發(fā)布時間：2020-09-30 01:29

　　 背景:類風濕關節(jié)炎(rheumatoid arthritis,RA)主要侵害小關節(jié),具有對稱性小關節(jié)慢性破壞的特點,晚期可進展為全身多個關節(jié)結構及功能受損。到目前為止,臨床上治療類風濕關節(jié)炎仍首選激素、免疫抑制劑及生物制劑等,但隨著用藥時間的延長,許多患者出現癥狀持續(xù)不緩解或者癥狀反復發(fā)作,這可能與多藥耐藥性(multidrug resistance,MDR)產生相關。其中,家族成員P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp),它發(fā)揮能量依賴泵的作用,可以把藥物轉運出效應細胞。IL-1β作為RA發(fā)病過程中的細胞因子,貫穿于疾病進展全階段,加重炎癥反應。我們前期研究成果已經證實在RA患者淋巴細胞中,隨著IL-6、IL-17的濃度增加和時間延長,P-gp表達發(fā)生相應的變化,因此,我們通過觀察RA中炎性細胞因子IL-1β對外周血淋巴細胞上的耐藥蛋白P-gp的調節(jié),進而探索對P-gp介導下的耐藥性。目的:通過炎性細胞因子IL-1β來探索類風濕關節(jié)炎患者中IL-1β對外周血淋巴細胞耐藥蛋白P-gp表達的影響。方法:收集初診RA患者20例,采集上述RA患者外周血,離心血清,從細胞因子、基因表達以及蛋白水平上進行研究,用CBA試劑盒對研究對象的IL-1β水平進行定量分析。同時分離淋巴細胞,設立淋巴細胞培養(yǎng)組,包括空白對照組以及不同濃度IL-1β組,用RT-PCR的方法測P-gp mRNA的表達水平,羅丹明123實驗(Rhl23熒光強度代表Rhl23的蓄積量,從而間接反映的P-gp功能)檢測P-gp的功能。同樣地,復測不同時間下P-gp的mRNA水平及功能。結果:1.CBA對初診RA患者的IL-1β水平進行定量分析:將不同RA患者外周血的IL-1β水平與健康對照組IL-1β的數值相比較,RA患者IL-1β的水平增高(P0.1)。同時將RA患者IL-1β的水平與P-gp mRNA的表達相比,兩者之間目前尚無關聯(P0.1)。2.RT-PCR的方法測RA患者P-gp mRNA:在0ng、5ng、10ng的IL-1β作用下,P-gp mRNA表達水平不同(P0.1)。進一步對0、24、48小時每個時間上的三個濃度的差異性進行分析,24和48小時的時間水平上不同濃度處理有差異(P0.1)。在24和48小時時間水平上,5ng和0ng組相比升高(P0.1)。隨0、24、48小時的培養(yǎng)時間延長,P-gp mRNA表達水平有差別(P0.1)。在同一濃度水平,5ng作用下24、48和0小時相比均升高(P0.1),以48小時明顯(P0.05)。3.羅丹明123實驗檢測RA患者P-gp的功能:在0ng、5ng、10ng的IL-1β作用下,細胞內Rhl23的熒光強度無差別(P0.1)。隨著IL-1β刺激0、24、48小時時間延長,細胞內Rhl23的熒光強度逐漸減少(P0.1)。在同一濃度水平,5ng作用下48和0小時相比減少(P0.1)。結論:1.初診RA患者外周血IL-1β較正常對照升高,與P-gp mRNA的表達尚無顯著相關。2.在IL-1β特定的濃度和時間影響下,初診RA患者外周血淋巴細胞P-gp mRNA的表達水平顯著升高,表現出一定程度的濃度和時間相關,為探索IL-1β對P-gp作用下的多藥耐藥性做了研究基礎。3.在IL-1β特定的濃度和時間影響下,初診RA患者外周血淋巴細胞P-gp的功能顯著增強,表現出一定程度的濃度和時間相關,同樣地,為探索IL-1β對P-gp作用下的多藥耐藥性提供了理論依據。
【學位單位】：山西醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2018
【中圖分類】：R593.22
【部分圖文】：

山西醫(yī)科大學（博）碩士學位論文2 結 果2.1 BD-CBA 檢測各 RA 培養(yǎng)組血清 IL-1β水平將初診 RA 患者外周血 IL-1β水平與健康對照的 IL-1β的數值相比較，顯示患病組 IL-1β水平升高（P<0.1）。同時將 RA 患者 IL-1β的水平與 P-gp mRNA 的表達相比，兩者之間尚無顯著相關（P>0.1），可能隨治療進展相關性發(fā)生變化。

健康人IL-1β微球陣列

初診RA患者IL-1β微球陣列

【參考文獻】

相關期刊論文 前2條

1 Vibeke Andersen;Katrine Svenningsen;Lina Almind Knudsen;Axel Kornerup Hansen;Uffe Holmskov;Allan Stensballe;Ulla Vogel;;Novel understanding of ABC transporters ABCB1/MDR/P-glycoprotein, ABCC2/MRP2, and ABCG2/BCRP in colorectal pathophysiology[J];World Journal of Gastroenterology;2015年41期

2 黃鶯;徐芳;萬勇;孫潔民;李劍平;;雷帕霉素對肺間質纖維化大鼠IL-17、IL-2、TGF-β和IL-6及調節(jié)性T細胞的影響[J];安徽醫(yī)藥;2014年03期

本文編號：2830548