【摘要】：目的:探討mi R-23a、mi R-24-2、mi R-27a、mi R-223在原發(fā)性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎(gouty arthritis,GA)患者的表達(dá)及臨床意義。方法:(1)實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-q PCR)(Taq Man探針?lè)?檢測(cè)急性期痛風(fēng)患者(acute gout,AG)、間歇期痛風(fēng)患者(intercritical gout,IG)和健康體檢者(heathy control,HC)的外周血單個(gè)核細(xì)胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中mi R-23a、mi R-24-2、mi R-27a、mi R-223表達(dá)水平,并收集GA和HC的臨床資料及實(shí)驗(yàn)室檢查指標(biāo)。(2)RT-q PCR(Taq Man探針?lè)ǚ謩e檢測(cè)HC的PBMCs經(jīng)濃度為100μg/ml的尿酸鹽(monosodium urate,MSU)刺激組和磷酸鹽緩沖液(phosphate buffered saline,PBS)對(duì)照組刺激12h后mi R-23a、mi R-24-2、mi R-27a、mi R-223的表達(dá)水平。(3)RT-q PCR檢測(cè)mi R-223的靶基因NLRP3的m RNA在刺激組和對(duì)照組的PBMCs中的表達(dá)。(4)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)檢測(cè)刺激組和對(duì)照組的培養(yǎng)上清液中IL-1β的濃度并比較差異。(5)采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析,計(jì)量資料組間比較采用Wilcoxon秩和檢驗(yàn),MSU刺激后基因表達(dá)水平采用t檢驗(yàn),變量間的相性采用Spearman相關(guān)分析。結(jié)果:(1)mi R-23a、mi R-24-2、mi R-27a、mi R-223在三組中的表達(dá)存在差異并具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均0.05),進(jìn)一步兩兩比較發(fā)現(xiàn)mi R-23a、mi R-24-2、mi R-27a、mi R-223在AG組(0.006±0.023,0.986±1.313,0.086±0.288,8.665±17.396)和IG組(0.004±0.0251,0.277±2.087,0.0905±1.754,7.621±16.531)的表達(dá)均低于在HC組(0.180±0.629,4.595±4.273,0.489±2.474,25.992±75.905),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=34.690,11.334,9.762,11.387;P均0.01),mi R-223、mi R-27a在AG組的表達(dá)低于IG組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均0.01),mi R-23a、mi R-24-2在AG的表達(dá)低于IG組,但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(2)MSU(100μg/ml)刺激HC的PBMCs 12h后mi R-23a、mi R-24-2、mi R-27a、mi R-223的表達(dá)(0.0026±0.0004,1.2665±0.2112,0.0434±0.0028,0.335±0.201)較對(duì)照組(0.0168±0.0056,1.6256±0.2634,0.1644±0.0319,1.051±0.236)明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(T=-5.04,P0.01;T=-2.61,P0.05;T=-7.55,P0.01;T=-5.164,P0.01)。(3)MSU刺激組和對(duì)照組中mi R-223靶基因NLRP3的m RNA表達(dá)水平、培養(yǎng)上清液中IL-1β濃度(5.231±0.432,86.235±4.586)較空白對(duì)照組的表達(dá)(1.156±0.448,12.587±6.342)顯著增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=14.640,21.042;P0.01)。(4)Spearman相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)在GA的PBMCs中mi R-23a、mi R-24-2、mi R-27a的表達(dá)水平相互之間均呈正相關(guān)(r=0.548,0.690,0.523;P均0.01);mi R-24-2、mi R-223在GA的PBMCs的表達(dá)均與總膽固醇呈正相關(guān)(r=0.46,0.45;P均0.05),mi R-24-2的表達(dá)與載脂蛋白B100濃度呈正相關(guān)(r=0.44;P0.05)。結(jié)論:mi R-23a、mi R-24-2、mi R-27a、mi R-223在原發(fā)性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎患者及在經(jīng)MSU刺激正常人PBMCs中的表達(dá)均顯著降低,其中mi R-223的低表達(dá)減弱了對(duì)NLRP3炎性體的抑制作用,從而促使炎癥因子IL-1β的釋放,提示其可能參與原發(fā)性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的炎癥反應(yīng)的調(diào)節(jié),同時(shí)mi R-24-2、mi R-223可能還參與原發(fā)性痛風(fēng)患者的脂代謝的調(diào)節(jié)。
【圖文】：

AmiRNA合成圖

成熟MicroRNA合成圖
【學(xué)位授予單位】：川北醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R589.7

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2548879