【摘要】：目的:本研究使用脂肪代謝障礙轉(zhuǎn)基因小鼠為研究對象,依據(jù)之前觀察的脂肪分化體內(nèi)外差異,即原本發(fā)育障礙的脂肪組織中提取的血管基質(zhì)細(xì)胞離體之后能表現(xiàn)出脂肪生成能力的恢復(fù),從小鼠代謝表征,脂肪組織特性,脂肪細(xì)胞族群特點(diǎn)為立足點(diǎn),明確轉(zhuǎn)基因小鼠代謝表征與脂肪組織內(nèi)環(huán)境特性,尋找體內(nèi)外脂肪分化調(diào)控的重要影響因素,通過在體驗(yàn)證來證實(shí)差異。方法:繁育脂肪發(fā)育障礙小鼠(aP2-nSREBP1c)至成年(12至14周齡)測定其血液主要代謝物血糖、血脂、膽固醇、脂蛋白等血液指標(biāo)在性別,進(jìn)食條件下的差異;測定其脂肪含量,明確脂肪分布情況;病理學(xué)觀察發(fā)育中的脂肪特點(diǎn);流式細(xì)胞術(shù)測定脂肪組織祖干細(xì)胞族群特性;測定小鼠機(jī)體脂肪潛在脂肪抑制因子的表達(dá)情況。適齡aP2-nSREBP1c小鼠(約12周齡)提取其腹股溝皮下脂肪,驗(yàn)證其離體之后的脂肪生成能力;建立穩(wěn)定培養(yǎng)的脂肪源性干細(xì)胞,通過共培養(yǎng)體系觀察其旁分泌網(wǎng)絡(luò)對于脂肪生成的影響。從體內(nèi)外的潛在成脂抑制因素中確定潛在的重要影響因子,通過通路抑制劑在體干預(yù)小鼠,觀察其代謝表征,脂肪組織特性與成脂基因的變化,來評估干預(yù)措施的有效性,用以驗(yàn)證抑制因子的作用地位。結(jié)果:脂肪組織特異性過表達(dá)nSREBP1c的轉(zhuǎn)基因小鼠正常脂肪組織功能障礙,脂質(zhì)異位沉積嚴(yán)重,機(jī)體存在明顯的糖脂代謝紊亂。小鼠脂肪組織代謝異常從幼齡開始,成年后明顯影響機(jī)體代謝表征。特異性過表達(dá)nSREBP1c的脂肪組織由于抑制脂肪生成的細(xì)胞族群的支配作用,成脂分化趨向上趨于保守。脂肪組織內(nèi)環(huán)境中,轉(zhuǎn)化生長因子β(TGFβ)信號的有明顯上調(diào)。離體之后,特異性過表達(dá)nSREBP1c的血管基質(zhì)細(xì)胞和脂肪源性干細(xì)胞的分化保守性喪失,脂肪生成能力得到恢復(fù),這些細(xì)胞的旁分泌作用下調(diào)了共培養(yǎng)體系中3T3-L1細(xì)胞的TGFβ通路的傳導(dǎo)信號,并上調(diào)脂肪生成的相關(guān)基因。通過在體注射TβR抑制劑,可以發(fā)現(xiàn)抑制TGFβ通路能部分影響小鼠的脂代謝異常,通過上調(diào)脂肪組織成脂分化相關(guān)基因,下調(diào)分化抑制因子,改變脂肪組織的形態(tài)和功能來緩解機(jī)體的代謝異常。結(jié)論:脂肪組織特異性過表達(dá)nSREBP1c下,其體內(nèi)環(huán)境中主管抑制脂肪生成的細(xì)胞族群處于支配地位,與上調(diào)的TGFβ信號一同構(gòu)成脂肪生成的抑制環(huán)境。離體之后的脂肪血管基質(zhì)細(xì)胞不再受到內(nèi)環(huán)境調(diào)控,喪失分化保守性趨向,脂肪源性干細(xì)胞的旁分泌網(wǎng)絡(luò)能下調(diào)TGFβ通路的信號傳導(dǎo)。在體抑制TGFβ通路能夠直接影響小鼠脂代謝,恢復(fù)脂肪功能,一定程度上改善代謝紊亂。綜上所述,TGFβ通路在脂肪組織特異性過表達(dá)nSREBP1c所致的脂肪分化體內(nèi)外差異中有重要的調(diào)控作用。
【學(xué)位授予單位】：廣東藥科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R589.2
【圖文】：

19圖 2-1 aP2-nSREBP1c 小鼠的體征指標(biāo)A.雄鼠體重 B.雌鼠體重 C.雄鼠臟器重量 D 雌鼠臟器重量. E.雄鼠臟器比值 F.雌鼠臟器比值注：每組 4 只，與同窩野生型對照比較，*P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.001。Fig.2-1A. Male mouce body weight B. Female mouce body weight C. Male mouce organ weight DFemale mouse organ weight. E. Male mouse organ weight ratio F. Female mouse organ weight ratioNote: Compared with the WT group,*P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.001, n=4 per group.實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，生長過程中，aP2-nSREBP1c 轉(zhuǎn)基因小鼠的體重增長比同窩野生

廣東藥科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文型小鼠明顯；aP2-nSREBP1c 轉(zhuǎn)基因小鼠重要代謝器官（肝臟，腎臟等）重量較其同窩野生型更重，附睪（雄）性腺周圍（雌）明顯缺乏，腹股溝皮下脂肪重量略輕，棕色脂肪（BAT），胰腺，肝臟存在明顯的脂質(zhì)沉積。略有以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，aP2-nSREBP1c 轉(zhuǎn)基因小鼠表現(xiàn)出明顯的脂肪發(fā)育障礙，伴有明顯的脂質(zhì)異位沉積。2.4.2 aP2-nSREBP1c 小鼠的體脂特征

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本文編號：2720860