痛風(fēng)所致尿酸基于P2X7R非依賴途徑激活巨噬細(xì)胞中的NLRP3炎癥小體
發(fā)布時(shí)間:2021-02-17 18:12
目的:痛風(fēng)是單納尿酸鹽(monosodiumurate,MSU)晶體沉積所致的晶體相關(guān)性關(guān)節(jié)病。通過免疫調(diào)節(jié)和小分子抑制劑調(diào)節(jié)P2X7R-NLRP3炎癥小體的激活可能是治療和預(yù)防痛風(fēng)的潛在治療方法。因此,本實(shí)驗(yàn)通過巨噬細(xì)胞研究了痛風(fēng)的潛在的治療機(jī)制。方法:對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞(murine peritoneal macrophage,MPM)和骨髓來源的巨噬細(xì)(bone marrow-derived macrophages,BMDMs)用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)或三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)處理 1小時(shí),4小時(shí)候后,用MSU晶體刺激,建立體外模型。并通過蛋白印跡,酶聯(lián)免疫吸附測定實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞內(nèi)和胞外炎癥相關(guān)因子的表達(dá)情況。結(jié)果:體外實(shí)驗(yàn)中,用LPS加MSU晶體處理的小鼠腹腔巨噬細(xì)胞(MPM)和小鼠骨髓來源的巨噬細(xì)胞(BMDMs)均分泌IL-11β,其TLR4抑制劑(CLI-095)及NF-κB抑制劑(PDTA)明顯抑制了 IL-1β的分泌。然而,選擇性P2X7R抑制劑(A438079)不能抑制IL-1β的裂解和釋放。此外...
【文章來源】:延邊大學(xué)吉林省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:38 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
英文縮略表
前言
第一章 實(shí)驗(yàn)材料和方法
1.1 實(shí)驗(yàn)材料
1.1.1 主要材料
1.2 實(shí)驗(yàn)方法
1.2.1 小鼠腹腔巨噬細(xì)胞分離與培養(yǎng)
1.2.2 小鼠骨髓源巨噬細(xì)胞分離與培養(yǎng)
1.2.3 蛋白印跡實(shí)驗(yàn)
1.2.4 ELISA實(shí)驗(yàn)
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
第二章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.1 LPS刺激是MSU晶體誘導(dǎo)腹腔巨噬細(xì)胞釋放IL-1β的必要條件
2.2 MSU晶體濃度決定LPS刺激小鼠腹腔巨噬細(xì)胞分泌成熟的IL-1β
2.3 小鼠腹腔巨噬細(xì)胞基于TLR4-caspase-1-caspase-3調(diào)節(jié)的IL-1β分泌非依賴于P2X7R
2.4 AMPK對(duì)MSU晶體誘導(dǎo)的小鼠腹腔巨噬細(xì)胞中的影響
2.5 LPS與MSU聯(lián)合刺激促進(jìn)BMDMs釋放成熟的IL-1β
2.6 MSU晶體濃度決定LPS刺激BMDMs是否分泌IL-1β
2.7 BMDMs基于TLR4-NF-κB調(diào)節(jié)的IL-1β分泌非依賴于P2X7R
第三章 討論
第四章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Effects of Polygonum cuspidatum on AMPK-FOXO3α Signaling Pathway in Rat Model of Uric Acid-Induced Renal Damage[J]. MA Wei-guo,WANG Jie,BU Xiang-wei,ZHANG Hong-hong,ZHANG Jian-ping,ZHANG Xiao-xu,HE Yu-xi,WANG Da-li,ZHANG Zheng-ju,MENG Feng-xian. Chinese Journal of Integrative Medicine. 2019(03)
[2]The regulation effect of AMPK in immune related diseases[J]. Jing Wang,Zhenyu Li,Li Gao,Yanshuang Qi,Haibo Zhu,Xuemei Qin. Science China(Life Sciences). 2018(05)
本文編號(hào):3038350
【文章來源】:延邊大學(xué)吉林省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:38 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
英文縮略表
前言
第一章 實(shí)驗(yàn)材料和方法
1.1 實(shí)驗(yàn)材料
1.1.1 主要材料
1.2 實(shí)驗(yàn)方法
1.2.1 小鼠腹腔巨噬細(xì)胞分離與培養(yǎng)
1.2.2 小鼠骨髓源巨噬細(xì)胞分離與培養(yǎng)
1.2.3 蛋白印跡實(shí)驗(yàn)
1.2.4 ELISA實(shí)驗(yàn)
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
第二章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.1 LPS刺激是MSU晶體誘導(dǎo)腹腔巨噬細(xì)胞釋放IL-1β的必要條件
2.2 MSU晶體濃度決定LPS刺激小鼠腹腔巨噬細(xì)胞分泌成熟的IL-1β
2.3 小鼠腹腔巨噬細(xì)胞基于TLR4-caspase-1-caspase-3調(diào)節(jié)的IL-1β分泌非依賴于P2X7R
2.4 AMPK對(duì)MSU晶體誘導(dǎo)的小鼠腹腔巨噬細(xì)胞中的影響
2.5 LPS與MSU聯(lián)合刺激促進(jìn)BMDMs釋放成熟的IL-1β
2.6 MSU晶體濃度決定LPS刺激BMDMs是否分泌IL-1β
2.7 BMDMs基于TLR4-NF-κB調(diào)節(jié)的IL-1β分泌非依賴于P2X7R
第三章 討論
第四章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Effects of Polygonum cuspidatum on AMPK-FOXO3α Signaling Pathway in Rat Model of Uric Acid-Induced Renal Damage[J]. MA Wei-guo,WANG Jie,BU Xiang-wei,ZHANG Hong-hong,ZHANG Jian-ping,ZHANG Xiao-xu,HE Yu-xi,WANG Da-li,ZHANG Zheng-ju,MENG Feng-xian. Chinese Journal of Integrative Medicine. 2019(03)
[2]The regulation effect of AMPK in immune related diseases[J]. Jing Wang,Zhenyu Li,Li Gao,Yanshuang Qi,Haibo Zhu,Xuemei Qin. Science China(Life Sciences). 2018(05)
本文編號(hào):3038350
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