發(fā)布時間：2020-06-19 13:29

【摘要】：目的:本研究使用脂肪代謝障礙轉基因小鼠為研究對象,依據之前觀察的脂肪分化體內外差異,即原本發(fā)育障礙的脂肪組織中提取的血管基質細胞離體之后能表現(xiàn)出脂肪生成能力的恢復,從小鼠代謝表征,脂肪組織特性,脂肪細胞族群特點為立足點,明確轉基因小鼠代謝表征與脂肪組織內環(huán)境特性,尋找體內外脂肪分化調控的重要影響因素,通過在體驗證來證實差異。方法:繁育脂肪發(fā)育障礙小鼠(aP2-nSREBP1c)至成年(12至14周齡)測定其血液主要代謝物血糖、血脂、膽固醇、脂蛋白等血液指標在性別,進食條件下的差異;測定其脂肪含量,明確脂肪分布情況;病理學觀察發(fā)育中的脂肪特點;流式細胞術測定脂肪組織祖干細胞族群特性;測定小鼠機體脂肪潛在脂肪抑制因子的表達情況。適齡aP2-nSREBP1c小鼠(約12周齡)提取其腹股溝皮下脂肪,驗證其離體之后的脂肪生成能力;建立穩(wěn)定培養(yǎng)的脂肪源性干細胞,通過共培養(yǎng)體系觀察其旁分泌網絡對于脂肪生成的影響。從體內外的潛在成脂抑制因素中確定潛在的重要影響因子,通過通路抑制劑在體干預小鼠,觀察其代謝表征,脂肪組織特性與成脂基因的變化,來評估干預措施的有效性,用以驗證抑制因子的作用地位。結果:脂肪組織特異性過表達nSREBP1c的轉基因小鼠正常脂肪組織功能障礙,脂質異位沉積嚴重,機體存在明顯的糖脂代謝紊亂。小鼠脂肪組織代謝異常從幼齡開始,成年后明顯影響機體代謝表征。特異性過表達nSREBP1c的脂肪組織由于抑制脂肪生成的細胞族群的支配作用,成脂分化趨向上趨于保守。脂肪組織內環(huán)境中,轉化生長因子β(TGFβ)信號的有明顯上調。離體之后,特異性過表達nSREBP1c的血管基質細胞和脂肪源性干細胞的分化保守性喪失,脂肪生成能力得到恢復,這些細胞的旁分泌作用下調了共培養(yǎng)體系中3T3-L1細胞的TGFβ通路的傳導信號,并上調脂肪生成的相關基因。通過在體注射TβR抑制劑,可以發(fā)現(xiàn)抑制TGFβ通路能部分影響小鼠的脂代謝異常,通過上調脂肪組織成脂分化相關基因,下調分化抑制因子,改變脂肪組織的形態(tài)和功能來緩解機體的代謝異常。結論:脂肪組織特異性過表達nSREBP1c下,其體內環(huán)境中主管抑制脂肪生成的細胞族群處于支配地位,與上調的TGFβ信號一同構成脂肪生成的抑制環(huán)境。離體之后的脂肪血管基質細胞不再受到內環(huán)境調控,喪失分化保守性趨向,脂肪源性干細胞的旁分泌網絡能下調TGFβ通路的信號傳導。在體抑制TGFβ通路能夠直接影響小鼠脂代謝,恢復脂肪功能,一定程度上改善代謝紊亂。綜上所述,TGFβ通路在脂肪組織特異性過表達nSREBP1c所致的脂肪分化體內外差異中有重要的調控作用。
【學位授予單位】：廣東藥科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R589.2
【圖文】：

19圖 2-1 aP2-nSREBP1c 小鼠的體征指標A.雄鼠體重 B.雌鼠體重 C.雄鼠臟器重量 D 雌鼠臟器重量. E.雄鼠臟器比值 F.雌鼠臟器比值注：每組 4 只，與同窩野生型對照比較，*P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.001。Fig.2-1A. Male mouce body weight B. Female mouce body weight C. Male mouce organ weight DFemale mouse organ weight. E. Male mouse organ weight ratio F. Female mouse organ weight ratioNote: Compared with the WT group,*P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.001, n=4 per group.實驗結果顯示，生長過程中，aP2-nSREBP1c 轉基因小鼠的體重增長比同窩野生

廣東藥科大學碩士研究生學位論文型小鼠明顯；aP2-nSREBP1c 轉基因小鼠重要代謝器官（肝臟，腎臟等）重量較其同窩野生型更重，附睪（雄）性腺周圍（雌）明顯缺乏，腹股溝皮下脂肪重量略輕，棕色脂肪（BAT），胰腺，肝臟存在明顯的脂質沉積。略有以上實驗結果表明，aP2-nSREBP1c 轉基因小鼠表現(xiàn)出明顯的脂肪發(fā)育障礙，伴有明顯的脂質異位沉積。2.4.2 aP2-nSREBP1c 小鼠的體脂特征

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本文編號：2720860