背景:類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis,RA)主要侵害小關(guān)節(jié),具有對(duì)稱性小關(guān)節(jié)慢性破壞的特點(diǎn),晚期可進(jìn)展為全身多個(gè)關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)及功能受損。到目前為止,臨床上治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎仍首選激素、免疫抑制劑及生物制劑等,但隨著用藥時(shí)間的延長(zhǎng),許多患者出現(xiàn)癥狀持續(xù)不緩解或者癥狀反復(fù)發(fā)作,這可能與多藥耐藥性(multidrug resistance,MDR)產(chǎn)生相關(guān)。其中,家族成員P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp),它發(fā)揮能量依賴泵的作用,可以把藥物轉(zhuǎn)運(yùn)出效應(yīng)細(xì)胞。IL-1β作為RA發(fā)病過(guò)程中的細(xì)胞因子,貫穿于疾病進(jìn)展全階段,加重炎癥反應(yīng)。我們前期研究成果已經(jīng)證實(shí)在RA患者淋巴細(xì)胞中,隨著IL-6、IL-17的濃度增加和時(shí)間延長(zhǎng),P-gp表達(dá)發(fā)生相應(yīng)的變化,因此,我們通過(guò)觀察RA中炎性細(xì)胞因子IL-1β對(duì)外周血淋巴細(xì)胞上的耐藥蛋白P-gp的調(diào)節(jié),進(jìn)而探索對(duì)P-gp介導(dǎo)下的耐藥性。目的:通過(guò)炎性細(xì)胞因子IL-1β來(lái)探索類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者中IL-1β對(duì)外周血淋巴細(xì)胞耐藥蛋白P-gp表達(dá)的影響。方法:收集初診RA患者20例,采集上述RA患者外周血,離心血清,從細(xì)胞因子、基因表達(dá)以及蛋白水平上進(jìn)行研究,用CBA試劑盒對(duì)研究對(duì)象的IL-1β水平進(jìn)行定量分析。同時(shí)分離淋巴細(xì)胞,設(shè)立淋巴細(xì)胞培養(yǎng)組,包括空白對(duì)照組以及不同濃度IL-1β組,用RT-PCR的方法測(cè)P-gp mRNA的表達(dá)水平,羅丹明123實(shí)驗(yàn)(Rhl23熒光強(qiáng)度代表Rhl23的蓄積量,從而間接反映的P-gp功能)檢測(cè)P-gp的功能。同樣地,復(fù)測(cè)不同時(shí)間下P-gp的mRNA水平及功能。結(jié)果:1.CBA對(duì)初診RA患者的IL-1β水平進(jìn)行定量分析:將不同RA患者外周血的IL-1β水平與健康對(duì)照組IL-1β的數(shù)值相比較,RA患者IL-1β的水平增高(P0.1)。同時(shí)將RA患者IL-1β的水平與P-gp mRNA的表達(dá)相比,兩者之間目前尚無(wú)關(guān)聯(lián)(P0.1)。2.RT-PCR的方法測(cè)RA患者P-gp mRNA:在0ng、5ng、10ng的IL-1β作用下,P-gp mRNA表達(dá)水平不同(P0.1)。進(jìn)一步對(duì)0、24、48小時(shí)每個(gè)時(shí)間上的三個(gè)濃度的差異性進(jìn)行分析,24和48小時(shí)的時(shí)間水平上不同濃度處理有差異(P0.1)。在24和48小時(shí)時(shí)間水平上,5ng和0ng組相比升高(P0.1)。隨0、24、48小時(shí)的培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng),P-gp mRNA表達(dá)水平有差別(P0.1)。在同一濃度水平,5ng作用下24、48和0小時(shí)相比均升高(P0.1),以48小時(shí)明顯(P0.05)。3.羅丹明123實(shí)驗(yàn)檢測(cè)RA患者P-gp的功能:在0ng、5ng、10ng的IL-1β作用下,細(xì)胞內(nèi)Rhl23的熒光強(qiáng)度無(wú)差別(P0.1)。隨著IL-1β刺激0、24、48小時(shí)時(shí)間延長(zhǎng),細(xì)胞內(nèi)Rhl23的熒光強(qiáng)度逐漸減少(P0.1)。在同一濃度水平,5ng作用下48和0小時(shí)相比減少(P0.1)。結(jié)論:1.初診RA患者外周血IL-1β較正常對(duì)照升高,與P-gp mRNA的表達(dá)尚無(wú)顯著相關(guān)。2.在IL-1β特定的濃度和時(shí)間影響下,初診RA患者外周血淋巴細(xì)胞P-gp mRNA的表達(dá)水平顯著升高,表現(xiàn)出一定程度的濃度和時(shí)間相關(guān),為探索IL-1β對(duì)P-gp作用下的多藥耐藥性做了研究基礎(chǔ)。3.在IL-1β特定的濃度和時(shí)間影響下,初診RA患者外周血淋巴細(xì)胞P-gp的功能顯著增強(qiáng),表現(xiàn)出一定程度的濃度和時(shí)間相關(guān),同樣地,為探索IL-1β對(duì)P-gp作用下的多藥耐藥性提供了理論依據(jù)。
【學(xué)位單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R593.22
【部分圖文】：

山西醫(yī)科大學(xué)（博）碩士學(xué)位論文2 結(jié) 果2.1 BD-CBA 檢測(cè)各 RA 培養(yǎng)組血清 IL-1β水平將初診 RA 患者外周血 IL-1β水平與健康對(duì)照的 IL-1β的數(shù)值相比較，顯示患病組 IL-1β水平升高（P<0.1）。同時(shí)將 RA 患者 IL-1β的水平與 P-gp mRNA 的表達(dá)相比，兩者之間尚無(wú)顯著相關(guān)（P>0.1），可能隨治療進(jìn)展相關(guān)性發(fā)生變化。

健康人IL-1β微球陣列

初診RA患者IL-1β微球陣列

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 Vibeke Andersen;Katrine Svenningsen;Lina Almind Knudsen;Axel Kornerup Hansen;Uffe Holmskov;Allan Stensballe;Ulla Vogel;;Novel understanding of ABC transporters ABCB1/MDR/P-glycoprotein, ABCC2/MRP2, and ABCG2/BCRP in colorectal pathophysiology[J];World Journal of Gastroenterology;2015年41期

2 黃鶯;徐芳;萬(wàn)勇;孫潔民;李劍平;;雷帕霉素對(duì)肺間質(zhì)纖維化大鼠IL-17、IL-2、TGF-β和IL-6及調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的影響[J];安徽醫(yī)藥;2014年03期

本文編號(hào)：2830548