紅景天苷對(duì)糖尿病大鼠腎臟Nrf2、γ
本文關(guān)鍵詞:紅景天苷對(duì)糖尿病大鼠腎臟Nrf2、γ-GCS、PPAR-γ表達(dá)的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
《河北醫(yī)科大學(xué)》 2014年
紅景天苷對(duì)糖尿病大鼠腎臟Nrf2、γ-GCS、PPAR-γ表達(dá)的影響
張雪松
【摘要】:目的:目前,糖尿病腎病(Diabetic Nephropathy, DN)已成為終末期腎臟病的主要原因之一,對(duì)DN發(fā)生發(fā)展機(jī)制的研究就顯得尤為重要,但至今尚未完全闡明,其機(jī)制可能與遺傳、糖代謝、血流動(dòng)力學(xué)、炎癥及細(xì)胞因子等因素有關(guān)。探討其相關(guān)機(jī)制可以為糖尿病腎病防治提供新的理論依據(jù)。已有研究證實(shí),氧化應(yīng)激與糖尿病腎病的發(fā)病密切相連。高糖狀態(tài)所致的氧化應(yīng)激可促使活性氧簇(Reactive oxygen species,ROS)產(chǎn)生過多,誘導(dǎo)炎性介質(zhì)和細(xì)胞因子生成,使細(xì)胞外基質(zhì)(Extracellular matrix,ECM)合成增加,加速腎小球硬化。長期的高血糖使紅細(xì)胞的攜氧能力下降,組織細(xì)胞H2O2、O2-等生成增多,谷胱甘肽(GSH)減少,影響腎臟的結(jié)構(gòu)和功能。Nrf2/ARE信號(hào)通路是機(jī)體重要的內(nèi)源性保護(hù)通路,該通路被認(rèn)為是調(diào)控體內(nèi)眾多抗氧化成分的關(guān)鍵通路,具有平衡內(nèi)環(huán)境的氧化-還原狀態(tài)、抗炎等生物作用。Nrf2/ARE信號(hào)通路激活使下游Ⅱ相解毒酶及抗氧化酶基因轉(zhuǎn)錄增加,如谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS),增加機(jī)體對(duì)氧化應(yīng)激的抵抗。過氧化物酶體增殖物激活受體(PPARs)是核轉(zhuǎn)錄因子超家族的成員,其中PPAR-γ與腎臟關(guān)系十分密切。PPAR-γ的激活與抑制對(duì)維持機(jī)體功能狀態(tài)具有重要意義。目前已知的拮抗劑較局限,如BADGE、GW9662等藥物;PPAR-γ的激動(dòng)劑主要包含兩類,即天然配體與合成配體,前者如15d-PGJ2等,后者主要包括噻唑烷二酮類藥物等。并且已有研究顯示Nrf2/ARE信號(hào)通路與PPAR-γ具有某些內(nèi)在聯(lián)系。紅景天苷作為一種中藥提取物,有著廣泛的藥理作用,如抗氧化、抗炎、抗腫瘤等。在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究中,紅景天苷是否可以通過激活Nrf2/ARE信號(hào)通路與PPAR-γ因子減輕糖尿病腎臟的氧化應(yīng)激反應(yīng),減少蛋白尿,文獻(xiàn)報(bào)道十分少見。本實(shí)驗(yàn)通過建立糖尿病大鼠模型,給予紅景天苷干預(yù),探討Nrf2/ARE信號(hào)通路與PPAR-γ因子之間的關(guān)系,揭示紅景天苷在糖尿病腎病發(fā)生發(fā)展中的作用,從而為治療糖尿病腎病提供新思路。 材料與方法:選擇SPF級(jí)健康雄性SD大鼠30只,體重200±20g,隨機(jī)選擇10只,即正常組(NC組),其余20只制造糖尿病大鼠模型。購買大鼠后先行適應(yīng)性喂養(yǎng),在腹腔注射鏈尿佐菌素(STZ)之前需空腹12小時(shí),造糖尿病大鼠模型即給予STZ65mg/kg。72小時(shí)后測(cè)血糖≥16.7mmol/L,尿糖≥3+即為造模成功。NC組給予等量檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液腹腔注射。造模成功隨機(jī)分為兩組,即DM組、SAL組。次日開始進(jìn)行治療,即給予紅景天苷30mg/kg·d灌胃。各組大鼠分籠喂養(yǎng),予普通飼料、自由進(jìn)食水,光照溫度濕度一定,共觀察12周。分別于6周、12周,隨機(jī)選取5只大鼠,留取24小時(shí)尿液,檢測(cè)蛋白定量,稱取體重后腹腔注射10%水合氯醛麻醉,心臟取血,檢測(cè)血糖、肌酐、尿素氮。雙腎去包膜稱重后,留取右腎,檢測(cè)CAT、GSH指標(biāo)及應(yīng)用RT-PCR方法檢測(cè)Nrf2、γ-GCS、PPAR-γ的表達(dá)。留取左腎,制作病理切片,分別采用HE和PAS染色方法,在光鏡下觀察大鼠腎臟組織病理變化;應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)腎臟中Nrf2、γ-GCS、PPAR-γ的表達(dá),結(jié)果應(yīng)用圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行半定量分析。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)若計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(X±S)表示,每組間比較采用單因素方差分析,兩組間比較采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),若數(shù)據(jù)不滿足正態(tài)性和方差齊則采用非參數(shù)檢驗(yàn),應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)分析軟件處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),以P0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果:統(tǒng)計(jì)三組大鼠體重與腎指數(shù)(腎重/體重)、24小時(shí)尿蛋白定量及血生化指標(biāo),以P0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。其中,糖尿病大鼠隨著病程進(jìn)展逐漸出現(xiàn)多飲、多食、多尿、消瘦、精神萎靡、反應(yīng)遲鈍等癥狀,24小時(shí)尿蛋白增加,SAL組大鼠尿蛋白定量較DM組減少,血糖、血肌酐及尿素氮亦較DM組下降(P0.05),具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。光鏡下觀察各組腎臟組織HE及PAS染色,NC組大鼠腎臟未見病變,隨著高血糖的持續(xù)存在,其余兩組在第6周時(shí)腎組織可有細(xì)胞及基質(zhì)輕度增生,病變隨時(shí)間推移逐漸加重,于第12周系膜基質(zhì)增生更為明顯。SAL組腎臟病變程度較DM組有所減輕。應(yīng)用圖像分析系統(tǒng)分析免疫組織化學(xué)染色切片,結(jié)果顯示:Nrf2、γ-GCS主要表達(dá)于腎小球、腎小管上皮細(xì)胞胞漿中,表達(dá)強(qiáng)度為:SAL組DM組NC組(P0.05);PPAR-γ主要在集合管、近端腎小管、遠(yuǎn)端腎小管的上皮細(xì)胞胞漿中表達(dá),腎小球少見表達(dá),該因子表達(dá)強(qiáng)度為: NC組DM組SAL組(P0.05)。氧化應(yīng)激指標(biāo)方面,腎臟中CAT與GSH在造模成功后6、12周后顯著減低,SAL組水平明顯高于DM組(P0.05)。RT-PCR結(jié)果顯示Nrf2、γ-GCS、PPAR-γ的表達(dá)趨勢(shì)與免疫組織化學(xué)結(jié)果一致。 結(jié)論:糖尿病大鼠造模成功后,,氧化應(yīng)激增強(qiáng),Nrf2/ARE信號(hào)通路激活,其下游抗氧化蛋白γ-GCS表達(dá)增強(qiáng),PPAR-γ的表達(dá)降低;SAL可以增強(qiáng)Nrf2/ARE信號(hào)通路的激活狀態(tài),誘導(dǎo)γ-GCS表達(dá),并可抑制PPAR-γ表達(dá),達(dá)到降低血糖、減少蛋白尿、減輕腎臟氧化應(yīng)激損傷的作用。
【關(guān)鍵詞】:
【學(xué)位授予單位】:河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號(hào)】:R587.2;R692
【目錄】:
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10 李毅敏;沈喜妹;嚴(yán)孫杰;;鹽酸二甲雙胍通過抑制PPARγ的表達(dá)拮抗成骨細(xì)胞的糖毒性損害[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第六次全國骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病學(xué)術(shù)會(huì)議暨中華醫(yī)學(xué)會(huì)骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病分會(huì)成立十周年論文匯編[C];2011年
中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條
1 袁松范;[N];中國醫(yī)藥報(bào);2005年
2 本報(bào)特約撰稿人 陸志城;[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2005年
3 明山;[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2002年
4 欒雪梅;[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2004年
5 東辰;[N];中國高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報(bào);2001年
6 ;[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2005年
7 馮世容;[N];中國醫(yī)藥報(bào);2000年
8 ;[N];中國高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報(bào);2001年
9 齊繼成;[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2002年
10 張濤;[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2002年
中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條
1 魏來;PPARγ1基因冠脈轉(zhuǎn)染對(duì)大鼠缺血再灌注心肌的保護(hù)作用及機(jī)制[D];中南大學(xué);2010年
2 陳韶華;PPARα基因V227A變異在肝細(xì)胞中的生物學(xué)作用及其機(jī)制研究[D];浙江大學(xué);2011年
3 張又枝;NF-κB和PPAR-γ交叉對(duì)話調(diào)控LDL穿胞及其在動(dòng)脈粥樣硬化中的作用[D];華中科技大學(xué);2013年
4 何諧;核受體PPARγ和FXR的抗炎機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2013年
5 姬媛媛;TLR4介導(dǎo)AngⅡ的致炎信號(hào)通路及PPARα/γ激動(dòng)劑的干預(yù)[D];西安交通大學(xué);2009年
6 鄭芬萍;LXRs激動(dòng)對(duì)PPARγ轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)脂肪因子表達(dá)的作用及機(jī)制研究[D];浙江大學(xué);2011年
7 王冠梁;熊果酸通過PPARα/γ信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路改善KKA~y小鼠胰島素抵抗的機(jī)制研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2011年
8 畢曉達(dá);PPARγ激動(dòng)劑抑制人Tenon's囊成纖維細(xì)胞增殖及TGF-β_2誘導(dǎo)細(xì)胞外基質(zhì)合成的研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2011年
9 路耘;PPAR-γ激動(dòng)劑對(duì)TGF-β誘導(dǎo)的肺泡上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的影響[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2009年
10 周波;PPAR β/δ對(duì)熱預(yù)處理血管內(nèi)皮細(xì)胞抗氧化損傷的保護(hù)作用及機(jī)制研究[D];中南大學(xué);2012年
中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條
1 曹園園;PPARγ和RXRα基因多態(tài)性與2型糖尿病易感性的分子流行病學(xué)研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2010年
2 關(guān)翹;PPARγ激動(dòng)劑用于治療阿爾茨海默氏癥的行為學(xué)和電生理學(xué)的研究[D];寧波大學(xué);2011年
3 楊旭紅;同型半胱氨酸硫內(nèi)酯誘導(dǎo)血管內(nèi)皮損傷機(jī)制與PPARγ關(guān)系的探討[D];中南大學(xué);2010年
4 楊洋;HDAC4對(duì)轉(zhuǎn)錄因子PPARγ活性在神經(jīng)元中的調(diào)節(jié)作用[D];南方醫(yī)科大學(xué);2010年
5 王全華;小檗堿抗Ang Ⅳ誘導(dǎo)的血管平滑肌細(xì)胞增殖與PPARα-NO信號(hào)通路關(guān)系研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2011年
6 李麗婷;PPARγ2內(nèi)源性配體對(duì)成骨細(xì)胞及骨髓細(xì)胞骨代謝相關(guān)基因表達(dá)的影響[D];山西醫(yī)科大學(xué);2011年
7 王素格;IR與PPARα/γ在NASH中變化及意義的實(shí)驗(yàn)性研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2010年
8 宋玉萍;PPARγ2基因Pro12Ala多態(tài)性與2型糖尿病及其血脂的關(guān)系[D];中國醫(yī)科大學(xué);2010年
9 馮彥景;游泳訓(xùn)練對(duì)胰島素抵抗小鼠PPAR-γ及糖代謝的影響[D];中南大學(xué);2010年
10 韓芳;PPARγ基因修飾對(duì)非酒精性脂肪性肝纖維化的防治機(jī)制[D];河北醫(yī)科大學(xué);2010年
本文關(guān)鍵詞:紅景天苷對(duì)糖尿病大鼠腎臟Nrf2、γ-GCS、PPAR-γ表達(dá)的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號(hào):222257
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