【摘要】：目的:研究表明,miR-103與2型糖尿病胰島素抵抗及糖代謝密切相關(guān)。循環(huán)SFRP4水平是獨(dú)立于其它已知糖尿病風(fēng)險(xiǎn)因子的糖尿病超前診斷標(biāo)志物。最近研究揭示,血小板富含miR-103b,然而其具體分子調(diào)控機(jī)理仍不清楚。本研究擬查明miR-103b對(duì)SFRP4靶向調(diào)控關(guān)系,深入調(diào)查糖尿病前期人群及糖尿病患者血小板miR-103b及其靶標(biāo)SFRP4的水平變化及作用機(jī)制,探討血小板miR-103b作為糖尿病前期潛在分子標(biāo)記物的臨床意義。方法:收集2014年10月~2016年6月我校附屬醫(yī)院就診人群,分組為糖尿病前期人群組(pre-DM,n=48),糖尿病無(wú)并發(fā)癥患者(NCDM,n=47)以及正常健康人群(n=50)的外周血樣。利用MACS免疫磁珠分離純化制備去白細(xì)胞血小板樣本;qRT-PCR檢測(cè)血小板miR-103b及SFRP4 mRNA水平變化;ELISA檢測(cè)血小板SFRP4蛋白水平;結(jié)合生物信息學(xué)分析和熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)研究miR-103b對(duì)SFRP4的靶向調(diào)控作用,進(jìn)而體外細(xì)胞轉(zhuǎn)染miR-103b模擬物(mimics)、miR-103b抑制劑(inhibitors)及相應(yīng)陰性對(duì)照(NC)驗(yàn)證靶向調(diào)控關(guān)系;Person分析血小板miR-103b和SFRP4水平的臨床相關(guān)性,并且應(yīng)用受試者工作特征(ROC)曲線評(píng)估血小板miR-103b對(duì)糖尿病前期的診斷意義。結(jié)果:miR-103家族成員具有高度保守性,其中miR-103b定位于人染色體5q34。并且,miR-103b能夠直接結(jié)合SFRP4 mRNA 3'-UTR區(qū)從而直接靶向負(fù)調(diào)控SFRP4表達(dá)。miR-103b在pre-DM人群血小板中表達(dá)水平顯著低于Control組,并且NCDM組血小板miR-103b水平也顯著低于Control組。相對(duì)的,pre-DM組和NCDM組血小板SFRP4 mRNA和蛋白水平則顯著高于Control組。Person相關(guān)性分析結(jié)果發(fā)現(xiàn)各組中血小板SFRP4與miR-103b表達(dá)水平呈顯著負(fù)相關(guān)性。ROC曲線分析結(jié)果顯示,血小板miR-103b水平鑒定pre-DM人群的曲線下面積(AUC)及其95%置信區(qū)間(CI)為0.934(95%CI:0.878~0.990),臨界值為1.794,靈敏度和特異度分別為90.0%和89.4%。結(jié)論:血小板miR-103b鑒別2型糖尿病前期人群(pre-DM)具有高度敏感性和特異性,臨床診斷價(jià)值較高,提示血小板miR-103b是潛在的糖尿病早期臨床診斷標(biāo)記物。
【學(xué)位授予單位】：西南醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R587.1

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本文編號(hào)：2747234