發(fā)布時間：2020-03-25 03:16

【摘要】：一、研究背景非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是指除酒精和其他明確的損肝因素所致的肝細(xì)胞內(nèi)脂肪過度沉積為主要特征的臨床病理綜合征,和2型糖尿病(T2DM)、胰島素抵抗(IR)、肥胖、代謝綜合征等密切相關(guān),后期可能進(jìn)展為肝硬化甚至是肝癌。非酒精性脂肪肝在全球發(fā)病率日漸增高而臨床上缺乏有效治療藥物。共軛亞油酸(Conjugated linoleic acid,CLA)是指含有共軛雙鍵的亞油酸同分異構(gòu)體,其中c9,t11-CLA和t10,c12-CLA兩種異構(gòu)體是最主要的成分。研究證明CLA能發(fā)揮多種重要的生理功能,如減肥降脂、抗氧化、抗腫瘤、治療糖尿病等,但其分子作用機(jī)制并不完全清楚。過氧化物酶體增殖物激活受體(Peroxisome pro liferator-activated receptors,PPARs)是配體激活的轉(zhuǎn)錄因子,其中PPARα和PPARγ兩種亞型參與調(diào)節(jié)多種脂質(zhì)代謝相關(guān)基因表達(dá),從而在能量平衡和代謝功能中發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用。二、研究目的分析共軛亞油酸對肥胖糖尿病合并脂肪肝小鼠的治療作用,探討共軛亞油酸通過PPARα、PPARγ、SREBP-1c等核轉(zhuǎn)錄因子通路調(diào)節(jié)CD36、ACC、FASN等脂質(zhì)代謝相關(guān)基因表達(dá)的作用機(jī)制。三、研究方法動物實驗:將c9,t11-cla和t10,c12-cla等量混合后喂給鼠齡18個月雄性肥胖糖尿病合并脂肪肝小鼠(db/db小鼠),測量小鼠體重、飲食攝入量、空腹血糖含量、甘油三酯、總膽固醇水平等。HE染色和油紅染色檢測肝臟病理學(xué)改變和脂肪酸含量。熒光定量PCR和western blot實驗檢測PPARα、PPARγ、CD36、CHREBP和SREBP-1c等基因表達(dá)水平。細(xì)胞實驗:以空白組和亞油酸處理組為對照,分別用50uM c9,t11-cla和t10,c12-cla處理HepG2細(xì)胞,熒光定量PCR和western blot實驗檢測PPARα、PPARγ、CD36、ACC等基因表達(dá);通過SiRNA轉(zhuǎn)染敲低PPARy表達(dá)后檢測CD36基因表達(dá)。四、研究結(jié)果(1)共軛亞油酸能減少db/db小鼠飲食量,有效減輕小鼠體重,降低血清甘油三酯和膽固醇水平。(2)共軛亞油酸能有效降低db/db小鼠空腹血糖,提高糖耐量。(3)肝臟病理學(xué)切片和油紅染色結(jié)果表明共軛亞油酸能減少肝臟里脂滴累積,有效改善脂肪肝。(4)共軛亞油酸能增加PPARα蛋白表達(dá);降低SREBP-1c蛋白表達(dá);通過降低PPARy基因表達(dá)而降低CD36蛋白表達(dá)。(5)共軛亞油酸能增加ACC磷酸化水平,細(xì)胞內(nèi)乙酰輔酶A濃度升高,抑制脂肪酸合成,增加脂肪酸氧化。五、研究結(jié)論兩種共軛亞油酸同分異構(gòu)體混合物能夠明顯改善db/db小鼠脂肪肝,降低空腹血糖,提高糖耐量,對肥胖、糖尿病合并脂肪肝動物模型產(chǎn)生綜合性的治療效果。其作用機(jī)制可能是通過激活PPARα轉(zhuǎn)錄因子,激活其調(diào)控脂質(zhì)代謝通路;抑制PPARy基因表達(dá)而下調(diào)CD36蛋白表達(dá),減少細(xì)胞對脂肪酸吸收;降低SREBP-1c蛋白表達(dá)而抑制FANS基因表達(dá),減少脂肪酸合成;增加ACC磷酸化水平,抑制ACC活性,減少脂肪酸的合成。
【圖文】：

邐第３章實驗結(jié)果邐逡逑第３章實驗結(jié)果逡逑３．１飲食量、體重和器官指數(shù)逡逑３．１．１經(jīng)過一個月的共軛亞油酸治療，實驗組５只小鼠飲水總量保持在５０ｇ／天，逡逑攝食總量下降到約３０ｇ／天；對照組小鼠飲水總量逐漸增多到約１００ｇ／天，攝食總逡逑量增加到約８０ｇ／天。實驗組小鼠的水和食物攝入量顯著降低（圖３－１－１Ａ，，邋Ｂ）。逡逑

圖３－１－２共軛亞油酸處理組與對照組小鼠體重改變逡逑Ｆｉｇ．３－１－２邋Ｂｏｄｙ邋ｗｅｉｇｈｔ邋ｃｈａｎｇｅｓ邋ｏｆ邋ｃｏｎｔｒｏｌ邋ａｎｄ邋ＣＬＡ邋ｇｒｏｕｐ．逡逑３．１．３實驗組小鼠肝臟指數(shù)明顯高于對照組（ｐ＜０．００１），其他器官指數(shù)沒苻出現(xiàn)顯逡逑著差異（見圖３－１－３）。逡逑０．１５－１邐—逡逑＾邐Ｃｏｎｔｒｏｌ邋ｇｒｏｕｐ逡逑＾邐Ｅ２３邋ＣＬＡ邋ｇｒｏｕｐ逡逑２邋ｏ．ｉｏ－邐？！■逡逑｜逡逑ｉ邐＿邋ｆｔ逡逑ＷＤ邐商：逡逑５邋０．０５－邐１邋：：：逡逑Ｉ邋？逡逑ａ邐■邐■邋■邋■■邐：：：：：：：邐■邋■■睡邐ｃｎ邐ｔ／ｌｌ邐ｉ？？？ｉ邋ｔ：＿：ｉ逡逑Ｕ．ＵＵ邐雪邐ｉ邐ｉ邐ｉ邐Ｉ邐Ｉ逡逑
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R587.1;R589.2;R575.5

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前5條

1 賀媛;趙小蘭;曾強(qiáng);;城市成人超重、肥胖、中心性肥胖的流行特征和相關(guān)危險因素分析[J];實用預(yù)防醫(yī)學(xué);2015年04期

2 田峰;楊爍;鄭志剛;周曉光;;2型糖尿病伴非酒精性脂肪肝患者胰島素抵抗與游離脂肪酸關(guān)系研究[J];中國醫(yī)藥導(dǎo)報;2008年16期

3 周健;賈偉平;包玉倩;馬曉靜;陸蔚;喻明;潘潔敏;胡承;項坤三;;2型糖尿病患者脂肪肝患病率調(diào)查及危險因素分析[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2007年32期

4 李亮;程彥偉;;乙酰輔酶A羧化酶在治療肥胖中的潛在作用[J];生命的化學(xué);2007年02期

5 程瑞迎 ,秦潔 ,柳潔;游離脂肪酸與2型糖尿病動脈硬化的關(guān)系[J];中國藥物與臨床;2002年06期

本文編號：2599306