【摘要】：第一部分BMP9在小鼠下丘腦的表達(dá)和分布目的:檢測(cè)BMP9基因在普食(NCD)和高脂飲食(HFD)喂養(yǎng)的C57BL/6J小鼠及db/db鼠下丘腦分布。方法:利用Western blot技術(shù)檢測(cè)普食和高脂喂養(yǎng)的12周后C57BL/6J以及普食喂養(yǎng)12周后db/db鼠(NCD組、HFD組、db/db組,均n=4)下丘腦BMP9基因表達(dá)水平。結(jié)果:高脂C57BL/6J小鼠下丘腦BMP9蛋白較普食組明顯下降(p0.05),db/db鼠下丘腦BMP9蛋白較普食組明顯下降(p0.01)。結(jié)論:高脂飲食和肥胖降低下丘腦BMP9蛋白水平。第二部分中樞性BMP9過(guò)表達(dá)對(duì)小鼠肝糖代謝影響目的:側(cè)腦室給予普食(NCD)和高脂飲食(HFD)喂養(yǎng)的C57BL/6J小鼠Ad-BMP9或Ad-GFP,初步探討中樞性BMP9過(guò)表達(dá)對(duì)小鼠肝臟葡萄糖代謝的影響。方法:7周齡健康雄性C57BL/6J小鼠90只,分別適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后,隨機(jī)分為普食喂養(yǎng)組(ND組,n=40)和高脂喂養(yǎng)組(HFD組,n=40),均喂養(yǎng)12周。于12周末分別隨機(jī)側(cè)腦室注射Ad-BMP9或Ad-GFP,分為普食空載組(NCD+Ad-GFP組,n=20),普食BMP9病毒組(NCD+Ad-BMP9組,n=20),高脂空載病毒組(HFD+Ad-GFP組,n=20),高脂BMP9病毒組(HFD+Ad-BMP9組,n=20)。利用Western blot檢測(cè)測(cè)BMP9蛋白表達(dá)水平。測(cè)定空腹/餐后血糖、攝食及體重變化、血壓、血漿甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、游離脂肪酸(FFA)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、呼吸商等,利用腹腔葡萄糖耐量試驗(yàn)(IPGTT)、胰島素耐量試驗(yàn)(ITT)、高胰島素-正葡萄糖鉗夾及組織葡萄糖攝取試驗(yàn)評(píng)價(jià)各組小鼠肝糖代謝、胰島素敏感和組織葡萄糖攝取能力變化。結(jié)果:普食組給予Ad-BMP9后下丘腦BMP9蛋白水平顯著升高,高脂組給予Ad-BMP9后下丘腦BMP9蛋白水平也顯著增加。NCD+Ad-BMP9組與NCD+Ad-GFP組相比,小鼠血糖、攝食及體重、血壓、血漿TG、TC、FFA、ASL、ALT水平均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;HFD+Ad-GFP組較NCD+Ad-GFP組小鼠上述指標(biāo)均明顯升高(p0.05);HFD+Ad-BMP9組較HFD+Ad-GFP組小鼠體重、攝食、餐后血糖、收縮壓、舒張壓、血漿TG、TC、FFA水平顯著升高(p0.05),但ALT、AST水平兩組相比無(wú)明顯差異。NCD+Ad-BMP9組與NCD+Ad-GFP組小鼠相比,RER、VO2無(wú)明顯差異;而HFD+Ad-BMP9組較HFD+Ad-GFP組小鼠VO2顯著升高(p0.05),RER較HFD+Ad-GFP組降低(p0.05)。在鉗夾穩(wěn)態(tài)期,NCD+Ad-BMP9組與NCD+Ad-GFP組小鼠相比,葡萄糖輸入率(GIR)、葡萄糖清除率(GRd)及肝糖生成(HGP)均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05);而HFD+Ad-BMP9組較HFD+Ad-GFP組小鼠GIR、GRd顯著升高(p0.01),HGP則顯著下降(p0.01)。NCD+Ad-BMP9組與NCD+Ad-GFP組小鼠相比,脂肪組織和肌肉組織葡萄糖攝取無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);而HFD+Ad-BMP9組較HFD+Ad-GFP組小鼠脂肪組織葡萄糖攝取無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05),肌肉組織葡萄糖攝取顯著升高(p0.05)。結(jié)論:中樞性BMP9改善飲食誘導(dǎo)的胰島素抵抗和降低外周肝糖產(chǎn)生。第三部分中樞性BMP9基因過(guò)表達(dá)對(duì)高脂喂養(yǎng)小鼠下丘腦相關(guān)信號(hào)通路和肝糖異生酶的影響目的:通過(guò)檢測(cè)側(cè)腦室給予的Ad-GFP或Ad-BMP9的普食和高脂喂養(yǎng)小鼠肝臟糖異生關(guān)鍵酶和下丘腦胰島素信號(hào)通路包括胰島素受體(Ins R)、和蛋白激酶B(AKT)以及下丘腦雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和p70核糖體蛋白S6激酶(p70S6K),研究中樞性BMP9基因過(guò)表達(dá)對(duì)下丘腦胰島素信號(hào)通路及mTOR信號(hào)通路和肝臟糖異生酶的影響。方法:20只C57BL/6J小鼠,隨機(jī)分為普食喂養(yǎng)組(NCD組,n=10)和高脂喂養(yǎng)組(HFD組,n=10),均喂養(yǎng)12周。于12周末分別隨機(jī)側(cè)腦室注射Ad-BMP9或Ad-GFP,分為普食空載組(NCD+Ad-GFP組,n=5),普食BMP9病毒組(NCD+Ad-BMP9組,n=5),高脂空載病毒組(HFD+Ad-GFP組,n=5),高脂BMP9病毒組(HFD+Ad-BMP9組,n=5);利用實(shí)時(shí)的熒光定量PCR檢測(cè)各組小鼠側(cè)腦室給予腺病毒后第7天下丘腦NPY、Ag RP、POMC的m RNA,利用Western blot檢測(cè)下丘腦Ins R、AKT、mTOR、p70S6K和肝臟PEPCK、G6Pase的蛋白表達(dá),利用免疫組化各組小鼠下丘腦c-fos水平。利用免疫熒光檢測(cè)各組在基礎(chǔ)狀態(tài)下和胰島素刺激下下丘腦弓狀核PIP3的形成情況。結(jié)果:NCD+Ad-BMP9組與NCD+Ad-GFP組小鼠相比,下丘腦NPY、Ag RP、POMC的m RNA表達(dá)均無(wú)明顯差異(p0.05);HFD+Ad-BMP9組小鼠下丘腦NPY m RNA表達(dá)顯著低于HFD+Ad-GFP組(p0.01),下丘腦POMC m RMA顯著高于HFD+Ad-GFP(p0.01),而下丘腦Ag RP m RNA兩組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05)。NCD+Ad-BMP9組與NCD+Ad-GFP組小鼠相比下丘腦Ins R、AKT、mTOR、p70S6K蛋白磷酸化水平及肝臟PEPCK、G6Pase m RNA和蛋白水平無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05);HFD+Ad-BMP9組小鼠下丘腦Ins R、AKT、p70S6K蛋白磷酸化水平顯著高于HFD+Ad-GFP組(p0.05或p0.01),肝臟PEPCK、G6PAse m RNA和蛋白水平均顯著低于HFD+Ad-GFP組(p0.05或p0.01)。NCD+Ad-BMP9組和NCD+Ad-GFP組小鼠下丘腦有c-fos表達(dá),以室旁核最為密集,但兩組差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05);HFD+Ad-BMP9組小鼠下丘腦室旁核Fos免疫反應(yīng)性陽(yáng)性神經(jīng)元數(shù)目較HFD+Ad-GFP組顯著增加,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。高脂飲食下,在基礎(chǔ)狀態(tài)下,Ad-BMP9組與Ad-GFP組下丘腦ARC的中度和高度PIP3形成有所增加,但沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)(p0.05),而在胰島素刺激下,Ad-BMP9組較Ad-GFP組下丘腦ARC的PIP3形成明顯增加(p0.05)。結(jié)論:在普食狀態(tài)下,中樞性BMP9基因過(guò)表達(dá)對(duì)小鼠下丘腦胰島素信號(hào)通路、肝臟糖異生酶和下丘腦mTOR信號(hào)通路無(wú)明顯影響;在高脂飲食下,小鼠下丘腦胰島素信號(hào)通路及PIP3分子激活及肝臟糖異生增加,下丘腦mTOR通路激活,中樞性BM9基因過(guò)表達(dá)可以激活下丘腦胰島素信號(hào)通路和抑制肝糖糖異生,調(diào)節(jié)mTOR通路,激活c-fos活性,增加PIP3的形成。第四部分中樞性BMP9通過(guò)mTOR通路改善高脂誘導(dǎo)胰島素抵抗目的:探討中樞性BMP9基因過(guò)表達(dá)改善下丘腦胰島素抵抗和肝糖產(chǎn)生是否依賴于下丘腦mTOR通路方法:40只高脂喂養(yǎng)12周的C57BL/6J小鼠,構(gòu)建右側(cè)腦室微量給藥系統(tǒng),隨機(jī)分為HFD+Ad-GFP組(n=20)和HFD+Ad-BMP9組(n=20),第7d禁食6h通過(guò)側(cè)腦室給藥系統(tǒng)注射雷帕霉素(Rapamycin,20ug/2ul)和二甲基亞砜(Dimethyl sulfoxide,DMSO,分組為:Ad-GFP+DMSO組(n=10),Ad-GFP+rapamycin組(n=10),Ad-BMP9+DMSO組(n=10),Ad-BMP9+rapamycin組(n=10)。利用葡萄糖耐量試驗(yàn)和胰島素耐量試驗(yàn)評(píng)價(jià)各組小鼠葡萄糖耐量和胰島素敏感性變化。利用PCR檢測(cè)肝臟PEPCK和G6Pase m RNA水平,利用Western blot檢測(cè)下丘腦mTOR、p70S6K和肝臟PEPCK、G6Pase的蛋白表達(dá)。結(jié)果:葡萄糖耐量試驗(yàn)和胰島素耐量試驗(yàn)中,Ad-BMP9+DMSO組較Ad-GFP+rapamycin組、Ad-GFP+DMSO組和Ad-BMP9+rapamycin組小鼠血糖和曲線下面積顯著減少(p0.05)。Ad-BMP9+DMSO組小鼠下丘腦mTOR、p70S6K蛋白磷酸化水平表達(dá)顯著高于Ad-GFP+rapamycin組、Ad-GFP+DMSO組和Ad-BMP9+rapamycin組(p0.05或p0.01),肝臟PEPCK、G6Pase m RNA和蛋白水平均顯著低于HFD+Ad-GFP組、Ad-GFP+rapamycin組、Ad-GFP+DMSO組和Ad-BMP9+rapamycin(p0.05或p0.01)。結(jié)論:中樞性BMP9基因過(guò)表達(dá)可通過(guò)下丘mTOR通路改善高脂飲食誘導(dǎo)的小鼠肝臟胰島素抵抗和降低肝臟糖異生,增強(qiáng)胰島素敏感性。
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R587.1

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 張惠,張建,蘇昕,王廷濤,陳厚芹;胰島素抵抗與妊娠高血壓綜合征的關(guān)系[J];華北煤炭醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2000年04期

2 傅誠(chéng)強(qiáng);胰島素抵抗和擇期性手術(shù)[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).外科學(xué)分冊(cè);2001年03期

3 賈偉平;中國(guó)人群胰島素抵抗的狀況[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).內(nèi)分泌學(xué)分冊(cè);2002年04期

4 寧光;李長(zhǎng)貴;洪潔;湯正義;李果;龔艷春;彭怡文;郭冀珍;沈衛(wèi)峰;商淑華;羅邦堯;陳家倫;;胰島素抵抗基礎(chǔ)和臨床研究[J];醫(yī)學(xué)研究通訊;2002年11期

5 姚小皓,沈凱,李學(xué)軍;胰島素對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的影響[J];生理科學(xué)進(jìn)展;2003年01期

6 柯紅林;;2型糖尿病中胰島素抵抗發(fā)生機(jī)制的研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(老年醫(yī)學(xué)分冊(cè));2003年03期

7 常桂娟;胰島素抵抗的環(huán)境因素[J];現(xiàn)代診斷與治療;2004年02期

8 米杰 ,張力;胰島素抵抗[J];中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2004年04期

9 王繼旺,張素華,任偉,杜娟,陳靜,包柄楠,汪志紅,苗青;吸煙與胰島素抵抗的相關(guān)性調(diào)查與分析[J];中國(guó)公共衛(wèi)生;2004年08期

10 陽(yáng)柳雪;劉紅;;可溶性腫瘤壞死因子受體2與胰島素抵抗[J];中國(guó)醫(yī)學(xué)文摘.內(nèi)科學(xué);2004年01期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 陳艷秋;宗敏;華莉;李臻;肖菲;孫建琴;;2型糖尿病患者肝臟脂肪與胰島素抵抗的關(guān)系[A];中國(guó)營(yíng)養(yǎng)學(xué)會(huì)老年?duì)I養(yǎng)分會(huì)第七次全國(guó)營(yíng)養(yǎng)學(xué)術(shù)交流會(huì)“營(yíng)養(yǎng)與成功老齡化”暨國(guó)家級(jí)繼續(xù)教育項(xiàng)目“神經(jīng)系統(tǒng)疾病醫(yī)學(xué)營(yíng)養(yǎng)治療”資料匯編[C];2010年

2 陳艷秋;陳敏;宗敏;華莉;李臻;張?chǎng)我?孫建琴;;2型糖尿病患者肝臟脂肪分布與胰島素抵抗[A];老年?duì)I養(yǎng)研究進(jìn)展與老年?duì)I養(yǎng)供餐規(guī)范研討會(huì)暨糖尿病腎病醫(yī)學(xué)營(yíng)養(yǎng)治療進(jìn)展學(xué)習(xí)班資料匯編[C];2011年

3 宋曉敏;耿秀琴;郭長(zhǎng)磊;;胰島素抵抗幾個(gè)相關(guān)因素在公安人群中的狀態(tài)與分析[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第六次全國(guó)內(nèi)分泌學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2001年

4 游捷;陳瑤;黃培基;林哲章;;血清可溶性腫瘤壞死因子受體與胰島素抵抗的關(guān)系[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第六次全國(guó)內(nèi)分泌學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2001年

5 謝彬;陳上云;郭堅(jiān);劉薇;勞干誠(chéng);;監(jiān)測(cè)真胰島素觀察胰島素抵抗與胰島素敏感性[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第六次全國(guó)內(nèi)分泌學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2001年

6 尹義輝;王經(jīng)武;;消胰抗治療胰島素抵抗的臨床研究[A];第七次全國(guó)中醫(yī)糖尿病學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2003年

7 呂圭源;劉賽月;;中藥抗胰島素抵抗研究進(jìn)展[A];浙江省2005年中藥學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2005年

8 王曉靜;劉正齊;;一種簡(jiǎn)便實(shí)用且較準(zhǔn)確評(píng)估胰島素抵抗的新方法[A];全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合內(nèi)分泌代謝病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

9 白秀平;李宏亮;楊文英;肖建中;王冰;杜瑞琴;樓大鈞;;脂肪分存順序與肝臟及肌肉胰島素抵抗的關(guān)系[A];2006年中華醫(yī)學(xué)會(huì)糖尿病分會(huì)第十次全國(guó)糖尿病學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2006年

10 孫勤;李伶;楊剛毅;歐陽(yáng)凌云;陳渝;劉華;唐毅;Gunther Boden;;小鼠擴(kuò)展胰島素鉗夾術(shù)的建立[A];2006年中華醫(yī)學(xué)會(huì)糖尿病分會(huì)第十次全國(guó)糖尿病學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2006年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 ;胰島素小常識(shí)[N];保健時(shí)報(bào);2004年

2 ;胰島素抵抗，，怎么辦？[N];解放日?qǐng)?bào);2004年

3 中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院老年病科副教授 陳化;什么是“胰島素抵抗”[N];健康報(bào);2001年

4 張家慶 （教授）;適度鍛煉身體改善胰島素抵抗[N];上海中醫(yī)藥報(bào);2003年

5 本報(bào)記者 韓曉英;注射胰島素會(huì)成癮嗎[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2002年

6 張怡梅 劉 斌;惡性腫瘤與胰島素抵抗[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2003年

7 健康時(shí)報(bào)特約記者 陳錦屏;胖人易發(fā)“胰島素抵抗”[N];健康時(shí)報(bào);2007年

8 殳雪怡;胰島素抵抗 有辦法“抵抗”嗎[N];家庭醫(yī)生報(bào);2007年

9 劉文山;胰島素抵抗[N];家庭醫(yī)生報(bào);2007年

10 孟懷東;“致命四重奏”與胰島素抵抗[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2007年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 殷青青;胰島素抵抗大鼠腦組織損傷機(jī)制以及番茄紅素的保護(hù)作用研究[D];山東大學(xué);2015年

2 施琳穎;二氫楊梅素通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞自噬改善骨骼肌胰島素抵抗的作用及其機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

3 隆敏;下丘腦室旁核神經(jīng)肽Y長(zhǎng)期過(guò)表達(dá)誘導(dǎo)外周胰島素抵抗作用機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

4 黃文輝;高胰島素抑制腎臟尿酸排泄的基礎(chǔ)與臨床研究以及氯沙坦的干預(yù)機(jī)制[D];蘭州大學(xué);2015年

5 付鋒;缺血后心肌胰島素抵抗促發(fā)缺血性心力衰竭及其機(jī)制[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

6 王宗保;NO-1886對(duì)糖脂代謝的影響及機(jī)制研究[D];南華大學(xué);2014年

7 張真穩(wěn);小檗堿協(xié)同甘丙肽降低2型糖尿病鼠脂肪組織胰島素抵抗的實(shí)驗(yàn)研究[D];揚(yáng)州大學(xué);2015年

8 何奕多;TNF-α對(duì)脂聯(lián)素多聚化修飾及分泌調(diào)控的研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

9 陳璇;白虎二地湯調(diào)控胰島素信號(hào)通路改善2型糖尿病胰島素抵抗的研究[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2015年

10 許鳳;海藻中新型PTP1B抑制劑對(duì)db/db糖尿病模型的改善與作用機(jī)制的研究[D];青島大學(xué);2016年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 李晨;辛伐他汀、胰島素聯(lián)合用藥對(duì)糖尿病大鼠下頜骨骨折愈合的影響[D];河北聯(lián)合大學(xué);2014年

2 賈曉嬌;血清Vaspin、u樗�、脂联素灾R焉鍰悄蠆』頰咧興郊?jí)坞淫o核氐摯溝墓叵礫D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

3 黃聲;胰島素抵抗與認(rèn)知功能障礙的關(guān)系研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

4 牛尚梅;骨骼肌PGC-1α在高脂導(dǎo)致的胰島素抵抗中的作用機(jī)制[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

5 安雨;血清視黃醇結(jié)合蛋白-4與2型糖尿病及肥胖的相關(guān)性研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

6 陳旭;高胰島素水平導(dǎo)致肥胖相關(guān)機(jī)制研究[D];鄭州大學(xué);2015年

7 劉晨曦;津力達(dá)改善棕櫚酸誘導(dǎo)的肌細(xì)胞胰島素抵抗的機(jī)制[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

8 段力園;津力達(dá)顆粒對(duì)高脂誘導(dǎo)的HepG2細(xì)胞胰島素抵抗影響的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

9 張東蛟;津力達(dá)對(duì)高脂誘導(dǎo)的胰島素抵抗ApoE基因敲除小鼠脂肪組織中脂代謝的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

10 李貴平;黃芪甲苷對(duì)高胰島素誘導(dǎo)人腎小球系膜細(xì)胞損傷的保護(hù)作用及機(jī)制研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

本文編號(hào)：2513415