【摘要】：目的骨質(zhì)疏松是一種慢性并且需要長期治療的影響全世界超過20億人口的疾病,骨質(zhì)疏松是由于骨代謝失衡導致骨強度降低,骨組織微結(jié)構(gòu)的破壞,骨脆性增加并且易于骨折的全身系統(tǒng)性疾病。因此合理有效的預防和治療骨質(zhì)疏松是減少患者痛苦和減輕社會負擔必不可少的研究方向,PTH(1-34)是治療骨質(zhì)疏松最具前景的代表性藥物,但其作用機制目前仍不完全清楚。本文借助流式細胞篩查技術和酶聯(lián)免疫吸附試驗等相關方法,通過采集絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松患者外周血標本,初步研究PTH(1-34),阿侖膦酸鈉對絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松患者外周血間充質(zhì)干細胞(MSCs),骨代謝標記物等指標的影響,為PTH(1-34)治療骨質(zhì)疏松提供新的依據(jù)。材料與方法本研究嚴格執(zhí)行實驗對象的納入和排除標準,通過骨科門診和病房采集80例未經(jīng)治療的絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松病人平均納入PTH(1-34)和阿侖膦酸鈉基線組并分別采集外周血樣本5ml,兩組經(jīng)過PTH(1-34)和阿侖膦酸鈉短期治療一個月后再次采集病人外周血樣本5ml,且各組樣本通過流式細胞儀分析外周血中MSCs數(shù)量(流式熒光單克隆抗體CD73,CD90,CD105,CD45),酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)檢測樣本血清骨代謝標記物I型原膠原氨基氮端多肽(P1NP)和I型膠原羧基末端肽(CTX)水平,雙能X線骨密度檢測并分析所有實驗對象脊柱骨密度值,比較PTH(1-34)和阿侖膦酸鈉治療前后者上述參數(shù)之間的差異。結(jié)果本研究正常組,PTH(1-34)組,阿侖膦酸鈉組入組實驗對象年齡分別為65±4歲,67±4歲,66±5歲,平均體重62.7±2.8,65±4.2,64.3±6.4kg,平均身高154.8±5.5,157.1±6.0,155.2±4.8cm,平均身高體重指數(shù)(BMI)26.28±2.38 kg/m2,26.45±2.61kg/m2,27.74±2.82 kg/m2,入組對象年齡,體重,身高,身高體重指數(shù)經(jīng)過統(tǒng)計學分析無統(tǒng)計學差異。ELISA檢測骨代謝標記物結(jié)果,正常組,PTH(1-34)基線組,PTH(1-34)month1組,阿侖膦酸鈉基線組,阿侖膦酸鈉month1組入組對象血清CTX水平分別為0.31±0.10ng/ml,0.43±0.12ng/ml,0.60±0.18ng/ml,0.44±0.13ng/ml,0.13±0.04ng/ml,方差分析結(jié)果F=60.20,P0.0001。PTH(1-34)基線組血清CTX水平明顯低于PTH(1-34)month1組組且組間有統(tǒng)計學差異(p0.01),阿侖膦酸鈉基線組血清CTX水平明顯高于阿侖膦酸鈉month1組且組間有統(tǒng)計學差異(p0.01)。血清PINP水平分別為60.76±15.93 ng/ml,46.54±13.57ng/ml,156.17±20.42ng/ml,49.05±13.14ng/ml,36.05±8.62ng/ml,方差分析結(jié)果F=279.6,P0.0001。PTH(1-34)month1組血清PINP水平明顯高于PTH(1-34)基線組且組間有統(tǒng)計學差異(p0.01),阿侖膦酸鈉基線組血清PINP水平明顯高于阿侖膦酸鈉month1組且組間有統(tǒng)計學差異(p0.01)。脊柱骨密度值1.5±0.5,3.2±0.5,2.9±0.4,3.4±0.4,3.3±0.3,方差分析結(jié)果F=96.69,P0.0001。PTH(1-34)基線組脊柱骨密度值明顯高于PTH(1-34)month1組且組間有統(tǒng)計學差異(p0.01),阿侖膦酸鈉基線組脊柱骨密度值與阿侖膦酸鈉month1組間無統(tǒng)計學差異(p=0.61)。外周循環(huán)MSCs數(shù)量9±3,3±2,36±11,3±2,2±1,方差分析結(jié)果F=287.7,P0.0001。PTH(1-34)month1組外周循環(huán)MSCs數(shù)量明顯高于PTH(1-34)基線組且組間有統(tǒng)計學差異(p0.01),阿侖膦酸鈉基線組外周循環(huán)MSCs數(shù)量與阿侖膦酸鈉month1組間無統(tǒng)計學差異(p=0.82)。結(jié)論通過實驗對象收集分組和流式細胞學分析,酶聯(lián)免疫吸附試驗等相關研究,經(jīng)合理統(tǒng)計學分析可得:1.嚴重骨質(zhì)疏松患者外周循環(huán)MSCs數(shù)量衰竭,低循環(huán)MSCs可能是骨質(zhì)疏松患者體內(nèi)骨形成低下的參與因素或警戒指標。2.短期PTH(1-34)治療嚴重骨質(zhì)疏松患者后,骨吸收標記物水平上升,骨形成標記物水平上升,外周循環(huán)MSCs數(shù)量增加,高循環(huán)MSCs可能表明骨質(zhì)疏松患者體內(nèi)骨代謝失衡正在恢復,但不足以解決骨代謝失衡的骨質(zhì)疏松,需要更長期的治療和觀察。3.短期雙磷酸鹽(阿侖膦酸鈉)治療嚴重骨質(zhì)疏松,外周循環(huán)MSCs較治療前無統(tǒng)計學差異,骨吸收標記物水平下降,骨形成標記物水平輕度下降。4.阿侖膦酸鈉抗骨吸收作用對循環(huán)MSCs數(shù)量基本無影響,因此PTH(1-34)治療后高循環(huán)MSCs是由于PTH(1-34)潛在作用機制導致的。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：天津醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R580

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本文編號：2272033