銀杏葉制劑治療高脂血癥的療效及作用機制研究

發(fā)布時間：2020-03-22 12:45

【摘要】：研究背景:我國具有豐富的銀杏葉資源,銀杏樹保有量約占全球銀杏樹資源的90%,是銀杏葉的主產地。中國也是全球第一大銀杏葉提取物生產國,2017年產量達到558.4噸,生產規(guī)模也超過1.9億元,說明在我國銀杏葉制劑的生產規(guī)模逐漸增大。銀杏葉制劑進入國家基本藥品目錄及納入醫(yī)保目錄,說明人們對銀杏葉制劑的需求量逐漸增高。目前銀杏葉制劑廣泛用于冠心病、中風、高脂血癥、癡呆等疾病的治療,但其在臨床應用中多作為輔助用藥,需要積極探索銀杏葉制劑的具體目標人群。因此對銀杏葉進行全背景的文獻計量,分析銀杏葉制劑在臨床的應用及研究現狀。相關研究表明銀杏葉提取物具有阻斷血小板活化因子與受體結合的功能,從而降低血液黏度,降低血脂,改善血管內皮細胞功能,預防心腦血管疾病的發(fā)生、發(fā)展,同時銀杏葉片在專家共識作為推薦治療高脂血癥的用藥之一。因此選用銀杏葉制劑治療高脂血癥作為本研究的研究方向。本研究采用meta分析、網絡藥理學的方法探討銀杏葉制劑治療高脂血癥的療效特點及作用機制,為銀杏葉制劑在臨床應用上的高質量循證評價提供參考和方向。研究一銀杏葉全背景研究的文獻計量學分析研究目的:采用文獻計量學的方法分析銀杏葉制劑的臨床應用及研究現狀。研究方法:計算機檢索CNKI、CBM、Wan Fang Data等數據庫,以“銀杏葉”為關鍵詞,搜集銀杏葉的研究文獻,檢索時間均從各數據庫建庫至2018年6月。按發(fā)表時間、文獻發(fā)表類型、銀杏葉制劑劑型、不良反應等對文獻進行篩選和分類,分析和評價銀杏葉的臨床應用及研究現狀。研究結果:1本研究共納入8932篇有關銀杏葉的文獻,其中3945篇文獻涉及銀杏葉的基礎研究;3837篇文獻涉及銀杏葉的臨床研究;994篇文獻涉及銀杏葉制劑的提取制備等;156篇涉及銀杏葉的分布、種植、培育等。2發(fā)表的文獻按其類型分為4類:期刊文章、學位論文、會議論文、報紙文章等其他類型。有關銀杏葉研究的年均文獻量由1985年之前的1篇到1985～1998年的42篇,再增至1998～2011年的424篇,最后至2011～2018年的410篇。3 3945篇基礎研究的文獻中:有1004篇文獻涉及細胞增殖、凋亡的實驗研究;有845篇文獻涉及缺血-再灌注模型的實驗研究;有542篇文獻涉及缺氧模型的實驗研究;有368篇文獻涉及動脈粥樣硬化模型的實驗研究;有255篇文獻涉及糖尿病相關模型的實驗研究;有112篇文獻涉及癡呆模型的實驗研究;余下855篇的文獻由于作用機制難以進行分類則歸為其他。4 3837篇臨床研究按銀杏葉劑型分為注射劑1742篇、片劑1222篇、丸劑288篇、膠囊465篇、沖劑12篇、其他劑型15篇,如酊劑、膏劑等,余93篇文獻則未具體描述劑型。3837篇臨床研究中有1468篇關于腦血管系統(tǒng)疾病的文獻;1346篇關于心血管系統(tǒng)疾病的文獻;394篇關于內分泌系統(tǒng)疾病的文獻;159篇關于耳鼻喉科疾病的文獻;142篇關于腎臟系統(tǒng)疾病的文獻;103篇關于肺臟系統(tǒng)疾病的文獻;72篇為其他系統(tǒng)疾病的文獻。5臨床研究的3837篇文獻分布于545種期刊,期刊分布較分散,其中只刊登一篇文獻的期刊有218種,占期刊總數的40%;刊登12篇以上文獻的期刊有34種,占期刊總數的6%。其中華東地區(qū)作者的文獻量最多;西北地區(qū)、西南地區(qū)作者的文獻量最少。6本研究共納入描述銀杏葉制劑不良反應的文獻有43篇,包括綜述10篇。33篇文獻中有30篇文獻的不良反應是由于使用銀杏葉注射劑造成的,其余3篇文獻則未詳述具體使用哪種劑型。銀杏葉注射劑不良反應主要反映在皮膚及血管損害、全身性損害、中樞及外周神經損害、心腦血管損害、消化系統(tǒng)損害、呼吸系統(tǒng)損害。其中嚴重不良反應為過敏性休克、心絞痛、肝損害等。銀杏葉制劑與一些藥物存在配伍禁忌,主要是舒血寧注射液與泮托拉唑鈉注射液、前列地爾注射液、燈盞花素注射液、前列腺素E1注射液、鴉膽子油乳注射液、頭孢拉定等抗感染藥存在配伍禁忌;金納多與呋噻米注射液也存在配伍禁忌。研究小結:1銀杏葉的研究文獻數量呈逐年上升的趨勢,說明銀杏葉的研究越來越受到關注,且銀杏葉的臨床研究和基礎研究文獻數量基本相同,說明研究者既重視銀杏葉的臨床應用療效,又重視其作用機制、藥效基礎及藥物成分的研究;2銀杏葉制劑包括多種劑型,在臨床上的常用劑型是注射劑;3銀杏葉制劑在臨床最常用疾病是心腦血管疾病;4銀杏葉注射劑在臨床中的不良反應較多,主要不良反應是皮膚及血管損害和全身性損害;5銀杏葉制劑中的舒血寧注射液與多種藥物存在配伍禁忌,因此在臨床上要減少或避免與其他注射劑配伍使用。研究二銀杏葉制劑治療高脂血癥的meta分析研究目的:基于meta分析方法評價銀杏葉制劑治療高脂血癥的有效性及安全性。研究方法:檢索 PubMed、Embase、Cochrane library、Wangfang Data、CBM、VIP、CNKI等數據庫,納入銀杏葉制劑治療高脂血癥的隨機對照試驗。根據納排標準對文獻進行查重、篩選并進行資料提取。采用RevMan5.3軟件對血脂的各項指標進行meta分析,并進行安全性分析和偏倚分析。研究結果:1納入文獻情況:納入9篇單獨使用銀杏葉制劑治療高脂血癥的文獻;16篇合并使用銀杏葉制劑治療高脂血癥的文獻。最終納入的文獻都是中文文獻。納入的文獻多數未提及其分配隱藏的方法;漏斗圖提示納入的文獻可能存在發(fā)表性偏倚。2單獨使用銀杏葉制劑的9項研究中共有5項研究的對照藥為中成藥,分別是血脂康膠囊、絞股藍總甙膠囊、脂必妥片;有4項研究的對照藥為西藥,分別是辛伐他汀、煙酸肌醇酯。16項合并使用銀杏葉制劑的研究的對照藥均為他汀類藥物。以上各項研究的I2均大于50%,故采用隨機效應模型。3單獨使用銀杏葉制劑的臨床療效:3.1改善TC的療效:經治療后,在降低TC水平方面,銀杏葉制劑療效高于中成藥組,兩組比較差異有統(tǒng)計學意義[95%CI(-0.77,-0.12),P=0.0070.05];銀杏葉制劑療效不低于西藥組,兩組比較差異無統(tǒng)計學意義。[95%CI(-1.48,0.86),P=0.600.05]。3.2改善TG的療效:經治療后,在降低TG水平方面,銀杏葉制劑療效不低于中成藥組,兩組比較差異無統(tǒng)計學意義[95%CI(-1.00,0.35),P=0.340.05];銀杏葉制劑效果不低于西藥組,兩組比較差異無統(tǒng)計學意義[95%CI(-0.34,0.13),P=0.380.05]。3.3改善HDL-C的療效:經治療后,在提高HDL-C水平方面,銀杏葉制劑療效高于中成藥組,兩組比較差異有統(tǒng)計學意義。[95%CI(0.00,0.18),P=0.040.05];銀杏葉制劑療效高于西藥組,兩組比較療效有統(tǒng)計學意義。[95%CI(0.03,0.26),P=0.020.05]。3.4改善LDL-C的療效:經治療后,在降低LDL-C水平方面,銀杏葉制劑療效不低于中成藥組,兩組比較差異無統(tǒng)計學意義[95%CI(-0.64,0.26),P=0.410.05];銀杏葉制劑療效不低于西藥組,兩組比較差異無統(tǒng)計學意義[95%CI(-0.52,2.02),P=0.250.05]。4合并使用銀杏葉制劑的療效:4.1改善TC的療效:經治療后,在降低TC水平方面,合并使用銀杏葉制劑組療效明顯優(yōu)于對照組,兩組比較差異有統(tǒng)計學意義[95%CI(-1.21,-0.53),P0.00001]。4.2改善TG的療效:經治療后,在降低TG水平方面,合并使用銀杏葉制劑組療效明顯優(yōu)于對照組,兩組比較差異具有統(tǒng)計學意義[95%CI(-0.61,-0.39),P0.00001]。4.3改善HDL-C的療效:經治療后,在升高HDL-C水平方面,合并使用銀杏葉制劑組療效明顯優(yōu)于對照組,兩組比較差異具有統(tǒng)計學意義[95%CI(0.23,0.43),P0.00001]。4.4改善LDL-C的療效:經治療后,在降低LDL-C水平方面,合并使用銀杏葉制劑組療效明顯優(yōu)于對照組,兩組比較差異具有統(tǒng)計學意義[95%CI(-1.02,-0.55),P0.00001]。5不同年齡段單獨使用銀杏葉制劑的亞組分析結果:根據年齡分層將9項研究分為三組:分別是Ⅰ.年齡≤50歲;Ⅱ.50歲年齡≤60歲;Ⅲ.60年齡≤70歲,采用隨機效應模型。在50歲到60歲年齡段,銀杏葉制劑組降低TC水平優(yōu)于對照組(血脂康膠囊、辛伐他汀片、煙酸肌醇酯、絞股藍總甙膠囊),兩組比較差異有統(tǒng)計學意義[95%CI(-0.93,-0.24),P=0.00090.05]。其余兩個年齡段,銀杏葉制劑組與對照組比較差異無統(tǒng)計學意義,說明銀杏葉制劑組降低TC水平不低于對照組。在≤50歲年齡段,銀杏葉制劑降低TG水平優(yōu)于對照組(血脂康膠囊、辛伐他汀片),兩組比較差異有統(tǒng)計學意義[95%CI(0.03,0.21),P=0.010.05]。其余兩個年齡段,試驗組降低TG水平不低于對照組,兩組差異比較無統(tǒng)計學意義。6安全性結果:單獨使用銀杏葉制劑的9項研究中有3篇未提及不良反應;3篇未發(fā)現明顯不良反應;3篇發(fā)現明顯不良反應。治療組共出現3例胃腸道反應;對照組共出現10例胃腸道反應,出現2例皮疹。合并使用銀杏葉制劑的16項研究中9篇未提及不良反應;2篇未發(fā)現不良反應;5篇發(fā)現不良反應,其中主要的不良反應為谷丙轉氨酶(ALT)升高,但經停藥后逐漸恢復正常。研究小結:1納入的文獻質量較低且存在偏倚,大多未具體描述其隨機方法、如何分配隱藏及如何設計盲法,說明多數關于銀杏葉制劑治療高脂血癥的臨床試驗在試驗設計及報告規(guī)范方面存在缺陷;2在高脂血癥的臨床治療中,銀杏葉制劑存在單獨應用和合并應用的情況,最常合并藥物為他汀類藥物;3通過對年齡進行分層分析,發(fā)現銀杏葉制劑對≤50歲年齡段患者的TG水平具有明顯的治療作用;對50歲到60歲年齡段的患者,銀杏葉制劑在降低TC水平方面有顯著作用。銀杏葉制劑合并他汀類藥物治療高脂血癥可提高臨床療效。研究三基于網絡藥理學的方法分析銀杏葉治療高脂血癥的作用靶點及機制研究目的:運用網絡藥理學的分析方法,構建銀杏葉治療高脂血癥的生物網絡,分析銀杏葉治療高脂血癥的有效靶點,探索其治療高脂血癥的作用機理,為臨床治療提供理論依據。研究方法:(1)篩選銀杏葉有效成分并對篩選出的成分進行靶標預測。以OB30%,DL0.18為條件,在TCMSP數據庫中篩選出銀杏葉的有效活性成分,在Swiss Target Prediction數據庫進行活性成分的靶標預測。(2)通過UniProt、Therapeutic Target Database、Online Mendelian Inheritance in Man數據庫檢索高脂血癥的疾病靶點。(3)利用Cytoscape軟件構建銀杏葉有效活性成分治療高脂血癥的作用靶點網絡圖,并通過DAVID數據庫對作用靶點進行GOOntology(GO注釋)和KEGG通路分析。研究結果:1銀杏葉有效成分及靶點:在TCMSP數據庫篩選出26個銀杏葉的有效活性成分,基于Swiss Target Prediction平臺預測出26個活性成分的390個潛在靶點。2構建高脂血癥疾病靶點網絡圖:通過String在線軟件、Cytoscape軟件構建高脂血癥疾病靶點網絡圖。3銀杏葉治療高脂血癥的靶點分析:將銀杏葉有效成分的靶點與高脂血癥的靶點相互映射,得到銀杏葉有效成分治療高脂血癥的18個靶點。通過DAVID數據庫對18個靶點進行GO注釋和KEGG通路分析,生物學過程分析中排名前10的有RNA聚合酶Ⅱ啟動子轉錄的正調節(jié)、信號轉導、RNA聚合酶Ⅱ啟動子轉錄的負調節(jié)、調節(jié)脂質代謝過程、調節(jié)膽固醇體內平衡、受體介導的內吞作用、對藥物的反應、肽基-蘇氨酸磷酸化、晝夜節(jié)律、對低密度脂蛋白顆粒的反應;細胞組分分析中前10的有核、膜、核質、細胞質、質膜、受體復合物、高爾基體、微管相關復合物、紡錘體微管、ER到高爾基體運輸囊泡膜;分子功能分析中排名前10的有蛋白質結合、酶結合、染色質結合、極低密度脂蛋白顆粒受體活性、低密度脂蛋白受體活性、載脂蛋白結合、RNA聚合酶Ⅱ轉錄因子活性,配體激活的序列特異性DNA結合、核心啟動子序列特異性DNA結合、類固醇激素受體活性、糖蛋白結合;KEGG通路分析排名靠前的有雌激素信號通路、催乳素信號通路、GnRH信號通路、胰島素抵抗、弓形體病、丙型肝炎、MAPK信號通路、Ⅱ型糖尿病、卵巢類固醇生成。研究小結:本研究從網絡藥理學的方面闡述銀杏葉通過調節(jié)脂質的代謝過程、調節(jié)體內膽固醇平衡、降低低密度脂蛋白等生物過程發(fā)揮治療高脂血癥的作用,;銀杏葉主要通過作用 MAPT、ESR1、ABCC3、ESR2、LDLR、LRP8、VLDLR 等靶點發(fā)揮調節(jié)血脂的作用,作用靶點主要富集于雌激素信號通路、胰島素抵抗、Ⅱ型糖尿病等通路,為臨床使用銀杏葉制劑治療高脂血癥的有效性提供理論基礎。結論:1文獻計量學研究結果提示銀杏葉制劑在臨床上的常用劑型為注射劑、常用疾病為心腦血管疾病、發(fā)生不良反應的劑型主要為銀杏葉注射劑、常見不良反應為皮膚及血管損害;2基于本研究的meta分析結果顯示銀杏葉制劑與他汀類藥物合用能提高其治療高脂血癥的療效,且單獨使用銀杏葉制劑對≤50歲年齡段患者的TG水平具有明顯的治療作用,對50歲到60歲年齡段患者的TC水平具有明顯的治療作用;網絡藥理學結果提示銀杏葉主要通過MAPT、ESR1、ABCC3、ESR2、LDLR、LRP8、VLDLR等靶點調節(jié)體內膽固醇平衡、調節(jié)雌激素水平、降低低密度脂蛋白、甘油三酯、調節(jié)脂質代謝,糾正血脂異常。
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