本文關鍵詞：GLP-1對3T3-L1前脂肪細胞分化的影響及其調控機制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《山東大學》 2013年

GLP-1對3T3-L1前脂肪細胞分化的影響及其調控機制研究

楊俊朋  

【摘要】：研究背景： 目前,肥胖及2型糖尿病已經(jīng)成為我國面臨的嚴重公共衛(wèi)生問題。作為代謝異常性疾病二者存在相近的發(fā)病基礎,脂質異常沉積與胰島素抵抗是其共同土壤[1]。盡管多種遺傳因素引起肥胖及胰島素抵抗,但環(huán)境因素中最主要的是長期能量攝入超過消耗,導致體內脂肪過多蓄積,引起肥胖及脂質代謝紊亂。肥胖在細胞層面上主要表現(xiàn)為已存在的脂肪細胞體積的肥大和由前脂肪細胞分化而來的脂肪細胞數(shù)量的增多。研究表明,脂肪細胞體積的肥大以及由前脂肪細胞分化而來的脂肪細胞數(shù)量的增多在成人肥胖的發(fā)生發(fā)展過程中均發(fā)揮著重要作用。然而,這兩種變化對脂質及糖代謝的作用有著顯著的差別。脂肪細胞體積的肥大與脂質代謝紊亂及胰島素抵抗密切相關；而脂肪細胞數(shù)量的增多(小體積脂肪細胞)則有助于改善高脂血癥,增加胰島素敏感性。胰高糖素肽-1(glucagon-like peptide-1, GLP-1)是由腸L細胞產(chǎn)生的目前己知作用最強的腸促胰島素分泌肽,除了調控血糖之外,還具有調節(jié)食欲、血壓、血脂,改善心功能、保護血管內皮功能等多重生物學功能。研究證明,GLP-1能夠上調脂肪細胞表面胰島素受體(IR-β)及胞內胰島素底物(IRS-1)的數(shù)量,促進葡萄糖轉運子4(GLUT-4)的表達,抑制脂肪細胞中炎癥通路激活等改善脂肪細胞體積的肥大,進而改善胰島素抵抗；然而,GLP-1對前脂肪細胞的分化的影響尚有爭議,其能否促進小體積脂肪細胞的形成尚缺乏足夠研究。本實驗以3T3-L1前脂肪細胞為實驗對象,在其分化過程中給予重組人GLP-1進行干預,研究GLP-1對前脂肪細胞分化的影響及其調控機制,以期為肥胖的防治提供新的作用靶點。 研究目的： 1.觀察GLP-1對3T3-L1前脂肪細胞分化過程中脂肪標志性蛋白LPL、 aP2及轉錄因子PPAR-γ、C/EBPa表達的影響。 2.觀察GLP-1對3T3-L1前脂肪細胞分化過程中脂質聚集以及脂肪細胞形態(tài)的影響。 3.初步探討GLP-1發(fā)揮上述作用的分子機制。 研究方法： 1.3T3-L1前脂肪細胞的培養(yǎng)與分化：在無菌條件下培養(yǎng)3T3-L1前脂肪細胞,采用傳統(tǒng)“雞尾酒”法來誘導前脂肪細胞分化。 2.給予3T3-L1前脂肪細胞不同濃度的GLP-1進行干預,用MTT法檢測其對細胞活力的影響,選取合適的濃度范圍。 3.RT-PCR及Western-blot檢測脂肪細胞脂肪標志性蛋白LPL、aP2及轉錄因子PPAR-γ、C/EBPa的表達。 4.油紅O染色檢測3T3-L1前脂肪細胞誘導分化第8天細胞內脂質聚集,用Image Pro plus5.02軟件分析脂肪細胞體積和數(shù)量的變化。 5. RT-PCR檢測誘導分化第8天時解偶聯(lián)蛋白-1(UCP-1)和肉堿脂酰轉移酶-1(CPT-1A)的mRNA表達。 6.Western-blot檢測Akt、P38、ERK1/2信號通路的變化。 研究結果： 1.GLP-1顯著促進脂肪細胞標志性蛋白LPL、aP2和轉錄因子PPAR-γ、 C/EBPa的mRNA水平,呈濃度依賴性及時間依賴性(P0.05)。 2.與對照組相比,GLP-1顯著促進轉錄因子PPAR-γ和脂肪細胞標志性蛋白aP2的蛋白表達,呈濃度依賴性及時間依賴性(P0.05)。 3.與對照組相比,GLP-1組且pAkt的蛋白表達水平顯著增加(P0.05),而pP38和pERK1/2的蛋白水平未見顯著變化。 4.油紅O染色結果顯示,100nM GLP-1顯著增加小體積脂肪細胞的形成(P0.05)。 5.與對照組和其他濃度組相比,100nM GLP-1組脂肪細胞中CPT-1A的mRNA表達水平顯著增加(P0.05),而UCP-1的mRNA表達無顯著變化。 研究結論： 1.在3T3-L1前脂肪細胞分化過程中,GLP-1呈劑量及時間依賴性的促進PPAR-γ、C/EBPα、LPL和aP2的表達。 2.Akt信號通路可能參與GLP-1的上述作用過程。 3.100nM GLP-1能促進更多小體積脂肪細胞的形成,該細胞中CPT-1A的mRNA表達顯著增加。

【關鍵詞】：
【學位授予單位】：山東大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R589.2
【目錄】：

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【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 白秀平;李宏亮;楊文英;;PPAR及其激動劑與脂肪酸代謝及胰島素抵抗[J];國際藥學研究雜志;2008年02期

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 顧浩;張燕玲;王耘;馬群;喬延江;;基于靶點網(wǎng)絡的參仙冰抗心肌缺血有效成分群研究[J];中華中醫(yī)藥雜志;2013年05期

2 楊悅;龔未;王偉偉;俞曉敏;胡松年;于軍;;寒冷誘導產(chǎn)熱時大鼠棕色脂肪能量代謝相關蛋白譜的變化(英文)[J];生物化學與生物物理進展;2010年10期

3 金甲;張鳳;楊玲玲;張杰鋒;湯杰;楊帆;;線粒體解偶聯(lián)劑的研究進展[J];生命科學;2013年07期

4 劉貴波;劉躍光;孫成;包海花;于建渤;;山奈酚對2型糖尿病大鼠糖脂代謝及胰島素抵抗的影響[J];實用臨床醫(yī)藥雜志;2012年09期

5 羅瑋;林杰義;張奕;歐陽靜儀;毛麗梅;;油酸對3T3-L1脂肪細胞脂聯(lián)素表達的影響及PPARγ介導機制[J];衛(wèi)生研究;2013年02期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 顧浩;張燕玲;王耘;馬群;喬延江;;基于靶點網(wǎng)絡的參仙冰抗心肌缺血有效成分群研究[A];第四屆全國中醫(yī)藥博士生優(yōu)秀論文專輯[C];2013年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 謝錫渝;DMN致肝損害小鼠模型肝組織基因表達譜變化及肝毒清對其干預作用的研究[D];廣州中醫(yī)藥大學;2011年

2 王海英;羅格列酮和復方丹參滴丸對糖尿病大鼠心肌病變的保護作用[D];吉林大學;2010年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 姚瑤;XH-211降脂，胰島素增敏活性的測定及其作用機制探討[D];南京醫(yī)科大學;2010年

2 呂彬;鈣信號通過IP3通路對正常與肥胖小鼠脂解作用的影響[D];西北農(nóng)林科技大學;2011年

3 陳冬妹;線粒體溫和解偶聯(lián)劑的發(fā)現(xiàn)及作用機制研究[D];華東師范大學;2011年

【二級參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 陳曉平,楊文英,卜石,蕭建中,劉雪莉,王娜,趙文惠;羅格列酮和二甲雙胍對高脂飼養(yǎng)造成的胰島素抵抗的影響[J];中華內科雜志;2004年04期

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王佰川;邵增務;;骨髓腔內脂質代謝異常對原發(fā)性骨質疏松癥的影響[J];國際骨科學雜志;2008年04期

2 侯賀憲;李保鍇;楊加保;陳軍;;游離脂肪細胞移植后的調控[J];中華損傷與修復雜志(電子版);2008年03期

3 徐無忌;莊洪;;骨康含藥血清對大鼠骨髓間充質干細胞成脂分化的影響[J];中國組織工程研究與臨床康復;2008年43期

4 許瑩瑩,金慰芳,王洪復;PPARγ2信號通路的調節(jié)及其對成骨特異因子的影響[J];中國骨質疏松雜志;2005年04期

5 李傳保;卜培莉;;脂質過氧化物酶體增殖物激活受體在脂質方面的研究進展[J];國外醫(yī)學(內科學分冊);2006年08期

6 王文加;焦平;許天敏;范偉全;張諾;王丁丁;徐煌;包曉群;顏煒群;;脂肪來源基質細胞的擴增及多分化潛能研究[J];中國老年學雜志;2007年05期

7 孫婷婷;張木勛;張建華;袁剛;;胰島素對3T3-L1脂肪細胞中極低密度脂蛋白受體基因表達的影響[J];中國生物化學與分子生物學報;2007年06期

8 方秋紅;稅朝祥;王堯堯;;人肺成纖維母細胞表達骨髓間充質干細胞特性的研究[J];中國實用內科雜志;2007年16期

9 王文飛;任桂萍;侯玉婷;李德山;;3T3-L1脂肪細胞膜FGF-21結合蛋白的初步鑒定[J];中國生物化學與分子生物學報;2008年07期

10 白愛紅;孫瑩璞;;小鼠胚胎干細胞向脂肪細胞分化的分子機制[J];國際生殖健康/計劃生育雜志;2009年02期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 趙亞萍;陳小慧;季晨博;高春林;張春梅;郭錫熔;陳榮華;;FFA、IL-6對人成熟脂肪細胞中NYGGF4基因表達的調控[A];第六屆江浙滬兒科學術會議暨兒科學基礎與臨床研究進展學術班論文匯編[C];2009年

2 陳小慧;朱春;季晨博;張春梅;朱金改;郭錫熔;趙亞萍;高春林;;TNFα對人脂肪細胞中STEAP4基因表達的調控[A];第六屆江浙滬兒科學術會議暨兒科學基礎與臨床研究進展學術班論文匯編[C];2009年

3 辜楠;郭錫熔;倪毓輝;王玢;張敏;劉峰;費莉;陳榮華;;Resistin結合多肽(RBP)拮抗Resistin基因在3T3-L1脂肪細胞分化及脂代謝中的作用[A];2006（第三屆）江浙滬兒科學術會議暨浙江省兒科學術年會論文匯編[C];2006年

4 辜楠;郭錫熔;潘曉勤;費莉;陳榮華;;Resistin基因過表達影響3T3-L1脂肪細胞的脂質代謝[A];第三屆長三角圍產(chǎn)醫(yī)學學術論壇暨2006年浙江省圍產(chǎn)醫(yī)學學術年會論文匯編[C];2006年

5 林曉儀;丁鶴林;;高糖對3T3-L1脂肪細胞葡萄糖轉運蛋白1表達的影響[A];2006年中華醫(yī)學會糖尿病分會第十次全國糖尿病學術會議論文集[C];2006年

6 趙亞萍;陳小慧;季晨博;張春梅;郭錫熔;高春林;陳榮華;;新基因NYGGF4在人前體脂肪細胞分化過程中的表達變化及TNFα的調控研究[A];第六屆江浙滬兒科學術會議暨兒科學基礎與臨床研究進展學術班論文匯編[C];2009年

7 李果;左祥生;駱天紅;丁偉;王曉;李紀平;劉斌;羅敏;;PPARγ2誘導脂肪細胞分化相關基因克隆及鑒定[A];中華醫(yī)學會第六次全國內分泌學術會議論文匯編[C];2001年

8 李文;向雙林;張健;;脂肪細胞分化過程中AP-2α、C/EBPα和miR-122反饋環(huán)的研究[A];第二屆模式生物與人類健康研討會會議論文集[C];2012年

9 陳雷;丁一;胡燕;金滿文;;五甲基槲皮素對3T3-L1前脂肪細胞分化及對脂肪細胞PPAR-γ和脂聯(lián)素mRNA表達的影響[A];2008心血管藥理學術研討會論文匯編[C];2008年

10 趙萸;駱天紅;張宏利;李文毅;許麗紅;張芹;鄭升;李杲;羅敏;;肥胖及2型糖尿病患者內臟脂肪差異表達基因與脂肪細胞分化關系的研究[A];2006年中華醫(yī)學會糖尿病分會第十次全國糖尿病學術會議論文集[C];2006年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前9條

1 空軍總醫(yī)院 王琳;[N];保健時報;2010年

2 蘭政文;[N];中國醫(yī)藥報;2003年

3 支勇平　記者　張哲浩;[N];科技日報;2003年

4 儲國強 支勇平;[N];新華每日電訊;2003年

5 姜作金;[N];中國中醫(yī)藥報;2005年

6 支勇平;[N];陜西日報;2003年

7 小薇;[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2002年

8 ;[N];中國醫(yī)藥報;2003年

9 記者 王小龍;[N];科技日報;2011年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李煩繁;CIDEC在人脂肪細胞分化中的作用及其機制研究[D];第四軍醫(yī)大學;2010年

2 許金飛;3T3-L1前脂肪細胞分化和克隆擴增過程中的信號轉導[D];中國科學院研究生院（上海生命科學研究院）;2004年

3 徐銘恩;Ⅱ型糖尿病/代謝綜合癥藥物篩選及機制研究[D];浙江大學;2005年

4 周一然;蛋白激酶C-βΙ和-δ在脂肪細胞分化中的作用[D];中國科學院研究生院（上海生命科學研究院）;2006年

5 陳月;蛋白酪氨酸磷酸酶1B在3T3-L1前脂肪細胞分化中的作用研究[D];第二軍醫(yī)大學;2007年

6 莫朝暉;胰島素誘導基因（Insig2）在調控脂肪細胞分化與脂肪合成中作用的研究[D];中南大學;2007年

7 溫宇;促�；鞍住荏wC5L2在脂肪細胞分化和胰島素抵抗中的作用研究[D];華中科技大學;2007年

8 劉靜;Ghrelin在肥胖發(fā)生機制中的實驗研究及臨床意義探討[D];華中科技大學;2009年

9 王淼;抑制蛋白酪氨酸磷酸酶1B可促進人脂肪干細胞分化[D];第二軍醫(yī)大學;2007年

10 陳康;血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑對脂肪組織和脂肪細胞糖脂代謝及炎癥因子的影響[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進修學院;2009年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 楊俊朋;GLP-1對3T3-L1前脂肪細胞分化的影響及其調控機制研究[D];山東大學;2013年

2 趙改霞;固醇調節(jié)元件結合蛋白（SREBPs）的研究進展[D];山東大學;2005年

3 易娟;紅茶多酚和綠茶多酚對大鼠脂肪細胞分化相關基因影響的比較研究[D];中南大學;2007年

4 馮雅靜;葛根素對前脂肪細胞分化的影響[D];大連醫(yī)科大學;2008年

5 孫津津;大鼠骨髓間充質干細胞向內皮細胞分化的體外研究[D];中國醫(yī)科大學;2005年

6 張諾;脂肪來源基質細胞的分離擴增及成脂肪誘導分化研究[D];吉林大學;2007年

7 曹建平;小檗堿對人脂肪細胞脂聯(lián)素、瘦素分泌的影響[D];山西醫(yī)科大學;2007年

8 胡國平;腫瘤壞死因子α、吡格列酮對3T3-L1脂肪細胞脂聯(lián)素表達的影響[D];安徽醫(yī)科大學;2006年

9 楊彥;鎢酸鈉對脂肪細胞糖代謝的影響[D];中南大學;2008年

10 陳曉煒;去分化脂肪細胞生物學特性及構建工程化脂肪組織的實驗研究[D];南方醫(yī)科大學;2009年

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