【摘要】：目的:明確利拉魯肽對(duì)高脂喂養(yǎng)大鼠白色脂肪組織和3T3-L1細(xì)胞分化的脂肪細(xì)胞棕色化的影響,并探究其可能的作用機(jī)制。方法:1動(dòng)物實(shí)驗(yàn)將40只SD大鼠隨機(jī)分為5組,利拉魯肽低、中、高劑量組分別皮下注射相應(yīng)劑量利拉魯肽,對(duì)照組和高脂組給予等體積生理鹽水皮下注射。藥物干預(yù)12周末將大鼠稱(chēng)重后處死,留取附睪白色脂肪組織;HE染色觀察大鼠附睪白色脂肪組織的形態(tài)學(xué)變化;Real-Time PCR檢測(cè)miR-27b的表達(dá)水平;Real-Time PCR及Western Blot技術(shù)分別檢測(cè)UCP1、PRDM16、CEBPβ、CIDEA、PGC-1α的mRNA及蛋白表達(dá)水平。2細(xì)胞實(shí)驗(yàn)復(fù)蘇3T3-L1前脂肪細(xì)胞并誘導(dǎo)為成熟的脂肪細(xì)胞。將成熟脂肪細(xì)胞隨機(jī)分為3組,分別給予陰性對(duì)照或不同濃度利拉魯肽干預(yù)48小時(shí)。通過(guò)油紅O染色法以及甘油三酯試劑盒檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)甘油三酯的含量,同時(shí)運(yùn)用PCR技術(shù)檢測(cè)mi R-27b水平,PCR技術(shù)和Western Blot技術(shù)檢測(cè)棕色化標(biāo)志基因UCP1、PRDM16、CEBPβ、CIDEA、PGC-1α的mRNA和蛋白表達(dá)。成熟脂肪細(xì)胞隨機(jī)分為轉(zhuǎn)染組和對(duì)照組,進(jìn)行miR-27b轉(zhuǎn)染后,每組再隨機(jī)分為2組,分別給予利拉魯肽和陰性對(duì)照干預(yù)48小時(shí)后收集細(xì)胞。PCR及Western Blot技術(shù)檢測(cè)棕色化標(biāo)志基因UCP1、PRDM16、CEBPβ、CIDEA、PGC-1α的mRNA和蛋白的表達(dá)。結(jié)果:1動(dòng)物實(shí)驗(yàn):藥物干預(yù)12周后,高脂組大鼠體重明顯高于對(duì)照組(P0.05),利拉魯肽各劑量組大鼠體重均低于對(duì)照組和高脂組(P0.05),利拉魯肽各劑量組脂肪細(xì)胞體積較高脂組大鼠附睪白色脂肪明顯減小;與對(duì)照組相比,利拉魯肽各組脂肪細(xì)胞體積無(wú)明顯變化,上述指標(biāo)在利拉魯肽各劑量組之間均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。與對(duì)照組相比,高脂組大鼠白色脂肪組織中mi R-27b表達(dá)升高(P0.05);與高脂組相比,利拉魯肽各劑量組白色脂肪組織中miR-27b表達(dá)下降(P0.05);利拉魯肽各劑量組之間miR-27b表達(dá)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。高脂組大鼠脂肪組織中棕色化標(biāo)志基因UCP1、PRDM16、CEBPβ、CIDEA、PGC-1α的mRNA及蛋白表達(dá)較對(duì)照組下降(P0.05);與高脂組相比,利拉魯肽各劑量組UCP1、PRDM16、CEBPβ、CIDEA、PGC-1α的mRNA及蛋白表達(dá)增加(P0.05);上述指標(biāo)的mRNA及蛋白達(dá)量在利拉魯肽各劑量組之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。2細(xì)胞實(shí)驗(yàn):與Vechile組相比,1uM和10uM組細(xì)胞內(nèi)脂滴體積明顯減小,甘油三酯含量明顯降低(P0.05)。與Vechile組相比,1uM和10uM組細(xì)胞內(nèi)miR-27b表達(dá)下降(P0.05),棕色化標(biāo)志基因UCP1、PRDM16、CEBPβ、CIDEA、PGC-1α的mRNA及蛋白表達(dá)增加(P0.05)。與mimic-nc+con組相比,miR-27b+con組棕色化標(biāo)志基因UCP1、PRDM16、CEBPβ、CIDEA、PGC-1α的mRNA及蛋白表達(dá)降低(P0.05);與mi R-27b+con組相比,miR-27b+Lira組內(nèi)上述棕色化標(biāo)志基因mRNA及蛋白表達(dá)增加(P0.05)。結(jié)論:利拉魯肽可降低肥胖大鼠體重,還可降低肥胖大鼠脂肪組織及3T3-L1脂肪細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)含量。利拉魯肽能夠促進(jìn)大鼠白色脂肪組織及成熟3T3-L1脂肪細(xì)胞的白色脂肪棕色化過(guò)程,并可能通過(guò)下調(diào)mi R-27b實(shí)現(xiàn)該作用。
【圖文】：

周末正常對(duì)照組，高脂組，利拉魯肽低、中、高劑量組脂肪組織 HE 染色（×200）E staining of white adipose tissue in Con group, HF grou, Lira-M group and Lira-H group at the end of 12th weekC o n H F L ir a - L L ir a - M L ir a - H0123m iR - 2 7 bRelativemRNAexpressionC o nH FL ir a - LL ir a - ML ir a - H** #* #* #圖 3 12 周末各組大鼠白色脂肪組織 miR-27b 表達(dá)iR-27b expression in white adipose tissue in rats at the en

6 干預(yù) 48 小時(shí)后，對(duì)照組、1uM 及 10uM 利拉魯肽組脂肪細(xì)胞油紅染色（×200）ig.6 Representative images of adipocytes treated with vehicle, 1 uM and uM lira for 48 hours by Oil Red O staining（×200）6810TglevelVehicle1uM10uM**
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：R589.2

【參考文獻(xiàn)】

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1 賀媛;曾強(qiáng);趙小蘭;;中國(guó)成人肥胖、中心性肥胖與高血壓和糖尿病的相關(guān)性研究[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2015年10期

2 匡海軍;陳五軍;張敏;曾高峰;唐朝克;;RIP140在各種組織中的作用[J];生命的化學(xué);2013年01期

3 王林平;;肥胖與心血管疾病的關(guān)系[J];中國(guó)分子心臟病學(xué)雜志;2007年05期

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本文編號(hào)：2670942