目的:研究分析蟲草菌粉對急性百草枯(PQ)中毒大鼠肺損傷的治療作用及相關(guān)機(jī)制。方法:選用健康成年SD大鼠210只(雌雄各半),隨機(jī)分為A、B、C、D組:A組(健康對照組)35只:給予一次2.5ml生理鹽水腹腔注射,每日給予5ml生理鹽水灌胃;B組(單純?nèi)径窘M)35只:給予一次PQ 20mg/kg腹腔注射,PQ濃度2mg/ml,每日給予5ml生理鹽水灌胃;C組(蟲草菌粉治療C1、C2、C3組,低、中、高劑量各35只)105只:給予一次PQ 20mg/kg腹腔注射,PQ濃度2mg/ml。低、中、高劑量每日給予蟲草菌粉0.3g/kg、1.5g/kg、5g/kg,5ml生理鹽水稀釋后灌胃;D組(維生素E治療組)35只:給予一次PQ 20mg/kg腹腔注射,PQ濃度2mg/ml。每日給予維生素E 10mg/kg,5ml生理鹽水稀釋后灌胃。各組大鼠均于造模后1d、3d、7d、14d、21d、28d、35d進(jìn)行觀察,觀察其一般狀況,毛色、呼吸、精神狀態(tài)、進(jìn)食等。染毒組、治療組(低、中、高劑量)、維生素E治療組分別于以上時間節(jié)點各取5只大鼠,心臟取血處死,留取血液標(biāo)本,測定丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px),于第7天、第21天取支氣管肺泡灌洗液、血液標(biāo)本送檢T淋巴細(xì)胞亞群�？瞻讓φ战M也在相同時間點取5只大鼠測定以上指標(biāo),同時,以上各組取大鼠左主支氣管及整個左肺,用濾紙吸干血漬,予以支氣管肺泡灌洗(BALF),右肺前葉組織制備病理切片,進(jìn)行蘇木精-伊紅染色(HE),在光鏡下進(jìn)行病理觀察。BALF和外周血中T淋巴細(xì)胞亞群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)的表達(dá)采取熒光直接標(biāo)記法、流式細(xì)胞儀檢測。應(yīng)用免疫組化方法檢測PQ中毒肺組織中α1-抗胰蛋白酶(α1-AT)的表達(dá)。α1-AT免疫組化染色陽性切片于40HP物鏡下選取10個視野觀測染色陽性細(xì)胞胞漿平均吸光度(OD),其單位面積的相對含量可反應(yīng)染色強(qiáng)度。結(jié)果:1.大鼠一般情況:A組大鼠各時間點精神狀態(tài)、活動度均表現(xiàn)良好,呼吸平穩(wěn),活潑好動,皮毛光澤發(fā)亮,進(jìn)食多,難以捕捉;C(中、高劑量)組、D組早期出現(xiàn)精神稍差,活動后稍氣促,重者活動后口唇、肢端、尾端輕度紫紺,經(jīng)治療后一周癥狀緩解,進(jìn)食增加,好動,精神狀態(tài)正常;C(低劑量)組早期癥狀較中、高劑量組重,毛發(fā)松散,靜息時即出現(xiàn)口唇、肢端、尾端輕度紫紺,進(jìn)食減少,精神差,治療后癥狀緩解時間較中、高劑量組長。B組染毒后精神狀態(tài)差,毛發(fā)松散,步態(tài)蹣跚,進(jìn)食減少,匍匐不動,易捕捉,氣促明顯,口唇、肢端、尾端明顯紫紺。2.肺組織損傷情況:C(中、高劑量)組與B組比較病理學(xué)變化明顯,肺組織損傷程度明顯改善,低劑量組較B組有一定改善。D組與A組比較,病理學(xué)變化明顯,肺組織損傷程度明顯改善。3.血清中MDA、SOD、GSH-Px水平:C(低、中、高劑量)組與B組比較,水平均優(yōu)于B組(P0.01,P0.05);D組與A組比較,水平均顯著優(yōu)于A組(P0.05)。4.外周血中T淋巴細(xì)胞亞群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+):第1、3周時,C1、C2、C3組靜脈血中CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+較B組上升(P0.01,P0.05),蟲草菌粉治療劑量越大,治療時間越長,CD4+/CD8+比值趨于正常。D組靜脈血中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均較B組上升(P0.01,P0.05)。5.BALF中T淋巴細(xì)胞亞群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+):第1、3周時,C1、C2、C3組BALF中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平較B組上升(P0.01,P0.05),蟲草菌粉治療劑量越大,治療時間越長,CD4+/CD8+比值趨于正常。D組BALF中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+較B組上升(P0.01,P0.05)。6.肺組織中α1-AT:C組與B組比較,C(低、中、高劑量)組肺組織中α1-AT表達(dá)明顯高于B組有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),B組與D組比較無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:蟲草菌粉對PQ中毒引起的急性肺損傷有較好的治療作用,可清除氧自由基,提高機(jī)體抗氧化損傷、抑制脂質(zhì)過氧化,并可促進(jìn)α1-AT表達(dá),平衡抗胰蛋白酶與蛋白酶水平,且提高CD3+、CD4+水平,改善CD4+/CD8+比值,調(diào)節(jié)免疫,從而減輕PQ中毒引起的肺組織損傷。
【學(xué)位單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2017
【中圖分類】：R595.4
【部分圖文】：

療劑量越大，下降越明顯 35天前C1組與C3組比較，有明顯差異，C3組MDA下降明顯（P＜0.05 ,P＜0.01） 21天前C2組與C3組比較，有明顯差異，C3組MDA下降明顯 [表1，圖1]

差異（P＜0.05 ,P＜0.01），其余時間點無明顯差異，有顯著差異（P>0.05） 蟲草菌粉治療組C（低ǎ中ǎ高）組隨治療時間延長，上升約明顯，劑量越大，上升越明顯 D組與C3組比較無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05） [表2，圖2]表 2 血清 SOD 含量( x s)（U/ml）A 組（n=35） B 組（n=35） C1 組（n=35） C2 組（n=35） C3 組（n=35） D 組（n=35）1d 360.2 15.8 293.4 16.4**299.6 15.3**%

本文編號：2814585