMSCs 的形態(tài)學(xué)28
  • 4.2 BMMSCs 表面抗原鑒定28-29
  • 4.3 各組 BMMSCs 成脂分化能力29-30
  • 4.4 各組 BMMSCs 的 A510值30-31
  • 4.5 各組 BMMSCs 中 AP2、PPAR-γ mRNA 表達(dá)水平31-32
  • 第五章 討論32-36
  • 第六章 結(jié)論36-37
  • 參考文獻(xiàn)37-44
  • 作者簡介及在學(xué)期間所取得的科研成果44-46
  • 發(fā)表論文及參與課題情況46-47
  • 致謝47

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 蘇欣;廖二元;;甲狀旁腺激素及其擬似劑治療骨質(zhì)疏松癥的研究進(jìn)展[J];國際內(nèi)科學(xué)雜志;2007年11期


  本文關(guān)鍵詞:銀杏葉提取物對大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成脂分化能力的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號(hào):334649

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