發(fā)布時(shí)間：2020-09-30 10:30

　　 目的:探討硬脂酸激活NLRP3炎性體在原發(fā)性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎中的作用及其臨床意義。方法:采集15例急性期痛風(fēng)患者(AG組)、15例間隙期痛風(fēng)患者(IG組)、15例健康對照者(HC組)的外周靜脈血,肝素鈉抗凝,分成4ml/管,分別采用PBS、0.1%乙醇、C18:0(400μmol/L)、MSU(100μg/ml)、C18:0(400μmol/L)+MSU(100μg/ml)進(jìn)行刺激,置于含5%CO_2的37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育6小時(shí),分離血漿,提取外周血單個核細(xì)胞(PBMCs)。懫用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(RT-qPCR)分別檢測AG、IG、HC組PBMCs中NLRP3、ASC、Caspase1、IL-1β、GPR120基因mRNA的表達(dá)。酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)法(ELISA)檢測AG、IG和HC組刺激后血漿中細(xì)胞因子IL-1β的蛋白表達(dá)水平。此外,收集上述痛風(fēng)患者及健康對照者臨床資料及實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)進(jìn)行對比分析。采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析,多組間的比較采用單因素方差分析(One-way ANOVA),各組間兩兩比較采用最小顯著差數(shù)法(LSD),表達(dá)量組間分析采用t檢驗(yàn)或秩變換分析進(jìn)行檢驗(yàn),結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((?)±s)表示,P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:(1)AG組與IG組白細(xì)胞(WBC)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、肌酐(Crea)、尿酸(UA)均顯著高于HC組(P0.05,P0.01),AG組中性粒細(xì)胞(GR)、超敏C反應(yīng)蛋白(hsCRP)顯著高于IG及HC組(P0.01),且AG組血沉(ESR)顯著高于IG組(P0.01)。(2)AG組,IG組,HC組外周靜脈血經(jīng)PBS、0.1%Alcohol、C18:0(400μmol/L)、MSU(100μg/ml)、C18:0(400μmol/L)+MSU(100μg/ml)刺激后PBMCs中NLRP3mRNA的表達(dá)均為AG組和IG組顯著低于HC組(P0.01),AG組和IG組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);ASCm RNA、Caspase1m RNA、IL-1βm RNA、GPR120m RNA、IL-1β血漿蛋白的表達(dá)均為AG組和IG組顯著高于HC組(P0.05,P0.01),且AG組的ASCm RNA、Caspase1m RNA、GPR120m RNA、IL-1β血漿蛋白的表達(dá)均顯著高于IG組(P0.05,P0.01),IL-1βm RNA在AG組和IG組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(3)AG、IG、HC組的C18:0(400μmol/L)刺激組、MSU(100μg/ml)刺激組、C18:0(400μmol/L)+MSU(100μg/ml)刺激組PBMCs中NLRP3m RNA的表達(dá)均顯著低于其對照組(PBS組,0.1%乙醇組),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05,P0.01);ASCm RNA、Caspase1m RNA、IL-1βm RNA、GPR120m RNA、IL-1β血漿蛋白的表達(dá)均顯著高于其刺激對照組(PBS組,0.1%乙醇組),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05,P0.01)。(4)AG組中C18:0(400μmol/L)刺激組NLRP3m RNA的表達(dá)顯著高于MSU(100μg/ml)刺激組(P0.05)和C18:0(400μmol/L)+MSU(100μg/ml)刺激組(P0.01)。IG組中,C18:0(400μmol/L)刺激組,MSU(100μg/ml)刺激組,C18:0(400μmol/L)+MSU(100μg/ml)刺激組,三組間NLRP3 m RNA的表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。HC組中C18:0(400μmol/L)刺激組NLRP3m RNA的表達(dá)顯著高于C18:0(400μmol/L)+MSU(100μg/ml)刺激組(P0.01);在AG、IG、HC組中C18:0(400μmol/L)刺激組的ASCm RNA、Caspase1m RNA、IL-1βm RNA、GPR120m RNA、IL-1β血漿蛋白的表達(dá)均顯著高于MSU(100μg/ml)刺激組(P0.05,P0.01),均顯著低于C18:0(400μmol/L)+MSU(100μg/ml)刺激組(P0.05,P0.01)。結(jié)論:在痛風(fēng)炎癥的發(fā)生發(fā)展過程中,MSU晶體活化NLRP3炎性體發(fā)揮重要的作用,而飽和長鏈脂肪酸C18:0(硬脂酸)對痛風(fēng)炎癥具有重要的促進(jìn)作用,其機(jī)制可能與其活化NLRP3炎性體及激活其受體GPR120密切相關(guān)。
【學(xué)位單位】：川北醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R589.7
【部分圖文】：

NLRP3炎性體信號通路

NALP3信號傳導(dǎo)通路

圖 1-3 NLRP3 相關(guān)激活通路圖示注：3 條主要激活機(jī)制及 IL-1β 可能的正反饋機(jī)制,FFA 通過激活 NLRP3 炎性體介導(dǎo) IL-1β 表達(dá)后，IL-1β 可以通過 IL-1R1 激活 IRAK1/4 促進(jìn)炎癥放大作用及增加 MSU 晶體的致炎作用。（圖 1-3 引用自 朱榮濤.游離脂肪酸通過 NLRP3 介導(dǎo)致 Kupffer 細(xì)胞炎癥反應(yīng)的機(jī)制研究. 重慶：重慶醫(yī)科大學(xué)，2013.）圖 1-4 總 RNA 電泳圖

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前6條

1 朱丹;李玲琴;張全波;青玉鳳;王東生;徐陽洋;鐘曉武;周京國;;原發(fā)性痛風(fēng)中微小RNA-223表達(dá)變化及其臨床意義[J];中華風(fēng)濕病學(xué)雜志;2017年03期

2 黨萬太;謝文光;蔡燕;趙明才;蔣紅;李玲琴;周暢;周京國;;原發(fā)性痛風(fēng)患者外周血單個核細(xì)胞PYCARD基因及其轉(zhuǎn)錄剪接體的表達(dá)變化[J];四川大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2015年01期

3 胡金波;谷恒存;丁志山;姚立;范永升;丁興紅;;系統(tǒng)性紅斑狼瘡小鼠的血清代謝組學(xué)研究[J];中華中醫(yī)藥雜志;2014年04期

4 黨萬太;周京國;謝文光;蔡燕;青玉鳳;邱亞;趙明才;蔣紅;李玲琴;周暢;;原發(fā)性痛風(fēng)患者外周血單個核細(xì)胞核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域樣受體3基因轉(zhuǎn)錄剪接體的研究[J];中華風(fēng)濕病學(xué)雜志;2014年02期

5 張志岐;束剛;方心靈;趙增陽;周桂炫;王松波;江青艷;;G蛋白偶聯(lián)受體介導(dǎo)游離脂肪酸的信號通路及生理功能[J];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2009年09期

6 曾軍英;孫志洪;譚支良;;游離脂肪酸受體蛋白研究進(jìn)展[J];生命科學(xué);2008年03期

本文編號：2830713