本文關(guān)鍵詞：GLP-1對3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化的影響及其調(diào)控機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《山東大學(xué)》 2013年

GLP-1對3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化的影響及其調(diào)控機(jī)制研究

楊俊朋  

【摘要】：研究背景： 目前,肥胖及2型糖尿病已經(jīng)成為我國面臨的嚴(yán)重公共衛(wèi)生問題。作為代謝異常性疾病二者存在相近的發(fā)病基礎(chǔ),脂質(zhì)異常沉積與胰島素抵抗是其共同土壤[1]。盡管多種遺傳因素引起肥胖及胰島素抵抗,但環(huán)境因素中最主要的是長期能量攝入超過消耗,導(dǎo)致體內(nèi)脂肪過多蓄積,引起肥胖及脂質(zhì)代謝紊亂。肥胖在細(xì)胞層面上主要表現(xiàn)為已存在的脂肪細(xì)胞體積的肥大和由前脂肪細(xì)胞分化而來的脂肪細(xì)胞數(shù)量的增多。研究表明,脂肪細(xì)胞體積的肥大以及由前脂肪細(xì)胞分化而來的脂肪細(xì)胞數(shù)量的增多在成人肥胖的發(fā)生發(fā)展過程中均發(fā)揮著重要作用。然而,這兩種變化對脂質(zhì)及糖代謝的作用有著顯著的差別。脂肪細(xì)胞體積的肥大與脂質(zhì)代謝紊亂及胰島素抵抗密切相關(guān)；而脂肪細(xì)胞數(shù)量的增多(小體積脂肪細(xì)胞)則有助于改善高脂血癥,增加胰島素敏感性。胰高糖素肽-1(glucagon-like peptide-1, GLP-1)是由腸L細(xì)胞產(chǎn)生的目前己知作用最強(qiáng)的腸促胰島素分泌肽,除了調(diào)控血糖之外,還具有調(diào)節(jié)食欲、血壓、血脂,改善心功能、保護(hù)血管內(nèi)皮功能等多重生物學(xué)功能。研究證明,GLP-1能夠上調(diào)脂肪細(xì)胞表面胰島素受體(IR-β)及胞內(nèi)胰島素底物(IRS-1)的數(shù)量,促進(jìn)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)子4(GLUT-4)的表達(dá),抑制脂肪細(xì)胞中炎癥通路激活等改善脂肪細(xì)胞體積的肥大,進(jìn)而改善胰島素抵抗；然而,GLP-1對前脂肪細(xì)胞的分化的影響尚有爭議,其能否促進(jìn)小體積脂肪細(xì)胞的形成尚缺乏足夠研究。本實驗以3T3-L1前脂肪細(xì)胞為實驗對象,在其分化過程中給予重組人GLP-1進(jìn)行干預(yù),研究GLP-1對前脂肪細(xì)胞分化的影響及其調(diào)控機(jī)制,以期為肥胖的防治提供新的作用靶點(diǎn)。 研究目的： 1.觀察GLP-1對3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化過程中脂肪標(biāo)志性蛋白LPL、 aP2及轉(zhuǎn)錄因子PPAR-γ、C/EBPa表達(dá)的影響。 2.觀察GLP-1對3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化過程中脂質(zhì)聚集以及脂肪細(xì)胞形態(tài)的影響。 3.初步探討GLP-1發(fā)揮上述作用的分子機(jī)制。 研究方法： 1.3T3-L1前脂肪細(xì)胞的培養(yǎng)與分化：在無菌條件下培養(yǎng)3T3-L1前脂肪細(xì)胞,采用傳統(tǒng)“雞尾酒”法來誘導(dǎo)前脂肪細(xì)胞分化。 2.給予3T3-L1前脂肪細(xì)胞不同濃度的GLP-1進(jìn)行干預(yù),用MTT法檢測其對細(xì)胞活力的影響,選取合適的濃度范圍。 3.RT-PCR及Western-blot檢測脂肪細(xì)胞脂肪標(biāo)志性蛋白LPL、aP2及轉(zhuǎn)錄因子PPAR-γ、C/EBPa的表達(dá)。 4.油紅O染色檢測3T3-L1前脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化第8天細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)聚集,用Image Pro plus5.02軟件分析脂肪細(xì)胞體積和數(shù)量的變化。 5. RT-PCR檢測誘導(dǎo)分化第8天時解偶聯(lián)蛋白-1(UCP-1)和肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶-1(CPT-1A)的mRNA表達(dá)。 6.Western-blot檢測Akt、P38、ERK1/2信號通路的變化。 研究結(jié)果： 1.GLP-1顯著促進(jìn)脂肪細(xì)胞標(biāo)志性蛋白LPL、aP2和轉(zhuǎn)錄因子PPAR-γ、 C/EBPa的mRNA水平,呈濃度依賴性及時間依賴性(P0.05)。 2.與對照組相比,GLP-1顯著促進(jìn)轉(zhuǎn)錄因子PPAR-γ和脂肪細(xì)胞標(biāo)志性蛋白aP2的蛋白表達(dá),呈濃度依賴性及時間依賴性(P0.05)。 3.與對照組相比,GLP-1組且pAkt的蛋白表達(dá)水平顯著增加(P0.05),而pP38和pERK1/2的蛋白水平未見顯著變化。 4.油紅O染色結(jié)果顯示,100nM GLP-1顯著增加小體積脂肪細(xì)胞的形成(P0.05)。 5.與對照組和其他濃度組相比,100nM GLP-1組脂肪細(xì)胞中CPT-1A的mRNA表達(dá)水平顯著增加(P0.05),而UCP-1的mRNA表達(dá)無顯著變化。 研究結(jié)論： 1.在3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化過程中,GLP-1呈劑量及時間依賴性的促進(jìn)PPAR-γ、C/EBPα、LPL和aP2的表達(dá)。 2.Akt信號通路可能參與GLP-1的上述作用過程。 3.100nM GLP-1能促進(jìn)更多小體積脂肪細(xì)胞的形成,該細(xì)胞中CPT-1A的mRNA表達(dá)顯著增加。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R589.2
【目錄】：

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【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 白秀平;李宏亮;楊文英;;PPAR及其激動劑與脂肪酸代謝及胰島素抵抗[J];國際藥學(xué)研究雜志;2008年02期

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 顧浩;張燕玲;王耘;馬群;喬延江;;基于靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)的參仙冰抗心肌缺血有效成分群研究[J];中華中醫(yī)藥雜志;2013年05期

2 楊悅;龔未;王偉偉;俞曉敏;胡松年;于軍;;寒冷誘導(dǎo)產(chǎn)熱時大鼠棕色脂肪能量代謝相關(guān)蛋白譜的變化(英文)[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;2010年10期

3 金甲;張鳳;楊玲玲;張杰鋒;湯杰;楊帆;;線粒體解偶聯(lián)劑的研究進(jìn)展[J];生命科學(xué);2013年07期

4 劉貴波;劉躍光;孫成;包海花;于建渤;;山奈酚對2型糖尿病大鼠糖脂代謝及胰島素抵抗的影響[J];實用臨床醫(yī)藥雜志;2012年09期

5 羅瑋;林杰義;張奕;歐陽靜儀;毛麗梅;;油酸對3T3-L1脂肪細(xì)胞脂聯(lián)素表達(dá)的影響及PPARγ介導(dǎo)機(jī)制[J];衛(wèi)生研究;2013年02期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 顧浩;張燕玲;王耘;馬群;喬延江;;基于靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)的參仙冰抗心肌缺血有效成分群研究[A];第四屆全國中醫(yī)藥博士生優(yōu)秀論文專輯[C];2013年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 謝錫渝;DMN致肝損害小鼠模型肝組織基因表達(dá)譜變化及肝毒清對其干預(yù)作用的研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2011年

2 王海英;羅格列酮和復(fù)方丹參滴丸對糖尿病大鼠心肌病變的保護(hù)作用[D];吉林大學(xué);2010年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 姚瑤;XH-211降脂，胰島素增敏活性的測定及其作用機(jī)制探討[D];南京醫(yī)科大學(xué);2010年

2 呂彬;鈣信號通過IP3通路對正常與肥胖小鼠脂解作用的影響[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2011年

3 陳冬妹;線粒體溫和解偶聯(lián)劑的發(fā)現(xiàn)及作用機(jī)制研究[D];華東師范大學(xué);2011年

【二級參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 陳曉平,楊文英,卜石,蕭建中,劉雪莉,王娜,趙文惠;羅格列酮和二甲雙胍對高脂飼養(yǎng)造成的胰島素抵抗的影響[J];中華內(nèi)科雜志;2004年04期

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王佰川;邵增務(wù);;骨髓腔內(nèi)脂質(zhì)代謝異常對原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥的影響[J];國際骨科學(xué)雜志;2008年04期

2 侯賀憲;李保鍇;楊加保;陳軍;;游離脂肪細(xì)胞移植后的調(diào)控[J];中華損傷與修復(fù)雜志(電子版);2008年03期

3 徐無忌;莊洪;;骨康含藥血清對大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成脂分化的影響[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2008年43期

4 許瑩瑩,金慰芳,王洪復(fù);PPARγ2信號通路的調(diào)節(jié)及其對成骨特異因子的影響[J];中國骨質(zhì)疏松雜志;2005年04期

5 李傳保;卜培莉;;脂質(zhì)過氧化物酶體增殖物激活受體在脂質(zhì)方面的研究進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué)(內(nèi)科學(xué)分冊);2006年08期

6 王文加;焦平;許天敏;范偉全;張諾;王丁丁;徐煌;包曉群;顏煒群;;脂肪來源基質(zhì)細(xì)胞的擴(kuò)增及多分化潛能研究[J];中國老年學(xué)雜志;2007年05期

7 孫婷婷;張木勛;張建華;袁剛;;胰島素對3T3-L1脂肪細(xì)胞中極低密度脂蛋白受體基因表達(dá)的影響[J];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報;2007年06期

8 方秋紅;稅朝祥;王堯堯;;人肺成纖維母細(xì)胞表達(dá)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞特性的研究[J];中國實用內(nèi)科雜志;2007年16期

9 王文飛;任桂萍;侯玉婷;李德山;;3T3-L1脂肪細(xì)胞膜FGF-21結(jié)合蛋白的初步鑒定[J];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報;2008年07期

10 白愛紅;孫瑩璞;;小鼠胚胎干細(xì)胞向脂肪細(xì)胞分化的分子機(jī)制[J];國際生殖健康/計劃生育雜志;2009年02期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 趙亞萍;陳小慧;季晨博;高春林;張春梅;郭錫熔;陳榮華;;FFA、IL-6對人成熟脂肪細(xì)胞中NYGGF4基因表達(dá)的調(diào)控[A];第六屆江浙滬兒科學(xué)術(shù)會議暨兒科學(xué)基礎(chǔ)與臨床研究進(jìn)展學(xué)術(shù)班論文匯編[C];2009年

2 陳小慧;朱春;季晨博;張春梅;朱金改;郭錫熔;趙亞萍;高春林;;TNFα對人脂肪細(xì)胞中STEAP4基因表達(dá)的調(diào)控[A];第六屆江浙滬兒科學(xué)術(shù)會議暨兒科學(xué)基礎(chǔ)與臨床研究進(jìn)展學(xué)術(shù)班論文匯編[C];2009年

3 辜楠;郭錫熔;倪毓輝;王玢;張敏;劉峰;費(fèi)莉;陳榮華;;Resistin結(jié)合多肽(RBP)拮抗Resistin基因在3T3-L1脂肪細(xì)胞分化及脂代謝中的作用[A];2006（第三屆）江浙滬兒科學(xué)術(shù)會議暨浙江省兒科學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2006年

4 辜楠;郭錫熔;潘曉勤;費(fèi)莉;陳榮華;;Resistin基因過表達(dá)影響3T3-L1脂肪細(xì)胞的脂質(zhì)代謝[A];第三屆長三角圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)論壇暨2006年浙江省圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2006年

5 林曉儀;丁鶴林;;高糖對3T3-L1脂肪細(xì)胞葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1表達(dá)的影響[A];2006年中華醫(yī)學(xué)會糖尿病分會第十次全國糖尿病學(xué)術(shù)會議論文集[C];2006年

6 趙亞萍;陳小慧;季晨博;張春梅;郭錫熔;高春林;陳榮華;;新基因NYGGF4在人前體脂肪細(xì)胞分化過程中的表達(dá)變化及TNFα的調(diào)控研究[A];第六屆江浙滬兒科學(xué)術(shù)會議暨兒科學(xué)基礎(chǔ)與臨床研究進(jìn)展學(xué)術(shù)班論文匯編[C];2009年

7 李果;左祥生;駱天紅;丁偉;王曉;李紀(jì)平;劉斌;羅敏;;PPARγ2誘導(dǎo)脂肪細(xì)胞分化相關(guān)基因克隆及鑒定[A];中華醫(yī)學(xué)會第六次全國內(nèi)分泌學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2001年

8 李文;向雙林;張健;;脂肪細(xì)胞分化過程中AP-2α、C/EBPα和miR-122反饋環(huán)的研究[A];第二屆模式生物與人類健康研討會會議論文集[C];2012年

9 陳雷;丁一;胡燕;金滿文;;五甲基槲皮素對3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化及對脂肪細(xì)胞PPAR-γ和脂聯(lián)素mRNA表達(dá)的影響[A];2008心血管藥理學(xué)術(shù)研討會論文匯編[C];2008年

10 趙萸;駱天紅;張宏利;李文毅;許麗紅;張芹;鄭升;李杲;羅敏;;肥胖及2型糖尿病患者內(nèi)臟脂肪差異表達(dá)基因與脂肪細(xì)胞分化關(guān)系的研究[A];2006年中華醫(yī)學(xué)會糖尿病分會第十次全國糖尿病學(xué)術(shù)會議論文集[C];2006年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前9條

1 空軍總醫(yī)院 王琳;[N];保健時報;2010年

2 蘭政文;[N];中國醫(yī)藥報;2003年

3 支勇平　記者　張哲浩;[N];科技日報;2003年

4 儲國強(qiáng) 支勇平;[N];新華每日電訊;2003年

5 姜作金;[N];中國中醫(yī)藥報;2005年

6 支勇平;[N];陜西日報;2003年

7 小薇;[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報;2002年

8 ;[N];中國醫(yī)藥報;2003年

9 記者 王小龍;[N];科技日報;2011年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李煩繁;CIDEC在人脂肪細(xì)胞分化中的作用及其機(jī)制研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2010年

2 許金飛;3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化和克隆擴(kuò)增過程中的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)[D];中國科學(xué)院研究生院（上海生命科學(xué)研究院）;2004年

3 徐銘恩;Ⅱ型糖尿病/代謝綜合癥藥物篩選及機(jī)制研究[D];浙江大學(xué);2005年

4 周一然;蛋白激酶C-βΙ和-δ在脂肪細(xì)胞分化中的作用[D];中國科學(xué)院研究生院（上海生命科學(xué)研究院）;2006年

5 陳月;蛋白酪氨酸磷酸酶1B在3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化中的作用研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2007年

6 莫朝暉;胰島素誘導(dǎo)基因（Insig2）在調(diào)控脂肪細(xì)胞分化與脂肪合成中作用的研究[D];中南大學(xué);2007年

7 溫宇;促�；鞍住荏wC5L2在脂肪細(xì)胞分化和胰島素抵抗中的作用研究[D];華中科技大學(xué);2007年

8 劉靜;Ghrelin在肥胖發(fā)生機(jī)制中的實驗研究及臨床意義探討[D];華中科技大學(xué);2009年

9 王淼;抑制蛋白酪氨酸磷酸酶1B可促進(jìn)人脂肪干細(xì)胞分化[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2007年

10 陳康;血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑對脂肪組織和脂肪細(xì)胞糖脂代謝及炎癥因子的影響[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2009年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 楊俊朋;GLP-1對3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化的影響及其調(diào)控機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2013年

2 趙改霞;固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白（SREBPs）的研究進(jìn)展[D];山東大學(xué);2005年

3 易娟;紅茶多酚和綠茶多酚對大鼠脂肪細(xì)胞分化相關(guān)基因影響的比較研究[D];中南大學(xué);2007年

4 馮雅靜;葛根素對前脂肪細(xì)胞分化的影響[D];大連醫(yī)科大學(xué);2008年

5 孫津津;大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向內(nèi)皮細(xì)胞分化的體外研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2005年

6 張諾;脂肪來源基質(zhì)細(xì)胞的分離擴(kuò)增及成脂肪誘導(dǎo)分化研究[D];吉林大學(xué);2007年

7 曹建平;小檗堿對人脂肪細(xì)胞脂聯(lián)素、瘦素分泌的影響[D];山西醫(yī)科大學(xué);2007年

8 胡國平;腫瘤壞死因子α、吡格列酮對3T3-L1脂肪細(xì)胞脂聯(lián)素表達(dá)的影響[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2006年

9 楊彥;鎢酸鈉對脂肪細(xì)胞糖代謝的影響[D];中南大學(xué);2008年

10 陳曉煒;去分化脂肪細(xì)胞生物學(xué)特性及構(gòu)建工程化脂肪組織的實驗研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2009年

  本文關(guān)鍵詞：GLP-1對3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化的影響及其調(diào)控機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：215233