【摘要】：目的研究Wnt/β-catenin信號(hào)通路對(duì)orexin-1受體抑制劑介導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)成骨分化的影響。方法(1)分離提取SD大鼠股骨、脛骨的BMSCs,用流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞表型鑒定;(2)實(shí)驗(yàn)分組:對(duì)照組、10-5mol/L、10-6mol/L質(zhì)量濃度的orexin-1受體抑制劑溶液,于成骨誘導(dǎo)第5天免疫印跡法和實(shí)時(shí)熒光定量PCR法觀察Wnt/β-catenin信號(hào)通路關(guān)鍵靶點(diǎn)蛋白Dickkopf-1、Gsk3β、β-catenin以及基因Gsk3β、β-catenin mRNA表達(dá),以觀察Wnt信號(hào)通路對(duì)orexin-1受體抑制劑誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化的影響。結(jié)果 10~(-5)mol/L、10~(-6)mol/L的orexin-1受體抑制劑處理BMSCs5天后,Dickkopf-1、β-catenin和GSK3β蛋白表達(dá)升高,β-catenin和GSK3βmRNA表達(dá)升高。結(jié)論 orexin-1受體抑制劑促進(jìn)大鼠骨髓基質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞方向分化的作用可能與調(diào)控Wnt/β-catenin信號(hào)通路有關(guān)。
[Abstract]:Objective To investigate the effect of Wnt/beta-catenin signaling pathway on the osteogenic differentiation of rat bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) mediated by orexin-1 receptor inhibitors.Methods (1) BMSCs from femur and tibia of SD rats were isolated and identified by flow cytometry. Immunoblotting and real-time fluorescence quantitative PCR were used to observe the expression of Dickkopf-1, Gsk3beta, beta-catenin and Gsk3beta, beta-catenin mRNA in Wnt/beta-catenin signaling pathway and orexin-1 receptor inhibitor-induced osteogenic differentiation of rat bone marrow mesenchymal stem cells. Results Five days after BMSCs were treated with 10-5 mol/L and 10-6 mol/L orexin-1 receptor inhibitors, the expressions of Dickkopf-1, beta-catenin and GSK3 beta protein were increased, and the expressions of beta-catenin and GSK3 beta mRNA were increased. Conclusion The effect of orexin-1 receptor inhibitors on the differentiation of BMSCs into osteoblasts may be related to the regulation of Wnt/beta-cateni. N signaling pathway.
【作者單位】： 廣東醫(yī)科大學(xué)解剖學(xué)教研室;廣東醫(yī)科大學(xué)藥理學(xué)教研室;
【基金】：2014年廣東醫(yī)學(xué)院科研基金(2XJ1401P) 2015年湛江市非資助科技攻關(guān)計(jì)劃項(xiàng)目(2015B01083) 2015年湛江市資助科技攻關(guān)計(jì)劃(2015A01030)
【分類號(hào)】：R580

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本文編號(hào)：2187526