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《安徽醫(yī)科大學(xué)》 2012年

骨骼肌源性脂聯(lián)素通過p38MAPK信號通路影響骨骼肌胰島素抵抗模型中GLUT4表達(dá)的研究

陳冬  

【摘要】：目的體外培養(yǎng)骨骼肌L6細(xì)胞，誘導(dǎo)其分化成熟，采用棕櫚酸誘導(dǎo)的方法，建立骨骼肌L6細(xì)胞胰島素抵抗（IR）模型。給予不同條件的人工干預(yù)，探討骨骼肌源性脂聯(lián)素對胰島素抵抗模型中GLUT4表達(dá)的影響，及其中p38MAPK信號通路的地位和作用。 方法（1）體外培養(yǎng)大鼠L6成肌細(xì)胞并誘導(dǎo)分化為成熟骨骼肌L6細(xì)胞，給予不同濃度（0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mmol/L）的棕櫚酸（PA），并應(yīng)用葡萄糖氧化酶法分別測定不同時間（2、4、8、12、24、36h）細(xì)胞培養(yǎng)上清液葡萄糖濃度，觀察不同濃度PA對L6細(xì)胞攝取葡萄糖的影響，據(jù)此判斷胰島素抵抗模型建立成功與否。（2）根據(jù)干預(yù)條件的不同，實(shí)驗(yàn)分為四組：NC組（對照組，骨骼肌L6細(xì)胞組）；NC+SB組(對照+阻滯劑SB203580組)；IR組（胰島素抵抗模型組）；IR+PIO組(胰島素抵抗模型+吡格列酮組)。應(yīng)用Western blot方法分別測定上述四組APN、p-p38MAPK和GLUT4蛋白表達(dá)水平。 結(jié)果(1)0.4mmol/L的棕櫚酸在作用12、24、36h以及0.6，0.8mmol/L棕櫚酸作用8、12、24、36h，或1.0mmol/L棕櫚酸作用4、8、12、24、36h后，細(xì)胞培養(yǎng)上清液中葡萄糖含量，明顯高于對照組（P＜0.05）。據(jù)此判斷胰島素抵抗模型建立。（2）Western blot結(jié)果顯示：①與NC組比較，IR組APN和GLUT4蛋白表達(dá)減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），而p-p38MAPK雖減少，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；②與NC組比較，NC+SB組p-p38MAPK和GLUT4的蛋白表達(dá)減少（P＜0.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，盡管APN蛋白表達(dá)水平減少，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；③與IR組比較，IR+PIO組其APN、p-p38MAPK和GLUT4蛋白表達(dá)增加，，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。 結(jié)論1.大鼠L6肌細(xì)胞株通過培養(yǎng)并分化成熟后，經(jīng)過一定濃度和時間的棕櫚酸誘導(dǎo)，可以建立大鼠L6肌細(xì)胞胰島素抵抗模型；2.大鼠L6肌細(xì)胞可以分泌和表達(dá)脂聯(lián)素，并影響L6肌細(xì)胞GLUT4蛋白的表達(dá)；3.骨骼肌源脂聯(lián)素上調(diào)L6肌細(xì)胞GLUT4的表達(dá)， p38MAPK信號通路可能是其重要的信號途徑之一；4.吡格列酮可增加L6細(xì)胞脂聯(lián)素的分泌，其改善胰島素敏感性可能和激活p38MAPK信號通路有關(guān)。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R587.1
【目錄】：

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