發(fā)布時間：2020-10-16 22:21

　　 背景:支氣管哮喘(Asthma)是一種異質(zhì)性慢性炎癥性氣道疾病,其特征是氣道高反應(yīng)性(Airway hyper reactivity,AHR)和可逆性氣道阻塞。AHR是指炎性細(xì)胞的浸潤和炎癥因子的釋放導(dǎo)致支氣管的收縮增加。哮喘是以異常T細(xì)胞反應(yīng)引起的慢性氣道炎癥為特征。其中CD4+T淋巴細(xì)胞(Lymphocyte,LY)(包括Th1,Th2和Th17細(xì)胞)的滲出參與了氣道炎癥的發(fā)生發(fā)展。雖然在哮喘的研究過程中,過敏原誘導(dǎo)的Th2淋巴細(xì)胞以及白細(xì)胞介素5(Interleukin-5,IL-5)介導(dǎo)的嗜酸性粒細(xì)胞(Eosinophil,EOS)的應(yīng)答在目前已得到充分的證明,但最近的研究也顯示,高達(dá)50%的哮喘患者沒有嗜酸性粒細(xì)胞炎癥的證據(jù),而這類哮喘被稱為非嗜酸性粒細(xì)胞性哮喘(Non-eosinophilic asthma,NEA)。這也充分體現(xiàn)了哮喘是一種異質(zhì)性疾病。目前大量的基礎(chǔ)和臨床實驗結(jié)果揭示以誘導(dǎo)痰炎性細(xì)胞百分比分類的“哮喘亞型”,可體現(xiàn)不同的發(fā)病機(jī)制以及不同的臨床治療特點(diǎn)。具體分類方法如下:中性粒細(xì)胞型哮喘(Neutrophilic asthma,NA)(EOS≤3%,中性粒細(xì)胞(Neutrophil,NEU)61%),混合性粒細(xì)胞型哮喘(Mixed granulocytic asthma,MA)(EOS3%,NEU61%),粒細(xì)胞缺乏型哮喘(Paucigranulocytic asthma,PA)(EOS≤3%且NEU≤61%)以及嗜酸性粒細(xì)胞型哮喘(Eosinophilic asthma,EA)(EOS3%且NEU≤6%)。由于各亞型存在明顯不同的免疫學(xué)機(jī)制,所以每個亞型對治療也存在不同的反應(yīng),這為哮喘的“個體化治療”提供新的依據(jù)。EA對皮質(zhì)類固醇反應(yīng)良好,皮質(zhì)類固酵也是目前使用的一線療法。另一方面,NA則是由感染和環(huán)境污染物引起的先天性免疫系統(tǒng)激活所驅(qū)動,對吸入性皮質(zhì)類固醇反應(yīng)較差,最新的研究表明阿奇霉素也許對此類型哮喘發(fā)作有抑制作用。近年來,許多研究已經(jīng)表明,每種亞型對治療具有不同的機(jī)制和不同的反應(yīng)。新近發(fā)現(xiàn)的白細(xì)胞介素35(Interleukin-35,IL-35)具有顯著的抗炎活性,IL-35在調(diào)節(jié)過敏性氣道炎癥發(fā)生中發(fā)揮著重要的作用。有研究證明給予氣道外源性IL-35,可抑制小鼠Th2細(xì)胞功能,從而抑制過敏性氣道炎癥,并且可以抑制過敏源特異的免疫球蛋白E(Immunoglobulin E,IgE)反應(yīng)。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)IL-35+T細(xì)胞能夠抑制Th17細(xì)胞介導(dǎo)的變應(yīng)性氣道高反應(yīng);已有臨床研究表明,哮喘患者血清中IL-35水平降低,且與臨床癥狀和肺功能成負(fù)相關(guān),同時血清IL-35水平和外周血細(xì)胞中IL-35 mRNA的表達(dá)與IL-4+Tc2和IL-17A+Tc17細(xì)胞數(shù)量顯著負(fù)相關(guān)。與此相反,另有研究報道哮喘患者血清IL-35表達(dá)明顯高于正常人。這些研究結(jié)果的不一致,說明了哮喘發(fā)病機(jī)制的異質(zhì)性。目前IL-35在哮喘炎癥亞型中表達(dá)是否存在差異,尚無相關(guān)報道。目的:本研究通過檢測誘導(dǎo)痰上清IL-35的表達(dá),探討IL-35在哮喘炎癥亞型中的差異表達(dá),以及IL-35參與不同亞型的病理生理學(xué)機(jī)制。方法:1.根據(jù)誘導(dǎo)痰修正方案隨機(jī)入選吉林大學(xué)第二醫(yī)院門診復(fù)查的哮喘患者和健康志愿者,所有參加本研究者均進(jìn)行相關(guān)檢查(肺功能檢查、呼出氣NO實驗、血常規(guī))并采集患者基本信息。本研究按照Gibson PG提出的誘導(dǎo)痰炎性細(xì)胞分類標(biāo)準(zhǔn)確定哮喘亞型。2.通過ELISA法檢測哮喘患者和健康志愿者的IL-35、白細(xì)胞介素9(Interleukin-9,IL-9)、白細(xì)胞介素 37(Interleukin-37,IL-37)等炎癥因子的表達(dá)水平,并通過多因子檢測法運(yùn)用流式細(xì)胞儀對誘導(dǎo)痰痰上清進(jìn)行其他相關(guān)因子的檢測,主要包括白細(xì)胞介素1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白細(xì)胞介素6(Interleukin-6,IL-6)、白細(xì)胞介素 8(Interleukin-8,IL-8)、白細(xì)胞介素 1 0(Interleukin-10,1L-10)、白細(xì)胞介素 12p70(Interleukin-12p70,IL-12p70)、白細(xì)胞介素 17A(Interleukin-17A,IL-17A)、白細(xì)胞介素 1 8(Interleukin-18,IL-18)、白細(xì)胞介素 23(Interleukin-23,IL-23)、白細(xì)胞介素 33(Interleukin-33,IL-33)、干擾素 α(Interferon-α,INF-α)、干擾素 γ(Interferon-γ,INF-γ)、腫瘤壞死因子α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、單核細(xì)胞趨化蛋白 1(Monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)比較哮喘組與健康組,哮喘炎癥亞型之間的臨床資料、肺功能、FeNO、血常規(guī)等炎癥因子表達(dá)水平差異。結(jié)果:1.研究對象臨床基本特點(diǎn)及IL-35在不同研究對象中的表達(dá)情況:①研究對象為114名哮喘患者及20名健康志愿者,其中90名患者及19名健康志愿者誘導(dǎo)痰痰涂片合格;②兩組受試者一般情況無統(tǒng)計學(xué)意義;③哮喘組與健康組相比,具有明顯偏高的呼出氣NO(FeNO)(P0.05),同時具有明顯偏低的肺功能指標(biāo)(FEV1、FVC、FEV1/FVC、FEV1%預(yù)計值)(P0.05);④哮喘組誘導(dǎo)痰涂片中嗜酸性粒細(xì)胞總數(shù)及百分比較健康組明顯增高(P0.05),巨噬細(xì)胞百分比較健康組明顯偏低(P0.05);⑤哮喘組痰上清IL-35水平[4.89(2.99,22.54)ng/ml]較健康對照組無明顯差異[6.01(4.15,2.79)]。2.哮喘炎癥細(xì)胞表型特征及IL-35在哮喘分型中的表達(dá)水平差異:①按照Gibson PG提出的誘導(dǎo)痰炎性細(xì)胞分類標(biāo)準(zhǔn),將哮喘組分為四種哮喘類型:EA 38 例(42.22%);PA39 例(43.33%);MA9 例(10%);NA4 例(4.44%);②其中 NA 的 IL-35 水平最高[40.59(21.63,62.52)],其次為 PA[6.25(3.19,23.44)]和 MA[22.54(2.59,45.69)]而 EA 最低[3.96(2.84,10.92)],差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。3.IL-35與其他炎癥因子、FeNO、FEV1/FVC等的關(guān)系:IL-35 與FeNO、FEV1/FVC呈明顯負(fù)相關(guān),與痰上清嗜酸性粒細(xì)胞總數(shù)呈顯著負(fù)相關(guān),而與痰上清中性粒細(xì)胞總數(shù)呈正相關(guān)。同時IL-35與IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12p70、IL-17A、IL-23、IL-33、IFN-y、TNF-α、MCP-1 有明顯的正相關(guān)關(guān)系。結(jié)論:1.不同的哮喘亞型具有不同的臨床特征:EA更為年輕化,MA患者肺功能最差,PA患者肺功能最好。2.誘導(dǎo)痰痰上清中的IL-35與哮喘亞型關(guān)系密切,在嗜酸性粒細(xì)胞型哮喘表達(dá)最低,在中性粒細(xì)胞型哮喘表達(dá)最高;同時在嗜酸性粒細(xì)胞型哮喘與非嗜酸性粒細(xì)胞哮喘相比,表達(dá)明顯較低。3.誘導(dǎo)痰痰上清中的IL-35能夠預(yù)示患者氣道炎癥嚴(yán)重程度以及哮喘亞型。4.結(jié)合其他炎癥因子與IL-35的相關(guān)性研究分析,可推斷出IL-35促進(jìn)中性粒細(xì)胞型哮喘炎癥反應(yīng),抑制嗜酸性粒細(xì)胞型哮喘炎癥反應(yīng),未來有望為哮喘的分型診斷及治療提供了新的研究方向。
【學(xué)位單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R562.25
【部分圖文】：

圖２．１?ＩＬ－３５的結(jié)構(gòu)和ＪＡＫ－ＳＴＡＴ信號通路的激活??２．２．２?ＩＬ－３５與各種細(xì)胞的關(guān)系??Ｔｈ細(xì)胞：ＩＬ－３５是一種新的抗炎細(xì)胞因子，參與多種自身免疫疾病，主要??由Ｔｒｅｇ產(chǎn)生，進(jìn)而誘導(dǎo)Ｔｒｅｇ的產(chǎn)生，ＩＬ－３５誘導(dǎo)的Ｔｒｅｇ被稱為“ｉＴｒ３５”，是一??種新型Ｔｒｅｇ，通過分泌ＩＬ－３５和ＩＬ－１０發(fā)揮免疫抑制作用［叫。研究表明ＩＬ－３５??導(dǎo)致Ｆｏｘｐ３表達(dá)上調(diào)，導(dǎo)致ＥＢ１３缺失小鼠載脂蛋白ＣＤ４＋?ＣＤ２５＋?ＦｏｘｐＳｌｒｅｇｓ??細(xì)胞比例顯著升高，給予ＩＬ－３５可以顯著增加Ｔｒｅｇ的數(shù)量［３９］。??嗜酸性粒細(xì)胞：ＩＬ－３５對ＬＰＳ刺激的ＥＢＩ３缺失小鼠ＢＡＬＦ中顯著降低了嗜??酸性粒細(xì)胞數(shù)量，同時有研究報道ＩＬ－３５抑制ＬＰＳ誘導(dǎo)的氣道嗜酸性粒細(xì)胞，??部分是通過減少ＣＣＬ１１和ＣＣＬ２４的產(chǎn)生［４Ｇ］。??中性粒細(xì)胞：ＩＬ－３５可以誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞向Ｎ２表型極化，在中性粒細(xì)胞存??在的情況下，用ＣＤ３／ＣＤ２８抗體刺激脾臟細(xì)胞，幼稚小鼠的中性粒細(xì)胞未明顯??Ｔ。ＩＬ－３５？顯Ｔ，ＩＬ－３５

存在較嚴(yán)重的氣道炎癥。哮喘組Ｍａ總數(shù)與健康對照組相比偏低，同時Ｍａ總??數(shù)百分比也顯著低于健康對照組［６丨．６５（２８，８５．７）?ｖｓ?８３．７５（７１．１３，８８．６３）％，?Ｐ＜０．０５］??（見圖４．１，表４．１），可能是與健康人氣道炎性細(xì)胞以Ｍａ為主有關(guān)。??１２１?Ｑ?１００－Ｊ?廣廣。哮喘組??二?°?Ａ?Ｃｌ８？餐?Ａ健康對照組??ｉ?８＇?§?８?２?＇?Ｉ?。?Ｉ?家??１?Ｌｘｉｉ１?ｉｉｉｉｉ：??痰中炎癥細(xì)胞計數(shù)?痰中炎癥細(xì)胞計數(shù)??圖４．１哮喘組與健康對照組炎性細(xì)胞總數(shù)及百分比比較??１４??

圖４．２四種炎癥表型細(xì)胞分布特征??注：Ａ：中性粒細(xì)胞型（Ｘｌ〇〇），?Ｂ：中性粒細(xì)胞型（Ｘ４００），?Ｃ：混合粒細(xì)胞型（Ｘ１００），??Ｄ：混合粒細(xì)胞型（Ｘ?４００），?Ｅ：粒細(xì)胞缺乏型（Ｘ１００），?Ｆ：粒細(xì)胞缺乏型（Ｘ?４００），?Ｇ：??嗜酸粒細(xì)胞型（Ｘ１００），?Ｈ：嗜酸粒細(xì)胞型（Ｘ４００）；紅色箭頭：嗜酸性粒細(xì)胞．綠色箭??頭：中性粒細(xì)胞。??１７??？??
【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 范鳴浩;;甘草酸與β2腎上腺素受體激動劑聯(lián)合抑制哮喘炎癥研究[J];醫(yī)學(xué)信息(中旬刊);2011年09期

2 陳康;哮喘的炎癥反應(yīng)過程及治療[J];國外醫(yī)學(xué).呼吸系統(tǒng)分冊;1995年03期

3 堯鴻輝，謝平，胡曉慧;哮喘炎癥治療新動向[J];現(xiàn)代診斷與治療;1995年01期

4 ;區(qū)分哮喘炎癥表型:鼻灌洗比外周血更勝一籌[J];內(nèi)科;2017年03期

5 李睿;劉恩梅;楊錫強(qiáng);王莉佳;;不同飼養(yǎng)環(huán)境、種屬、佐劑及激發(fā)方法對小鼠哮喘炎癥的影響[J];重慶醫(yī)學(xué);2006年01期

6 謝慶玲,焦偉,溫志紅,譚穎,胡瓊燕;孟魯司特對兒童哮喘炎癥因子的影響[J];實用兒科臨床雜志;2005年04期

7 姚澤忠;細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)與支氣管哮喘[J];國外醫(yī)學(xué).呼吸系統(tǒng)分冊;2001年03期

8 劉春濤,謝敏,王曾禮;幾種新發(fā)現(xiàn)的與哮喘有關(guān)的細(xì)胞因子[J];國外醫(yī)學(xué)(內(nèi)科學(xué)分冊);2000年03期

9 尹艷慧;變態(tài)反應(yīng)性哮喘炎癥的可溶性標(biāo)志[J];國外醫(yī)學(xué).免疫學(xué)分冊;1995年05期

10 王人佩;;咳嗽變異性哮喘98例臨床分析[J];大家健康(學(xué)術(shù)版);2012年12期

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前2條

1 辛桐;IL-35在哮喘炎癥亞型中的差異表達(dá)及意義[D];吉林大學(xué);2019年

2 楊莉;Vam3抗哮喘炎癥和氣道重塑作用及機(jī)理的研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2010年

本文編號：2843851