【摘要】：研究背景:強(qiáng)直性脊柱炎(Ankylosing spondylitis,AS)是一種慢性炎癥性疾病,主要累及中軸關(guān)節(jié)、肌腱韌帶和附著骨,其特征為骶髂關(guān)節(jié)炎,部分患者可伴發(fā)腎臟、心血管、眼、肺臟等關(guān)節(jié)外癥狀。在我國,AS常多發(fā)于青年男性,發(fā)病年齡高峰在18-30歲左右,疾病晚期患者可出現(xiàn)關(guān)節(jié)融合畸形、關(guān)節(jié)強(qiáng)直。AS發(fā)病原因及發(fā)病機(jī)制尚不明確,目前認(rèn)為與遺傳環(huán)境、免疫機(jī)制、感染因素及炎癥反應(yīng)等諸多因素密切相關(guān)。人類白細(xì)胞抗原(HLA-B27)被認(rèn)為與AS的發(fā)病密切相關(guān)。研究證實(shí)漢族人口白介素37基因的單核苷酸多態(tài)性(SNP)(rs3811047)與AS的易感性相關(guān)。研究表明,白介素1(Interleukin-1,IL-1)、白介素6(Interleukin-6,IL-6)、白介素 18(Interleukin-18,IL-18)、腫瘤壞死因子(tumor necrosisfactor-α,TNF-α)作為常見的促炎因子被認(rèn)為參與AS的發(fā)病過程。近期,有研究發(fā)現(xiàn)白介素-37(Interleulkin-37,IL-37)是一種免疫應(yīng)答和炎癥反應(yīng)的天然抑制物,可作為一種抗炎因子參與免疫反應(yīng)和炎癥反應(yīng)。IL-37是具有細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞外雙重作用功能的細(xì)胞因子,其抑制炎癥反應(yīng)和參與免疫調(diào)節(jié)的途徑主要有:IL-37前體經(jīng)半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)剪切成為具有活性的成熟體—IL-37b,通過與IL-18結(jié)合蛋白(IL-18BP)結(jié)合增強(qiáng)了 1L-18BP對IL-18抑制力,從而抑制干擾素-Y(IF-N-γ)的生成;IL-37b轉(zhuǎn)移至細(xì)胞內(nèi)可與smad3結(jié)合形成IL-37b-Smad3復(fù)合物,從而降低一些炎癥信號通路相關(guān)激酶如FAK,MAPK p38和c-Jun的表達(dá)。IL-37b-Smad3復(fù)合物還可以抑制STAT1-4的磷酸化并使GSK-3 α/β的表達(dá)失活;此外,IL-37b還可以通過自分泌或旁分泌形式直接釋放到免疫神經(jīng)元,抑制樹突狀細(xì)胞的活化并延緩其抗原呈遞的過程。研究發(fā)現(xiàn)IL-37能減輕缺血性腦卒中、心肌缺血/再灌注損傷、銀屑病和哮喘的臨床癥狀,且IL-37的表達(dá)也與彌漫性毒性甲狀腺腫(Graves'disease,GD)的疾病活動度相關(guān)。在自身免疫疾病和風(fēng)濕性疾病領(lǐng)域,IL-37被認(rèn)為通過下調(diào)促炎性細(xì)胞因子的表達(dá)和活化而發(fā)揮作用,據(jù)報(bào)道,IL-37參與系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus,SLE)、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(Rheumatoid arthritis,RA)、成人斯蒂爾病、AS的發(fā)病機(jī)制。TNF-α拮抗劑是目前治療AS的重要手段,能顯著減輕其臨床癥狀,減輕其疾病活動度。體外研究表明,阻斷TNF-α的表達(dá),可以降低炎性細(xì)胞因子IL-1β、IL-6、IL-18的表達(dá),且IL-1β、IL-18、TNF-α可以促進(jìn)IL-37的表達(dá),IL-37能抑制IL-1β、IL-6、TNF-α等炎性細(xì)胞因子的表達(dá)。目的:本研究旨在探討IL-37及其相關(guān)炎癥因子在強(qiáng)直性脊柱炎的表達(dá)及其臨床意義。方法:該實(shí)驗(yàn)選取2017年01月至2018年1月期間就診于山東省立醫(yī)院風(fēng)濕免疫科的強(qiáng)直性脊柱炎患者35例作為AS組;并選取其中接受TNF-α拮抗劑(注射用重組人II型腫瘤壞死因子受體抗體融合蛋白)治療的患者20名作為AS治療后組(注:該20名患者僅用非甾體消炎藥物及注射用重組人II型腫瘤壞死因子受體抗體融合蛋白治療6周,每周一次,一次皮下注射50mg)以及同期就診于該院健康查體中心的健康人30例作為健康對照組。采用酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme-linkedimmunesorbentassay,ELISA)檢測健康對照組、AS 治療前組、AS治療后組血清中IL-37、IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α的表達(dá)水平。采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(real-time Polymerase ChainReactionreal-timePCR)法檢測健康對照組、AS治療前組、AS治療后組外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMCs)中TNF-α、IL-37、IL-1β、IL-6、IL-18的mRNA的表達(dá)量;分析AS組與健康對照組及治療前后上述細(xì)胞因子表達(dá)量的變化及IL-37與臨床實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)、疾病活動度的相關(guān)性。結(jié)果:1、AS患者的血清細(xì)胞因子改變及經(jīng)TNF-α拮抗劑治療后血清因子的變化:AS患者細(xì)胞因子包括IL-37、IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α均較正常對照組顯著升高,AS組血清中IL-37、IL-iβ、IL-6、IL-18、TNF-α呈高表達(dá)(P均0.0001),且經(jīng)過治療后AS組血清IL-1β、IL-6、IL-18、IL-37、TNF-α 的表達(dá)水平明顯下降(P均0.0001)。2、AS患者PBMC中的細(xì)胞因子mRNA表達(dá)變化及治療后變化:治療前AS患者IL-37、IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α PBMC中的mRNA表達(dá)量均較正常對照組升高。IL-37的mRNA的表達(dá)量為健康對照組的2.3倍(P0.0001),IL-1β的mRNA的表達(dá)量為健康對照組的3.5倍(P0.0001),IL-6的mRNA的表達(dá)量為健康對照組的2.6倍(P0.0001),IL-18的mRNA的表達(dá)量為健康對照組的3.6倍(P=0.0002),TNF-α的mRNA的表達(dá)量為健康對照組的2.3倍(P0.0001)。且經(jīng)過TNF-α拮抗劑治療后AS組血清IL-37、IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α的表達(dá)水平明顯下降。IL-37的mRNA的表達(dá)量為正常對照組的1.7倍(P0.0001),IL-1β的mRNA的表達(dá)量為正常對照組的2.7倍(P0.0001),IL-6的mRNA的表達(dá)量為正常對照組的1.9倍(P0.0001),IL-18的mRNA的表達(dá)量為正常對照組的2.3倍(P=0.0002),TNF-α的mRNA的表達(dá)量為正常對照組的1.7倍(P0.0001)。3、AS患者PBMC中中IL-37mRNA表達(dá)量與其他細(xì)胞因子mRNA表達(dá)量的相關(guān)性:治療前的AS患者,其PBMC中IL-37mRNA表達(dá)量與IL-1β(R=0.826,p=0.0001)、IL-6(R=0.576,p=0.001)、IL-18(R=0.760,p=0.0001)、TNF-α(R=0.788,p=0.0001)的mRNA表達(dá)量均顯著相關(guān),且呈正相關(guān)。經(jīng)過6周治療后,PBMC中IL-37的mRNA表達(dá)量仍與IL-1 β(R=0.516,p=0.024)、IL-6(R=0.741,p=0.0001)、IL-18(R=0.460,p=0.041)、TNF-α(R=0.577,p=0.008)的mRNA表達(dá)量有密切相關(guān)性,且呈正相關(guān)性4、AS患者血清中IL-37與臨床實(shí)驗(yàn)室檢測指標(biāo)及病情活動度的相關(guān)性:4.1 AS患者治療前血清中IL37表達(dá)量與CRP表達(dá)量呈顯著正相關(guān)(R=0.828,P0.0001),與ESR表達(dá)量呈正相關(guān)(R=0.544,P=0.001),與BASDAI評分呈正相關(guān)(R=0.590,P=0.0001),與血小板無相關(guān)性(R=0.293,P=0.092)。4.2 AS患者治療后血清中IL37表達(dá)量與CRP表達(dá)量呈正相關(guān)(R=0.767,P=0.0001),與ESR表達(dá)量呈正相關(guān)(R=0.644,P=0.004),與血小板無相關(guān)性(R=0.372,P=0.117)。結(jié)論:1、IL-37的表達(dá)與AS的免疫炎癥反應(yīng)密切相關(guān),且在AS活動期中表達(dá)明顯升高,并與反應(yīng)AS疾病活動度的指標(biāo)(血沉、CRP、BASDAI評分)呈正相關(guān),可作為反映AS病情活動度的指標(biāo)之一。2、AS患者中IL-Iβ、IL-18、IL-6、TNF-α等炎癥因子表達(dá)升高,與IL-37的表達(dá)呈顯著正相關(guān)。炎癥反應(yīng)和炎性細(xì)胞因子可以增加IL-37的表達(dá),IL-37與促炎因子的表達(dá)失衡可能參與AS的免疫病理過程。3、應(yīng)用TNF-α拮抗劑能降低IL-Iβ、IL-6、IL-18、IL-37表達(dá),控制AS疾病活動度。
【圖文】：

邐０．０００１逡逑注：數(shù)據(jù)均為正態(tài)分布，，＃表示Ｐ＜0．0５有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。逡逑圖３：逡逑ＩＬ－６逡逑ＩＬ－１ｂ邐１００－．逡逑６０１逡逑■邐二邋８０－逡逑ｆ５0－邐￡邐■逡逑0＞邐，邐１邐■逡逑蘭４０－邐■邋■邐Ｉ邋６０－逡逑＜ｉ＞邐＞邐■邐■逡逑Ｉ３０－邐！：■邐＾逡逑二邐士邋▲▲▲邋Ｅ邐▲逡逑Ｉ－邐．邐ｗ邐２０＇邐■■邐ｆ逡逑／邐＾邋＜ｆ邋Ｊ＇逡逑，＾邋令邐／邐＾邐＃逡逑ｐ＜邋０．０００１邐ｐ＜邋０．０００１逡逑ＩＬ＇１８邐ＩＬ－３７逡逑２５0１邋■邋１００－，逡逑ｆ邋２０°－邐■邐＾邐８０－邐■逡逑Ｉ邐｜逡逑＂Ｉ邋１５０＇邐ｏ邋６０－逡逑▲邋▲邐３邐４０＿邐■逡逑ｓ邋５０邐＇：！邐ｓ邐２０逡逑ｏ＊＾邋ｉ邐ｉ邐ｉ邐ｏ邋Ｔ邋＊邐ｉ邐１邐逡逑／邐，邐／邐／邐ｃ／邐／逡逑0°邐ｒ５邐＾邐。。今邐令逡逑ｐ＜邋０．０００１邐ｐ＜邋０．０００１逡逑２４逡逑

圖４及逡逑表５）
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R593.23

【參考文獻(xiàn)】

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1 林琳;羅小波;李敬;陳謙明;;抑炎細(xì)胞因子IL-37的研究新進(jìn)展[J];中國免疫學(xué)雜志;2015年12期

2 陳維飛;;強(qiáng)直性脊柱炎患者血清IL-18水平及臨床意義[J];現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué);2011年15期

3 王月;馮修高;;強(qiáng)直性脊柱炎病因?qū)W的研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2010年23期

4 范仰鋼;李國華;;多個(gè)炎癥指標(biāo)在強(qiáng)直性脊柱炎活動性評價(jià)中的價(jià)值[J];實(shí)用臨床醫(yī)學(xué);2006年01期

本文編號：2657434