【摘要】：目的:研究原發(fā)性肝癌合并糖尿病患者的臨床病理特征,并利用全基因組甲基化測序技術(shù),篩選原發(fā)性肝癌合并糖尿病患者與原發(fā)性肝癌非糖尿病患者差異甲基化區(qū)域(Differential Methylation Region,DMR),以期為闡明糖尿病作為風(fēng)險因素在肝癌發(fā)生發(fā)展過程中的作用,及原發(fā)性肝癌的早期診斷、預(yù)防和治療提供依據(jù)。方法:收集2016年11月-2018年8月,就診于泉州海峽醫(yī)院肝病患者的臨床信息,整理得到了40例原發(fā)性肝癌合并糖尿病患者與376例原發(fā)性肝癌非糖尿病患者的臨床資料,并對其進行回顧性分析。收集得到7例原發(fā)性肝癌合并糖尿病患者和15例原發(fā)性肝癌非糖尿病患者的血液樣本,提取全基因組DNA,通過全基因組甲基化測序分析,得到DMR,進行GO及KEGG富集分析,最后對富集結(jié)果分析并在公共數(shù)據(jù)庫中進行驗證。結(jié)果:1.分析原發(fā)性肝癌合并糖尿病組與原發(fā)性肝癌非糖尿病組臨床信息顯示年齡、BMI值、ALT水平均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),腫瘤標記物CA199有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),且原發(fā)性肝癌合并糖尿病組均高于原發(fā)性肝癌非糖尿病組。2.全基因組甲基化測序結(jié)果發(fā)現(xiàn),發(fā)生甲基化的位點主要集中CG序列上,在基因功能區(qū)域,CG序列的甲基化處于高水平狀態(tài),CGI區(qū)域甲基化水平最低;基因上下游2Kbp區(qū)域甲基化水平做統(tǒng)計,gene body區(qū)域甲基化水平最高。分析DMR在基因功能區(qū)域中的分布發(fā)現(xiàn),DMR都主要集中在內(nèi)含子區(qū)域。DMR相關(guān)基因GO及KEGG富集分析發(fā)現(xiàn),主要涉及在細胞與神經(jīng)等生物學(xué)過程及嗎啡成癮通路。3.根據(jù)富集結(jié)果篩選得到差異基因ADCY1和GNAO1,經(jīng)驗證其在肝癌組織中顯著低表達,而在肝癌組織的啟動子區(qū)域呈高甲基化水平。結(jié)論:1.糖尿病是年齡相關(guān)的疾病,聯(lián)合檢測相關(guān)指標能提高對早期原發(fā)性肝癌檢出的準確率。2.構(gòu)建了原發(fā)性肝癌合并糖尿病與原發(fā)性肝癌非糖尿病的全基因組范圍內(nèi)單堿基分辨率的DNA甲基化圖譜,以嗎啡成癮通路為突破口,為原發(fā)性肝癌與糖尿病相互作用機制以及早期診斷與預(yù)防提供了思路。3.基因ADCY1和GNAO1為研究原發(fā)性肝癌與糖尿病的關(guān)系提供可能,同時為發(fā)現(xiàn)肝癌發(fā)生發(fā)展相關(guān)的生物標志物以及肝癌的治療提供新靶點。
【學(xué)位授予單位】：華僑大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R735.7;R587.1
【圖文】：

DNA文庫構(gòu)建流程圖

測序過程圖

甲基化測序分析流程圖

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 魏礦榮;彭俠彪;梁智恒;岑惠珊;;全球肝癌流行概況[J];中國腫瘤;2015年08期

2 程朋;李運明;朱亞杰;李焱;陳滔;劉明昌;蘇曉妹;譚勇;杜敏;呼永和;張濤;;糖尿病住院患者肝癌患病率調(diào)查分析[J];中國腫瘤;2015年05期

3 呂桂帥;陳磊;王紅陽;;我國肝癌研究的現(xiàn)狀與前景[J];生命科學(xué);2015年03期

4 張慧;張慶;黃麗虹;;糖尿病參與肝癌發(fā)病機制的研究進展[J];中華老年醫(yī)學(xué)雜志;2014年09期

5 張思佳;喬虹;;DNA甲基化與人類糖尿病的研究進展[J];中國老年學(xué)雜志;2014年10期

6 徐燃;繆曉東;;原發(fā)性肝癌的遺傳流行病學(xué)探討[J];中國處方藥;2014年04期

7 莊志杰;曾斌;;DNA甲基化與肝癌[J];現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生;2014年01期

8 李洪波;李龍;張書明;梁峰;崔周軍;張學(xué)功;;糖尿病與肝癌的相關(guān)性研究進展[J];中華臨床醫(yī)師雜志(電子版);2013年15期

9 楊建功;何小峰;黃兵;張會愛;;血清GGT水平與GGT/ALT和AST/ALT比值聯(lián)合分析對AFP陽性乙型肝炎與肝癌的鑒別診斷價值[J];中華臨床醫(yī)師雜志(電子版);2012年24期

10 程宏文;駱明蓮;江濤;青亮;冉體斌;何苗;;艾迪注射液聯(lián)合FOLFOX4化療治療原發(fā)性肝癌療效觀察[J];現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué);2012年04期

本文編號：2792709