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STZ誘導(dǎo)的T1DM高血糖小鼠并發(fā)感染中免疫細(xì)胞亞群的作用研究

發(fā)布時(shí)間:2020-07-14 23:44
【摘要】:2、TIDM高血糖小鼠感染鼠傷寒沙門氏菌,監(jiān)測(cè)體重及死亡率變化。流式細(xì)胞術(shù)分析SP、LP、MLN中免疫細(xì)胞亞群變化。檢測(cè)血清中IL-6、IFN-y水平。對(duì)小腸組織進(jìn)行HE染色,觀察組織中病理變化。結(jié)果:1、腹腔注射STZ后第15天,小鼠脾臟中漿細(xì)胞樣DC(pDC)、淋巴系DC(LyDC)和髓系DC(MyDC)的比例降低,中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞的比例增高。胸腺的MyDC、LyDC和pDC L比例降低。LP中DC、巨噬細(xì)胞比例降低,嗜酸性細(xì)胞的比例升高。SLN的遷移DC、定居DC、pDC、單核細(xì)胞和中性粒細(xì)胞比例降低。MLN的遷移DC、定居DC和pDCL比例降低。T1DM高血糖小鼠的CD4+FoxP3+Treg L比例明顯增高,血清中CHOL、TG、ALT、IFN-γ和IL-6升高。2、T1DM高血糖小鼠感染鼠傷寒沙門氏菌三天后SP中DC、NK細(xì)胞的比例降低,中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞的比例增高,CD4+FoxP3+Treg比例降低。LP中DC、單核細(xì)胞、B細(xì)胞比例降低,中性粒細(xì)胞、CD4+FoxP3+Treg比例增高,MLN中的CD4+FoxP3+Treg比例降低。T1DM小鼠感染鼠傷寒沙門氏菌后,IL-6濃度比正常對(duì)照小鼠感染鼠傷寒沙門氏菌后增高。HE染色發(fā)現(xiàn),T1DM高血糖小鼠感染鼠傷寒沙門氏菌后腸道組織存在明顯的炎癥浸潤(rùn)。結(jié)論:1、T1DM高血糖小鼠SP、Thymus、LP、MLN、SLN中各DC亞群比例均降低,中性粒細(xì)胞增加,機(jī)體處于炎性及免疫抑制狀態(tài),提示DC亞群的缺失與高血糖具有相關(guān)性。T1DM高血糖小鼠的胸腺、SP、MLN、SLN的CD4+FoxP3+Treg比例增高,提示CD4+FoxP3+Treg在T1DM發(fā)病中起重要作用。2、T1DM高血糖小鼠在感染鼠傷寒沙門氏菌后SP、LP中DC比例均降低,中性粒細(xì)胞的比例增高,高血糖可加重感染進(jìn)展。SP中的CD4+FoxP3+Treg 比例降低,Helios+Treg降低,說(shuō)明Treg降低是因?yàn)槠湓鲋呈艿搅艘种?這導(dǎo)致了系統(tǒng)性感染加重。LP的CD4+FoxP3STreg 比例增高,是因?yàn)長(zhǎng)P中CD103++CD11b+DC刺激了抗原特異的CD4+T細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)其分化為FoxP3+Treg。
【學(xué)位授予單位】:南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:R587.2
【圖文】:

體重,胰島,小鼠


脈注射STZ后3天進(jìn)行血糖濃度檢測(cè),發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組小鼠血糖與對(duì)照組相比明顯逡逑增高。同時(shí)連續(xù)記錄小鼠血糖以及體重的變化情況,發(fā)現(xiàn)STZ注射后可以使小逡逑鼠的體重比正常對(duì)照組明顯減低,STZ注射使血糖明顯升高(圖1_1A)。與臨床逡逑常見(jiàn)癥狀類似,STZ注射后的高血糖小鼠出現(xiàn)了多飲、多尿等癥狀,這就說(shuō)明逡逑我們的實(shí)驗(yàn)在STZ注射后誘導(dǎo)小鼠發(fā)生了邋T1DM。同時(shí),我們對(duì)小鼠胰腺進(jìn)行逡逑HE染色發(fā)現(xiàn),正常小鼠的胰島散在,呈圓形或卵圓形,形態(tài)比較規(guī)則,胰島細(xì)逡逑胞呈圓形,胞漿豐富,核圓居中。與正常組相比,糖尿病小鼠的胰島萎縮,表逡逑現(xiàn)為數(shù)量減少,體積變小,細(xì)胞核密度增加,胞漿減少(圖1-1B)。逡逑40-|邐24-逡逑e邐Naive逡逑j:邐:邋。哄义希颠姡保村义线姡边姡边姡边姡边婂澹保玻蔬姡边姡边姡边姡边婂义蠄D1-1A邋STZ處理使C57BL/6小鼠血糖升Sh、體重降低逡逑Figl-1邋八邋STZ邋induces邋hyperglycemia邋and邋weight

病理變化,小鼠,高血糖,氨基轉(zhuǎn)移酶


3.2邐T1邋DM高血糖小鼠ALT、AST變化情況逡逑C57BL/6小鼠腹腔注射STZ后第15天,我們?nèi)⊥庵苎蠓蛛x血清,生化分逡逑析儀上機(jī)檢測(cè)正常對(duì)照組小鼠和高血糖小鼠的谷氨酰氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)和天門逡逑冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)變化,發(fā)現(xiàn)高血糖組小鼠的ALT與對(duì)照組小鼠相比逡逑明顯增高(圖1-2),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001),而AST雖然略有升高但差異并逡逑無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。逡逑400-|逡逑圈邋Naive逡逑300-邐四犯逡逑.邐***邐網(wǎng)逡逑=20°-邐—邐_邐^逡逑■mm逡逑pnpg邐1111邐i:w逡逑1°°-邋m邋ta邋m逡逑J邋m邋bl邋m逡逑

免疫細(xì)胞,群變化,標(biāo)準(zhǔn)差,小鼠


3.6邋T1DM高血糖小鼠SLN、MLN中免疫細(xì)胞及其亞群變化情況逡逑我們?nèi)⌒∈蟮钠つw引流淋巴結(jié)制備單細(xì)胞懸液進(jìn)行免疫熒光抗體染色,上逡逑流式細(xì)胞儀分析各免疫細(xì)胞及其亞群變化。根據(jù)CD1邋lc和丨A/IE的熒光強(qiáng)度的逡逑表達(dá)將邋CDllchiIA/IEint邋的定義為定居性邋DC邋(ResidentDC)和邋CDllcintIA/IEhiW逡逑遷移性DC邋(Migratory邋DC)以及漿細(xì)胞樣DC邋(pDC)。依據(jù)Ly6C和CDl邋lb的逡逑表達(dá)可分為兩群細(xì)胞,分別為Ly6CwCDllb+的單核細(xì)胞、Ly6CmlCDllb+的中性逡逑粒細(xì)胞。我們發(fā)現(xiàn),高血糖小鼠與正常對(duì)照組小鼠相比,SLN的中性粒細(xì)胞、逡逑單核細(xì)胞、Migratory邋DC、Resident邋DC和pDC的比例均明顯降低(圖丨-7)。于逡逑27逡逑

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本文編號(hào):2755657

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