發(fā)布時(shí)間：2020-05-06 20:42

【摘要】：目的:1、研究高尿酸對C57BL/6小鼠體內(nèi)氧化物酶體增殖物激活受體(PPAR-γ)、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(Pck1)、雷帕霉素靶蛋白(m TOR)表達(dá)的影響及PPAR-γ、Pck1、m TOR在C57BL/6小鼠胰島β細(xì)胞凋亡中的作用。2、葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(GLUT2)和葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4(GLUT4)在高尿酸誘發(fā)胰島素抵抗中的作用。方法:1、C57BL/6小鼠敲除尿酸氧化酶(knockout urate oxidase,KO)構(gòu)建自發(fā)高尿酸血癥小鼠(SCD-KO)及對照野生型小鼠(SCD-WT)兩組,實(shí)驗(yàn)結(jié)束后取小鼠血清用ELISA試劑盒檢測空腹胰島素(FINS)、尿酸(UA)、空腹血糖(FBG);留取胰島組織用TUNEL試劑盒檢測各組細(xì)胞凋亡率,HE染色觀察胰島的形態(tài)及結(jié)構(gòu);部分胰島組織勻漿,提取RNA,使用RT-PCR檢測各組PPAR-γ、Pck1、m TOR基因的相對表達(dá)量;提取胰島組織蛋白用Western blot檢測各組蛋白的相對表達(dá)量。2、高脂飲食喂養(yǎng)自發(fā)高尿酸小鼠(HFD-KO)及年齡、體重相近的對照野生型小鼠(HFD-WT),待高脂喂養(yǎng)自發(fā)高尿酸小鼠成功造模后,隨機(jī)選取一半小鼠,給予別嘌醇(100mg/kg)灌胃降尿酸(ULT)處理1周,多次重復(fù)胰島素耐量試驗(yàn)(ITT),葡萄糖耐量試驗(yàn)(GTT),實(shí)驗(yàn)結(jié)束后取各組小鼠的血清使用ELISA試劑盒檢測FBG、UA、FINS、甘油三酯(TG)、游離脂肪酸(FFA);肝臟組織和肌肉組織勻漿提取蛋白進(jìn)行Western blot檢測GLUT2、GLUT4蛋白的相對表達(dá)量。結(jié)果:1、KO小鼠的UA水平在實(shí)驗(yàn)過程中維持穩(wěn)定(483.9±24.3)μmol/L且顯著高于WT小鼠(143.8±23.2)μmol/L;SCD-KO組小鼠與SCD-WT組小鼠的空腹血糖、空腹胰島素、胰島素敏感性均無差異;與SCD-WT組比較,SCD-KO組小鼠葡萄糖耐量減低,SCD-KO組小鼠胰島細(xì)胞凋亡率明顯升高(P0.05);HE染色顯示SCD-KO組小鼠胰島細(xì)胞的損害程度更嚴(yán)重(P0.05);SCD-KO組PPAR-γ、Pck1、m TOR三基因m RNA及蛋白的相對表達(dá)量均升高(均P0.05)。2、高脂飲食喂養(yǎng)的各組小鼠空腹血糖無明顯差異,HFD-KO組小鼠FINS水平比HFD-WT組小鼠高((0.636±0.07)ng/ml vs.(0.456±0.03)ng/ml)(P0.01),HFD-KO組胰島素敏感性明顯下降,葡萄糖代謝明顯紊亂;雖然高脂飲食可升高尿酸,但HFD-KO組小鼠的尿酸仍顯著高于HFD-WT組小鼠((216.61±27.5)μmol/L vs.(549.68±48.7)μmol/L)(P0.05);與HFD-WT組比較,HFD-KO組小鼠腓腸肌中Slc2a4/GLUT4表達(dá)降低,HFD-WT組小鼠肝臟中Slc2a2/GLTU2表達(dá)增加(均P0.05);別嘌呤醇灌胃處理使尿酸水平下降200μmol/L左右,HFD-KO組小鼠葡萄糖代謝改善,胰島素敏感性提高,HFD-KO組小鼠腓腸肌中Slc2a4/GLUT4表達(dá)升高,肝臟中Slc2a2/GLTU2表達(dá)減少。結(jié)論:1、尿酸可能通過PPAR-γ-Pck1-mTOR信號通路參與胰島細(xì)胞凋亡的過程。2、尿酸可能通過降低腓腸肌中Slc2a4/GLUT4表達(dá),升高肝臟中Slc2a2/GLUT2表達(dá)誘導(dǎo)胰島素抵抗。
【圖文】：

SCD-WT 組 SCD-KO 組圖 2 各組小鼠胰腺組織 HE 染色結(jié)果Fig 2 Pancreas HE stain in SCD-WT group and SCD-KO group4.3 各組小鼠胰島細(xì)胞 TUNEL 凋亡檢測結(jié)果

圖 5 各組小鼠胰島組織 PPAR-γ, Pck1, mTOR 蛋白Fig 5 PPAR-γ, Pck1, mTOR protein expression in注： 與 SCD-WT 組比較，，*P＜0.05，**P＜0.01
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R589.7

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 鄧過房;;2016年諾貝爾生理或醫(yī)學(xué)獎背景下的細(xì)胞死亡方式再認(rèn)識[J];中學(xué)生物學(xué);2017年05期

2 寧旭;于忠鳴;;創(chuàng)造性的自主毀滅——細(xì)胞凋亡簡介[J];中學(xué)生物學(xué);2006年10期

3 劉春秋;卞茂紅;;藥物致紅細(xì)胞凋亡的研究進(jìn)展[J];臨床輸血與檢驗(yàn);2017年04期

4 劉晨;馮雪;;人CXCR4基因?qū)σ认侔㏒W1990細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期的影響[J];健康之路;2017年06期

5 王方;;過表達(dá)TIPE2上調(diào)BID分子促進(jìn)H446細(xì)胞凋亡[J];科學(xué)中國人;2017年18期

6 賈寧;孫榮釗;;病毒感染對細(xì)胞凋亡的影響及作用機(jī)制[J];中國動物檢疫;2012年08期

7 趙君怡;劉偉國;郭秀麗;;一氧化氮與細(xì)胞凋亡相關(guān)疾病的關(guān)系及其調(diào)控[J];中國藥學(xué)雜志;2010年14期

8 黃小丹;;細(xì)胞凋亡與疾病[J];畜牧獸醫(yī)科技信息;2009年05期

9 陳藝娟;鄧甲興;林永利;;中藥影響細(xì)胞凋亡的研究進(jìn)展[J];福建畜牧獸醫(yī);2008年01期

10 劉伍梅;汪銘書;程安春;周毅;劉芳;張平英;李雪梅;陳孝躍;;PRRSV感染Marc-145細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)觀察[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);2008年03期

相關(guān)會議論文 前10條

1 李佑生;王文健;劉毅;何春燕;何燕銘;陳偉華;應(yīng)健;;黃芪多糖丹酚酸對高糖誘導(dǎo)的足細(xì)胞凋亡的影響[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會血栓病分會第四次學(xué)術(shù)研討會暨廣東省中醫(yī)藥學(xué)會血栓病專業(yè)委員會首屆學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2010年

2 覃玉榮;張志勇;;細(xì)胞濃度變化對細(xì)胞凋亡率影響及其機(jī)理初探[A];全國電磁兼容學(xué)術(shù)會議論文集[C];2006年

3 于青;袁偉杰;姚建;;晚期糖基化終末產(chǎn)物引起足細(xì)胞凋亡的機(jī)制[A];2007年浙滬兩地腎臟病學(xué)術(shù)年會資料匯編[C];2007年

4 吳經(jīng)緯;湯長發(fā);;運(yùn)動中細(xì)胞凋亡的線粒體變化特征[A];湖南省生理科學(xué)會2006年度學(xué)術(shù)年會論文摘要匯編[C];2007年

5 蒲小平;李長齡;屠鵬飛;宋志宏;;中藥肉叢蓉成分抗神經(jīng)細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究[A];第七屆全國生化藥理學(xué)術(shù)討論會論文摘要集[C];2000年

6 符必謙;奚勝艷;王彥暉;;中藥及復(fù)方促腫瘤細(xì)胞凋亡的作用及機(jī)制[A];第二屆臨床中藥學(xué)大會論文集[C];2018年

7 林其誰;;線粒體與細(xì)胞凋亡[A];第七屆全國生物膜學(xué)術(shù)討論會論文摘要匯編[C];1999年

8 邱潔;高海青;;鋅在細(xì)胞凋亡中的作用研究進(jìn)展[A];山東省微量元素科學(xué)研究會第三屆學(xué)術(shù)研討會論文匯編[C];2006年

9 寧存德;;細(xì)胞凋亡與口腔疾病[A];FDI、CSA臨床口腔進(jìn)展學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];1999年

10 華子春;;靶向性誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡藥物研發(fā)[A];全國第十一屆生化與分子藥理學(xué)學(xué)術(shù)會議論文集[C];2009年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 方方　曹雪琴;吳政星的挑戰(zhàn)與求索[N];科學(xué)時(shí)報(bào);2011年

2 實(shí)習(xí)生 劉雨亭;細(xì)胞凋亡如何推進(jìn)？以觸發(fā)波的“名義”[N];科技日報(bào);2018年

3 ;“細(xì)胞凋亡療法”正逐步成為治療癌癥的新途徑[N];中國高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報(bào);2002年

4 記者 何德功;基因變異可能致癲癇[N];新華每日電訊;2004年

5 ;3’取代吲哚類衍生物誘導(dǎo)HL－60細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究[N];中國醫(yī)藥報(bào);2003年

6 ;As_(2)S_(2)與STI571協(xié)同誘導(dǎo)K562細(xì)胞凋亡[N];中國醫(yī)藥報(bào);2003年

7 董學(xué)清 吳延華;阿膠抑癌作用顯著[N];中國醫(yī)藥報(bào);2003年

8 高書明;誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡[N];中國醫(yī)藥報(bào);2004年

9 楊堤林;中藥可誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡[N];中國中醫(yī)藥報(bào);2004年

10 記者張建松;治療癌癥新途徑：細(xì)胞凋亡療法[N];科技日報(bào);2002年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 陳毅彪;Ars2通過microRNA-6798-3p調(diào)控膠質(zhì)瘤細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制研究[D];西南大學(xué);2018年

2 涂瑋;p53介導(dǎo)的線粒體凋亡途徑在氟致神經(jīng)毒性中的作用[D];華中科技大學(xué);2018年

3 李玉明;豬繁殖與呼吸綜合征病毒誘導(dǎo)bystander細(xì)胞凋亡機(jī)制研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2017年

4 魏薇;我國優(yōu)勢基因型弓形蟲蟲株致密顆粒蛋白15誘導(dǎo)人絨毛膜細(xì)胞JEG-3凋亡的機(jī)制研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2018年

5 徐祥;Nupr1及C/EBPβ在甲基苯丙胺誘導(dǎo)的神經(jīng)毒性中的作用[D];南方醫(yī)科大學(xué);2018年

6 沈雯;循環(huán)miRNA參與吸煙所致COPD的作用及機(jī)制研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2018年

7 朱思遠(yuǎn);晚期氧化蛋白產(chǎn)物誘導(dǎo)成骨細(xì)胞凋亡的機(jī)制研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2018年

8 鄭旭;白藜蘆醇對甲狀腺癌防治作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2018年

9 柏素云;新型吡唑香豆素衍生物和二茂鐵吡唑衍生物對細(xì)胞凋亡、自噬和細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)及機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2015年

10 陳玲;游離脂肪酸對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞炎癥反應(yīng)的影響及作用機(jī)制[D];山東大學(xué);2018年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 張敏利;敵百蟲在鯽體內(nèi)殘留規(guī)律及其細(xì)胞毒性的初步研究[D];上海海洋大學(xué);2018年

2 趙靜宇;三七總皂苷對阿爾茲海默病中神經(jīng)細(xì)胞凋亡及自噬的影響[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2016年

3 吳琦;siRNA沉默SIRT1基因?qū)m頸癌細(xì)胞HeLa增殖和凋亡的影響[D];青島大學(xué);2014年

4 謝祥軍;京尼平通過線粒體動力學(xué)緩解氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的神經(jīng)細(xì)胞凋亡[D];中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué);2018年

5 林力;細(xì)胞粘附分子Ninjurin-2于U87-MG等人惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞系中的作用及初步機(jī)理探討[D];廈門大學(xué);2017年

6 徐洋;鴨瘟病毒US5基因抑制雙氧水誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡的初步研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2017年

7 王小燕;Rap2b通過與線粒體蛋白相互作用調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡的研究[D];揚(yáng)州大學(xué);2018年

8 黃日鎮(zhèn);香豆素哌嗪衍生物的合成及其抗腫瘤活性研究[D];廣西師范大學(xué);2015年

9 李拓;25種藥用植物提取物體外抗肺癌活性篩選[D];昆明理工大學(xué);2015年

10 毛昶懿;皮蛋抗腫瘤功效及其機(jī)制的研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2018年

本文編號：2651831