【摘要】：目的:1、建立糖尿病大鼠大血管病變模型,觀察其胸主動脈組織自噬(Autophagy)相關(guān)蛋白的表達(dá)情況。2、西格列汀(Sitagliptin)干預(yù)糖尿病大鼠大血管病變模型,觀察其胸主動脈組織自噬活性的變化并探討其可能作用機(jī)制。方法:隨機(jī)選取58只5周齡(體重約180g-200g)的SD大鼠,適應(yīng)性喂養(yǎng)1周,隨機(jī)分為正常對照組(A組,n=10)和模型組(n=48)。A組喂以普通飼料,模型組喂以高脂高糖飼料飲食。4周后,稱體重(BW),測空腹血糖(FBG)、胰島素(FINS)水平、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平。將造模組禁食12小時后以35mg/kg劑量STZ腹腔注射給藥,A組腹腔注射等量的緩沖液,72小時后,測隨機(jī)血糖(BS)連續(xù)3次≥16.7 mmol/L者確定為糖尿病大鼠(3只未建模成功)。造模成功的糖尿病大鼠繼續(xù)予以高脂飼料喂養(yǎng),并隨機(jī)分為5組,B組:未干預(yù)組(n=9),C組:西格列汀5mg/kg·d組(n=9),D組:西格列汀1mg/kg·d組(n=9),E組:西格列汀5mg/kg·d組+CXCR4特異性抑制劑AMD3100 1mg/kg·d(n=9),F組:西格列汀1mg/kg·d組+CXCR4特異性抑制劑AMD3100 1mg/kg·d(n=9),C、D、E、F組每日9點(diǎn)以西格列汀溶于生理鹽水灌胃,A、B組予以等量生理鹽水灌胃,共干預(yù)8周,E、F組自實(shí)驗(yàn)第8周起每日腹腔注射AMD3100 1mg/kg·d。給藥期間,B、C、F組各死亡1只老鼠。實(shí)驗(yàn)第12周末稱體重后處死大鼠,心尖處取血3-4ml用于檢測血生化指標(biāo)、血清基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1α(Stromal cell-derived factor-1,SDF-1α)水平,取各組大鼠胸主動脈段,一部分用于HE染色,一部分用于免疫組織化學(xué)染色,一部分用于Western-blot檢測LC3-II(Microtubuleassoeiated protein 1 light hain 3-II)、P62、Beclin-1、Class III PI3K(Class III Phosphoinositide 3-kinase)、CXCR4蛋白表達(dá)。結(jié)果:1、4周末,各大鼠BW及生化指標(biāo)比較,與A組相比,造模組大鼠BW、FBG、FINS、HOMA-IR、TC、TG、LDL-C較正常組明顯增高。2、12周末,各大鼠FBG、TC、TG、LDL-C指標(biāo)比較:與A組相比較,B組、C組、D組、E組、F組FBG、TC、TG、LDL-C水平均增高,C組與B、D組比較,FBG、TC、TG、LDL-C水平有下降,與F組比較,E組FBG、TC、TG、LDL-C水平有下降,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。3、12周末各組大鼠血清SDF-1α水平、胸主動脈組織CXCR4及自噬相關(guān)蛋白表達(dá)比較:與B組相比,C、D組血清SDF-1α、LC3-II、CXCR4、Beclin-1、Class III PI3K蛋白表達(dá)增加,P62表達(dá)減少,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),而C組與D組相比較,SDF-1α、LC3-II、CXCR4、Beclin-1、Class III PI3K蛋白表達(dá)增高更顯著,P62表達(dá)減少更顯著,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。E組與C組比較,F組與D組比較,血清SDF-1α、LC3-II、CXCR4、Beclin-1、Class III PI3K蛋白表達(dá)增加,P62表達(dá)減少,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),E組與F組差異無明顯統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論:1、STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠胸主動脈組織中LC3-II、Beclin-1、Class III PI3K表達(dá)下調(diào),P62蛋白表達(dá)上調(diào),自噬活性下降。2、西格列汀可能通過激活SDF-1α/CXCR4生物軸以調(diào)控自噬,從而進(jìn)一步延緩糖尿病大鼠大血管病變。
【圖文】：

表3 4周后兩組大鼠血脂的比較（ x ±s）例數(shù) TG(mmol/L) TC(mmol/L) LDL-C(mmol/L)10 0.70±0.13 1.78±0.19 0.35±0.0410 0.97±0.13a3.01±0.14a0.50±0.12a組（正常對照組）比較，，P＜0.05

圖 1 4 周后兩組大鼠 BW 比較（ x ±s，g）注：Control group:正常對照組；Model group:模型組注：a:與 A 組（正常對照組）比較，P＜0.05a
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R587.2

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2700640