本文選題：神經(jīng)酰胺 + PC細胞��； 參考：《山東大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版)》2017年12期

【摘要】：目的研究維生素D(VD)對大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞系PC12細胞中神經(jīng)酰胺(Cer)水平的影響。方法采用C2-Cer(20μmol/L)刺激PC12細胞,MTT法檢測Cer對PC12細胞增殖的影響;高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法(HPLC-MS)測定VD(50或0 nmol/L)處理的PC12細胞中C16:0-Cer的含量。qRT-PCR法測定VD(50或0 nmol/L)處理的PC12細胞中Cer代謝相關(guān)酶mRNA的表達;Western blotting法檢測VD(200、100、50、25、12.5和0 nmol/L)處理后,PC12細胞中SPTLC1和Cers6蛋白的相對表達量。結(jié)果 C2-Cer能抑制PC12細胞的活性,IC50為2.800μmol/L。與0 nmol/L VD相比,50 nmol/L VD降低了PC12細胞中C16:0-Cer的含量[(19.37±0.61)ng/m L vs(16.50±0.10)ng/m L,P=0.010],升高了SPTLC1 mRNA的表達水平(P=0.001)和Cers6mRNA的表達水平(P0.001),降低了SPTLC1蛋白的相對表達量(P=0.032),升高了Cers6蛋白的相對表達量(P=0.020)。結(jié)論 VD降低PC12中Cer的含量,可能與降低SPTLC1蛋白表達有關(guān)。
[Abstract]:Objective to study the effect of vitamin D (VD) on the level of ceramide (Cer) in rat adrenal pheochromocytoma cell line PC12. Methods the effects of C2-Cer (20 渭 mol / L) on the proliferation of PC12 cells were detected by MTT assay. Determination of C160-Cer content in PC12 cells treated with VD (50 or 0 nmol / L) by High performance liquid Chromatography-tandem Mass Spectrometry (HPLC-MS). Quantitative RT-PCR method to detect the expression of Cer Metabolism related enzymes mRNA in PC12 cells treated with VD (50 or 0 nmol / L). Western blotting method to detect the expression of Cer Metabolism related enzymes mRNA in PC12 cells treated with VD (20010050252512.5 and 0 nmol / L) The relative expression of SPTLC1 and Cers6 protein. Results C2-Cer could inhibit the activity of PC12 cells and the IC50 was 2.800 渭 mol / L. Compared with 0 nmol / L VD, 50 nmol / L VD decreased the content of C16: 0-Cer in PC12 cells [(19.37 鹵0.61) ng/m L vs (16.50 鹵0.10) ng/m / L], increased the expression of SPTLC1 mRNA (P0. 001) and Cers6 mRNA (P0. 001), decreased the relative expression of SPTLC1 protein (P0. 032) and increased the relative expression of Cers6 protein (P0. 020). Conclusion VD decreases the content of Cer in PC12, which may be related to the decrease of SPTLC1 protein expression.
【作者單位】： 山東大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)系;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81271319)
【分類號】：R744.51

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本文編號：2114317