【摘要】：目的Hippo信號(hào)通路(Hippo signaling pathway)中主要成員哺乳動(dòng)物不育系20樣激酶1(Mammalian sterile line 20-like kinase 1)、YES相關(guān)蛋白(Yes-associated protein,YAP)和具有PDZ結(jié)合基序的轉(zhuǎn)錄輔激活物(Transcriptional coactivator with PDZ-binding motif,TAZ)在自身免疫性疾病如類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis,RA)的發(fā)病機(jī)制中可能起重要作用,本研究旨在分析MST1在RA患者血清中的表達(dá)水平,探討RA患者血清MST1水平的臨床意義及診斷價(jià)值。方法納入34例RA患者,20例系統(tǒng)性紅斑狼瘡(Systemic lupus erythematosus,SLE)患者,20例健康體檢者,共收集74例納入者血清,采用酶聯(lián)免疫吸附法分別檢測(cè)RA患者組及對(duì)照組血清MST1水平、血清YAP水平、血清TAZ水平,并記錄RA患者收集血清同時(shí)期的臨床指標(biāo),比較RA患者與對(duì)照組血清MST1、YAP、TAZ表達(dá)水平的差異,分析RA患者血清MST1水平與骨侵蝕程度、疾病活動(dòng)度評(píng)分(DAS28評(píng)分)、紅細(xì)胞沉降率(ESR)、C反應(yīng)蛋白(CRP)、抗環(huán)瓜氨酸肽抗體(抗CCP抗體)、類(lèi)風(fēng)濕因子(RF-IgA、RF-IgM、RF-IgG)的相關(guān)性。采用ROC曲線分析血清MST1水平在RA中的診斷價(jià)值。結(jié)果1.RA患者組血清MST1水平明顯低于SLE患者組[(5164.98±3547.23)pg/ml)VS(9790.5018±2445.19)pg/ml,P0.001],RA患者組血清MST1水平明顯低于健康對(duì)照組[(5164.98±3547.23)pg/ml)VS(10238.99±1658.33)pg/ml,P0.001],差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。SLE患者組與健康對(duì)照組血清MST1水平無(wú)明顯差異[(9790.5018±2445.19)pg/ml)VS(10238.99±1658.33)pg/ml,P=0.508]。2.RA患者組血清YAP水平與SLE患者組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異[(0.1242±0.07292)ng/ml VS(0.1368±0.0885)ng/ml),P=0.4590.05],RA患者組血清YAP水平與健康對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異[(0.1242±0.07292)ng/ml VS(0.1238±0.0635)ng/ml),P=0.9870.05]。3.RA患者組血清TAZ水平與SLE患者組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異[(0.5218±0.05424)ng/ml VS(0.5038±0.03887)ng/ml),P=0.2660.05],RA患者組血清TAZ水平與健康對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異[(0.5218±0.05424)ng/ml VS(0.4972±0.00709)ng/ml,P=0.0590.05]。4.RA患者組血清MST1水平與骨侵蝕程度呈負(fù)相關(guān)性(r=-0.5396,P=0.0010.01),與DAS28評(píng)分呈負(fù)相關(guān)性(r=-0.3773,P=0.02780.05),與ESR無(wú)相關(guān)性(P=0.420.04),與CRP無(wú)相關(guān)性(P=0.55290.05),與抗CCP抗體無(wú)相關(guān)性(P=0.73210.05),與RF-IgA無(wú)相關(guān)性(P=0.66800.05),與RF-IgM無(wú)相關(guān)性(P=0.86390.05),與RF-IgG無(wú)相關(guān)性(P=0.93860.05)。5.血清MST1水平診斷RA的ROC曲線下面積為0.860[95%CI=0.757-0.964],當(dāng)MST1濃度為1028pg/ml時(shí),其診斷RA的敏感度為60%,特異度為88.2%。結(jié)論1.與對(duì)照組相比,RA患者血清MST1水平明顯降低,說(shuō)明MST1的表達(dá)水平與RA的發(fā)病機(jī)制有關(guān);2.RA患者組血清MST1水平與骨侵蝕程度呈負(fù)相關(guān),與DAS28評(píng)分呈負(fù)相關(guān),說(shuō)明MST1參與RA骨破壞的發(fā)生發(fā)展,并與RA的疾病活動(dòng)有關(guān);3.血清MST1水平可能作為診斷RA的新指標(biāo)。
【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類(lèi)號(hào)】：R593.22
【圖文】：

蘭州大學(xué)碩士學(xué)位論文 血清 MST1 激酶水平在類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎中的表達(dá)及臨床研究（6）洗板：重復(fù)步驟 4，共洗板 5 次；（7）加 TMB 顯色液：加入 100ulTMB 顯色液至每孔，貼封口膜后至 37℃孵育箱中避光孵育 15-30 分鐘；（8）加終止液：加入 100ul 終止液至每孔終止反應(yīng)；（9）測(cè)定：將酶標(biāo)儀調(diào)至 450nm 讀取每孔 OD 值。

圖 1 實(shí)驗(yàn)原理示意圖圖 2 標(biāo)準(zhǔn)品配制示意圖2.2.6 血清 YAP 水平測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)品配制：同圖 2試劑配制：（1）檢測(cè)液 A/B：分別將檢測(cè)液 A 和檢測(cè)液 B 以 1:100 用 A 稀釋液、B 稀釋液稀釋。本試驗(yàn)共計(jì)需用 86 孔，即分別加入檢測(cè)液 A86ul，并加入 8514ul 檢測(cè)液A 稀釋液后混勻。檢測(cè)液 B 以同理稀釋至相同容積。（2）Wash Buffer 配制：將 30ml 25X Wash Buffer 濃縮液與 720ml 蒸餾水混合。（3）TMB 顯色液：采用無(wú)菌技術(shù)移取所需要的 TMB 顯色液至每孔中。

標(biāo)準(zhǔn)品 7 孔、空白孔 1 孔及待測(cè)樣品孔。分別將 100ul 以封口膜后放至 37℃孵育箱中孵育 120 分鐘；液 A：棄去以上每孔液體，甩干，勿洗板，每孔加檢測(cè)液 A勻，37℃孵育 60 分鐘；棄去以上液體，洗板 3 次；液 B：每孔加檢測(cè)液 B 100ul，貼封口膜后 37℃孵育 60 分鐘重復(fù)步驟 3，洗板 5 次； 顯色液：加入 90ul TMB 顯色液至每孔，貼封口膜后至 育 10-20 分鐘；液：加入 50ul 終止液至每孔終止反應(yīng)；酶標(biāo)儀 450nm 讀取每孔 OD 值。 TAZ 水平測(cè)定及檢測(cè)試劑配制同 2.2.6.驟見(jiàn)圖 3

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10 上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬岳陽(yáng)中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院風(fēng)濕科醫(yī)生 侯佳奇 薛鸞;類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎：一種致殘率很高的風(fēng)濕病[N];文匯報(bào);2016年

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本文編號(hào)：2792475