【摘要】：目的:探討2型糖尿病大鼠模型的建模方法;討論2型糖尿病與腸道組織中鈉-葡萄糖協(xié)同轉運蛋白1(SGLT1)表達之間的關系;對比阿卡波糖(拜唐蘋)與格列美脲調節(jié)2型糖尿病大鼠的血糖水平,以及對大鼠空腸組織中SGLT1蛋白表達的影響;討論阿卡波糖與2型糖尿病模型大鼠空腸組織中SGLT1蛋白表達之間的關系。方法:將40只SPF級成年的雄性SD大鼠正常喂養(yǎng)一周后,采取隨機數(shù)法分成五組:正常對照組、正常對照+拜唐蘋干預組、2型糖尿病模型對照組、2型糖尿病模型+拜唐蘋干預組、2型糖尿病模型+格列美脲干預組,每組8只大鼠。2型糖尿病模型對照組及2型糖尿病模型藥物干預組的大鼠均進行高糖飲水配合高脂乳劑連續(xù)灌胃4周,以誘導大鼠發(fā)生胰島素抵抗,正常組則給以正常飲水以及相等劑量的生理鹽水連續(xù)灌胃。隨后2型糖尿病模型對照組及2型糖尿病模型藥物干預組的大鼠均采取一次性腹部注入小劑量的鏈脲佐菌素(STZ),用于2型糖尿病大鼠模型的建立。三天后,測量大鼠的隨機血糖,數(shù)值超過16.7mmol/l,則判斷2型糖尿病大鼠成功建立。建模成功后,藥物干預組大鼠分別進行拜唐蘋與格列美脲連續(xù)藥物灌胃干預4周;對照組則給以相等劑量的生理鹽水。隨時觀察大鼠的基本情況,定期測量大鼠的體重、血糖等水平。干預完成后處死大鼠,并采用心臟采血法留取大鼠的血液標本,使用離心機分離血清,并保存?zhèn)溆�。同時留取各組大鼠的腸道組織,于4%多聚甲醛溶液與液氮中各保存一份,用于后期實驗使用。最后,運用western blot實驗方法檢測各組大鼠空腸組織中SGLT1蛋白的表達情況,qRT-PCR和免疫組化實驗方法分別檢測大鼠空腸組織中SGLT1 mRNA的表達水平。結果:1、與正常對照組大鼠相比,2型糖尿病模型對照組大鼠的血糖明顯升高78%,并顯著上調空腸組織中SGLT1基因和蛋白的表達,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。2、藥物干預4周后,與2型糖尿病模型對照組大鼠相比,2型糖尿病模型+拜唐蘋干預組、2型糖尿病模型+格列美脲干預組均能降低2型糖尿病大鼠的血糖,拜唐蘋干預組降低46%,格列美脲干預組降低24%;2型糖尿病模型+拜唐蘋干預組、2型糖尿病模型+格列美脲干預組均能夠下調大鼠空腸組織中SGLT1基因和蛋白的表達(P0.05),在相同血糖水平下,比較拜唐蘋和格列美脲的干預效果顯示,拜唐蘋對2型糖尿病大鼠腸道組織中SGLT1蛋白表達的影響更顯著。結論:1、對SD大鼠給以高脂乳劑灌胃和高糖飲水聯(lián)合一次性腹腔內注入小劑量STZ可以成功建立2型糖尿病大鼠模型。與正常對照組相比,2型糖尿病模型對照組大鼠的血糖明顯上升。2、2型糖尿病模型對照組大鼠空腸組織中SGLT1基因和蛋白表達水平明顯增加。SGLT1所介導的腸道葡萄糖吸收加速可能是2型糖尿病患者病情發(fā)展的原因之一。3、拜唐蘋、格列美脲藥物對2型糖尿病模型大鼠均有降低血糖的治療作用,并且對2型糖尿病模型大鼠空腸組織中SGLT1蛋白的表達有一定的影響,兩組均能下調2型糖尿病模型大鼠空腸組織中SGLT1基因和蛋白的表達。在相同血糖水平下,比較拜唐蘋和格列美脲藥物的干預效果顯示,拜唐蘋對2型糖尿病模型大鼠空腸組織中SGLT1蛋白表達的影響更顯著,提示阿卡波糖與2型糖尿病模型大鼠腸道組織中SGLT1蛋白表達之間存在一定的關系。
【圖文】：

尿病模型＋拜唐蘋干預組、２型糖尿病模型＋格列美脲干預組明顯降低了糖尿病大逡逑鼠的血糖，差異具有統(tǒng)計學意（Ｐ＜0．0５），并且２型糖尿病模型＋拜唐蘋干預組逡逑降低４６％，２型糖尿病模型＋格列美脲干預組降低２４％，詳細情況見表１，圖１。逡逑表１邋一般資料比較（ｘ±ｓ）逡逑組別邐隨機血糖（ｍｍｏｌ／Ｌ）逡逑正常對照組邐５．９７邋士邋０．８６逡逑正常對照＋拜唐蘋千預組邐５．５８±０．６７逡逑２型糖尿病模型對照組邐２７．１６±４．２３＊逡逑２型糖尿病模型＋拜唐蘋干預組邐１４．５６±２．４０＃逡逑２型糖尿病模型＋格列美脲干預組邐２０．６８±０．５１＃邐逡逑４０－１逡逑？ｋ逡逑ｄ３0－邐Ｔ逡逑ｅ邐ｍｍ邐＃逡逑｜邋２０－邋＃逡逑Ｉ邐卜■逡逑ｍ邋ｉ0－逡逑一。１＿二：－：ｒ：＿邐，邐＿逡逑Ｎ邐＂Ｖ邐＜５逡逑圖１給藥后４周各組大鼠隨機血糖檢測結果逡逑（注：１一正常對照組；２—正常對照＋拜唐蘋干預組；３—２型糖尿病模型對照組；逡逑４—２型糖尿病模型＋拜唐蘋干預組；５—２型糖尿病模型＋格列美脲干預組；與正逡逑常對照組相比

照組大鼠空腸組織中的ＳＧＬＴ１蛋白表達明顯增加，與２型糖尿病模型對照組相逡逑比，２型糖尿病模型＋拜唐蘋干預組、２型糖尿病模型＋格列美脲干預組大鼠空腸逡逑組織中的ＳＧＬＴ１蛋白表達均減少，見圖４。逡逑‘，；}0巧、，~�？．邋Ｓz茫海В哄危鰣澹澹皰義希驏埽簾a灥逡逑憸V/逡逑ｉｍｗ逡逑栥＿．３媝＆；桯逡逑１１邐~栧義希村危靛義賢跡錘髯櫬笫罌粘ψ櫓校櫻牽蹋裕泵庖咦榛冉希ǎ兀矗埃埃╁義希ㄗⅲ海幣徽６哉兆椋唬病６哉眨萏破桓稍ぷ�；霆埻糖南姟模型对照组：辶x希礎殘吞悄蠆∧Ｐ停萏破桓稍ぷ�；５—埻糖南姟模型＋格列秒x甯稍ぷ椋╁義希保卞義，

本文編號：2683246