【摘要】：肥胖會導致脂肪組織中各種免疫細胞數量的失衡,肥大細胞(MCs)在肥胖個體的脂肪組織中數量明顯增多,而MCs穩(wěn)定劑木犀草素(LU)可以降低高脂飲食小鼠附睪脂肪組織(EAT)中MCs的數量,并改善肥胖和胰島素抵抗的發(fā)展。此前的研究是利用甲苯胺藍染色半定量EAT中MCs數量的變化。甲苯胺藍染色的特異性和統(tǒng)計精密度都存在一定的欠缺,為了更精確地研究在肥胖過程中脂肪組織中MCs數量的變化,文章建立了高精密度的流式細胞熒光分選(fluorescence activated cell sorting,FACS)技術,并研究了低脂、高脂和高脂補充LU組小鼠EAT中MCs變化情況。FACS分析定量結果顯示,MCs在高脂飲食誘導下明顯升高,而飲食補充LU可以明顯降低MCs的數目。另外,EAT中MC蛋白酶的定量聚合酶鏈式反應(polymerase chain reaction,PCR)結果也支持了FACS分析的結果。因此,利用FACS分析脂肪組織中MCs數目的精確變化,為進一步研究MCs在肥胖中的作用機制提供技術支持。
[Abstract]:Obesity leads to an imbalance in the number of immune cells in adipose tissue, and mast cell (MCs) increases significantly in adipose tissue of obese individuals. Luteolin (LU), a MCs stabilizer, could decrease the number of MCs in the (EAT) of epididymal adipose tissue of mice with high fat diet, and improve the development of obesity and insulin resistance. Previous studies have used toluidine blue to dye changes in the number of MCs in semi-quantitative EAT. The specificity and statistical precision of toluidine blue staining are deficient. In order to study the change of MCs quantity in adipose tissue more accurately, a high precision flow cytometry (FCM) technique was established for sorting (fluorescence activated cell sorting,FACS. The changes of MCs in EAT of low fat, high fat and high fat supplemented LU mice were studied. The quantitative results of FACS analysis showed that MCs increased significantly under the induction of high fat diet, while dietary LU supplementation significantly decreased the number of MCs. In addition, the results of quantitative polymerase chain reaction (polymerase chain reaction,PCR) of MC protease in EAT also support the results of FACS analysis. Therefore, the accurate change of MCs in adipose tissue is analyzed by FACS, which provides technical support for further study on the mechanism of MCs in obesity.
【作者單位】： 合肥工業(yè)大學生物與醫(yī)學工程學院;
【基金】：國家自然科學基金資助項目(31171315)
【分類號】：R589.2

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