本文選題：多囊卵巢綜合征 + 可溶性晚期糖基化終產(chǎn)物受體��； 參考：《鄭州大學》2017年碩士論文

【摘要】：多囊卵巢綜合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是一種全身性內(nèi)分泌代謝紊亂疾病,發(fā)生于5-10%育齡期女性。胰島素抵抗、高雄激素血癥和卵泡發(fā)育異常是其主要的病理生理變化。PCOS會導致不孕、內(nèi)分泌紊亂等,其遠期并發(fā)癥心血管疾病、糖尿病、高血壓等的發(fā)病率也會增加,嚴重影響女性的生活質(zhì)量及身體健康。PCOS的發(fā)病機制尚不明確,研究發(fā)現(xiàn)炎癥、遺傳因素、氧化應激、環(huán)境因素、社會心理因素等都參與PCOS的發(fā)生發(fā)展。可溶性晚期糖基化終產(chǎn)物受體(soluble receptor for advanced glycation end-products,sRAGE)是RAGE的內(nèi)源分泌型,通過與RAGE競爭結(jié)合AGEs,從而抑制AGE-RAGE軸誘導的多種細胞信號傳導途徑。血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)能直接調(diào)控卵母細胞成熟和胚胎早期發(fā)育,也能夠通過調(diào)控卵泡膜層的微血管網(wǎng)形成、增加血管通透性來調(diào)控卵泡發(fā)育,與PCOS的發(fā)生發(fā)展密切相關。PCOS患者血清VEGF水平明顯高于非PCOS患者。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn),在PCOS卵巢顆粒細胞中,s RAEG作為保護性因子,能通過下調(diào)VEGF的表達,延緩PCOS的發(fā)生發(fā)展。VEGF蛋白和m RNA的表達量隨sRAGE濃度的增加而降低。但sRAGE具體通過何種途徑下調(diào)VEGF表達,尚需更深入的研究。PI3K/AKT通路是參與多種細胞代謝調(diào)節(jié)的經(jīng)典信號通路,其中心環(huán)節(jié)為AKT的磷酸化。PI3K/AKT通路可激活包括SP轉(zhuǎn)錄因子在內(nèi)的多種細胞因子。其中SP1是調(diào)控VEGF表達的主要轉(zhuǎn)錄因子,其與VEGF啟動子的結(jié)合在調(diào)控VEGF轉(zhuǎn)錄中占據(jù)主導作用。在U937源性泡沫細胞中,CD147可通過PI3K/AKT通路上調(diào)VEGF的表達。在人卵巢上皮癌細胞中,抵抗素能通過PI3K/AKT通路增強SP1與VEGF啟動子的DNA結(jié)合活性,上調(diào)VEGF的表達。那么,在PCOS卵巢顆粒細胞中,sRAGE能否通過調(diào)控AKT磷酸化影響轉(zhuǎn)錄因子SP1的表達進而調(diào)控VEGF的表達?目前未見相關報道。本研究旨在探究sRAGE對PCOS卵巢顆粒細胞AKT磷酸化及SP1表達的調(diào)控作用,為深入研究sRAGE作用機制奠定基礎。目的1.研究sRAGE對PCOS卵巢顆粒細胞AKT磷酸化的調(diào)控作用。2.研究sRAGE對PCOS卵巢顆粒細胞轉(zhuǎn)錄因子SP1表達的調(diào)控作用。材料和方法收集于鄭大一附院生殖醫(yī)學中心進行IVF助孕治療PCOS患者卵泡液共10例,提取顆粒細胞體外培養(yǎng)48h后分別添加濃度為0μg/ml,0.6μg/ml,1.2μg/ml的sRAGE進行干預。在添加后12h和24h分別檢測AKT、p AKT、SP1的表達,通過蛋白質(zhì)印跡法(Western blot)檢測AKT、p AKT、SP1的蛋白表達,通過實時熒光定量聚合酶鏈反應(RT-q PCR)檢測SP1的m RNA表達。探究sRAGE在PCOS卵巢顆粒細胞中對AKT磷酸化及轉(zhuǎn)錄因子SP1表達的調(diào)控作用。結(jié)果1.0μg/ml,0.6μg/ml,1.2μg/ml sRAGE分別干預PCOS顆粒細胞12h及24h,三組間AKT蛋白相對表達量均無明顯統(tǒng)計學差異(P0.05);而p AKT蛋白相對表達量隨sRAGE濃度的增加而顯著降低,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。2.0μg/ml,0.6μg/ml,1.2μg/ml sRAGE處理PCOS顆粒細胞12h,SP1蛋白表達量在1.2μg/ml組明顯低于0μg/ml組(P0.05);處理24h后檢測,SP1蛋白表達量隨sRAGE濃度的增加而顯著降低,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。3.0μg/ml,0.6μg/ml,1.2μg/ml sRAGE處理PCOS顆粒細胞12h,三組SP1m RNA表達量隨sRAGE濃度的增加有下降趨勢,但差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。處理24h后檢測,SP1m RNA表達水平隨sRAGE濃度的增加而顯著降低,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結(jié)論1.sRAGE可降低PCOS卵巢顆粒細胞AKT磷酸化水平,且具有劑量和時間依賴性。2.sRAGE可下調(diào)PCOS卵巢顆粒細胞中轉(zhuǎn)錄因子SP1的表達,且具有劑量和時間依賴性。
[Abstract]:Polycystic ovary syndrome (PCOS) is a systemic endocrine and metabolic disorder that occurs in women of childbearing age of 5-10%. Insulin resistance, Kaohsiung's steroid and follicular dysplasia are its main pathophysiological changes..PCOS can lead to infertility, internal secretion disorder, and so on. The long-term complications of cardiovascular disease, diabetes, and diabetes mellitus The incidence of disease, hypertension and so on is also increased. The pathogenesis of the quality of life of women and the health of.PCOS is not clear. The study found that inflammation, genetic factors, oxidative stress, environmental factors, social psychological factors and so on are all involved in the development of PCOS. The soluble advanced glycosylation end product receptor (soluble receptor for advanced) Glycation end-products, sRAGE) is an endogenous secretory type of RAGE, which inhibits multiple cell signaling pathways induced by AGE-RAGE axis by competing with RAGE in competition with RAGE. Vascular endothelial growth factor (vascular endothelial growth factor, VEGF) can directly regulate oocyte maturation and early embryonic development, and can also regulate the follicular membrane. The microvascular network of the layer is formed to increase the vascular permeability to regulate the development of follicle. The serum VEGF level of.PCOS patients is significantly higher than that of non PCOS patients with the development of PCOS. The previous study in our group found that in PCOS ovarian granulosa cells, s RAEG is a protective factor, which can slow down the expression of VEGF and delay the occurrence and development of PCOS.V. The expression of EGF protein and m RNA decreases with the increase of sRAGE concentration, but the specific way sRAGE is to downregulate the expression of VEGF needs to further study the.PI3K/AKT pathway as a classic signaling pathway involved in the regulation of various cell metabolism. The central link is the activation of the.PI3K/AKT pathway of AKT, which activates a variety of SP transcription factors. SP1 is the main transcription factor regulating VEGF expression, and its binding with VEGF promoter plays a leading role in regulating VEGF transcription. In U937 derived foam cells, CD147 can up regulate the expression of VEGF through the PI3K/AKT pathway. In human ovarian epithelial cancer cells, resistin can enhance SP1 and VEGF promoter through the PI3K/AKT pathway. DNA binding activity up-regulated the expression of VEGF. Then, in PCOS ovarian granulosa cells, can sRAGE regulate the expression of SP1 by regulating AKT phosphorylation and then regulating the expression of VEGF? No related reports have been reported. This study aims to explore the regulatory role of sRAGE on PCOS ovarian granular cell AKT phosphorylation and SP1 expression, in order to further study sR. The basis of AGE action mechanism. Objective 1. to study the effect of sRAGE on the AKT phosphorylation of PCOS ovarian granulosa cells.2. to study the regulatory role of sRAGE on the expression of SP1 in PCOS ovarian granular cell transcription factors. Materials and methods were collected at the center of reproductive medicine in the 1st Affiliated Hospital of Zhengzhou University for 10 cases of follicle fluid in PCOS patients with IVF assisted pregnancy treatment, and the extraction of granular cells was obtained. After the 48h was cultured in vitro, the concentration was 0 mu g/ml, 0.6 g/ml and 1.2 g/ml sRAGE respectively. After adding 12h and 24h, the expression of AKT, P AKT, SP1 were detected respectively, and the protein expression was detected by Western blot. The effect of RAGE on the expression of AKT phosphorylation and transcription factor SP1 in PCOS ovarian granulosa cells. Results 1 mu g/ml, 0.6 mu g/ml, 1.2 micron g/ml sRAGE interfered with 12h and 24h of PCOS granular cells, and the relative expression of AKT protein in the three groups was not significantly different. The difference was statistically significant (P0.05).2.0 mu g/ml, 0.6 mu g/ml, and 1.2 mu g/ml sRAGE to treat PCOS granulosa cells 12h, and the expression of SP1 protein in 1.2 mu g/ml group was significantly lower than that of 0 mu g/ml group (P0.05). RAGE treatment of PCOS granulosa cells 12h, three groups of SP1m RNA expression decreased with the increase of sRAGE concentration, but the difference was not statistically significant (P0.05). After the treatment of 24h, the expression level of SP1m RNA decreased significantly with the increase of sRAGE concentration, the difference was statistically significant (P0.05). Moreover, a dose and time dependent.2.sRAGE can downregulate the expression of transcription factor SP1 in PCOS granulosa cells, which is dose and time dependent.
【學位授予單位】：鄭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R711.75

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 吳榮芹;劉玉來;胡月枝;李慶昌;崔天成;郝彥格;;女性卵巢顆粒細胞移植抗早衰可行性研究[J];中國醫(yī)藥導報;2006年33期

2 許川;舒為群;張亮;曹佳;周新;;大鼠卵巢顆粒細胞的原代培養(yǎng)與鑒定[J];癌變.畸變.突變;2009年03期

3 許程潔;王鑫泉;陳毅斐;胡夢桑;徐營;;卵巢顆粒細胞激素與成纖維細胞生長因子的信號交流[J];四川生理科學雜志;2011年03期

4 葉婧;丁婷;杜小芳;楊書紅;沈薇;石良艷;羅愛月;王世宣;;不同分離方法對人卵巢顆粒細胞體外培養(yǎng)的影響[J];中國現(xiàn)代醫(yī)學雜志;2013年17期

5 劉海靜;患卵巢顆粒細胞癌的育齡婦女的生育特點[J];國外醫(yī)學(計劃生育分冊);2001年02期

6 黃小卉,張昌軍,張端蓮,楊勇;卵巢顆粒細胞凋亡率的比較[J];數(shù)理醫(yī)藥學雜志;2002年02期

7 付霞霏;何援利;;骨髓間充質(zhì)干細胞抑制磷酰胺氮芥誘導的卵巢顆粒細胞凋亡[J];現(xiàn)代婦產(chǎn)科進展;2009年02期

8 崔姣;許惠琴;李莉;陳霞;;功血顆粒對卵巢顆粒細胞增殖和分泌作用的影響[J];吉林中醫(yī)藥;2011年03期

9 孫建中;;幼兒卵巢顆粒細胞癌1例[J];陜西新醫(yī)藥;1980年01期

10 方芳,趙明,王會信,牛富文;aFGF對大鼠卵巢顆粒細胞生長及分化的影響[J];中國應用生理學雜志;1992年04期

相關會議論文 前10條

1 朱翠娟;袁慧;朱家增;李小波;賀秀媛;張君濤;仝宗喜;王國瑾;劉宗平;;醋酸鉛對小鼠卵巢組織結(jié)構(gòu)和卵巢顆粒細胞凋亡的影響[A];中國畜牧獸醫(yī)學會家畜內(nèi)科學分會2009年學術研討會論文集[C];2009年

2 黃麗麗;;低劑量米非司酮對人卵巢顆粒細胞的影響[A];中華醫(yī)學會第一屆全球華人婦產(chǎn)科學術大會暨第三次全國婦產(chǎn)科中青年醫(yī)師學術會議論文匯編[C];2007年

3 何泓;王少晶;翁慧男;李翠蘭;譚鷹;李維樞;蘇靜;陳見美;生秀杰;;卵巢顆粒細胞HOXA10基因的表達受睪酮調(diào)控[A];中華醫(yī)學會第十次全國婦產(chǎn)科學術會議婦科內(nèi)分泌會場（婦科內(nèi)分泌學組、絕經(jīng)學組、計劃生育學組）論文匯編[C];2012年

4 羅新;陳舒;陳芳;王曉玉;蔣學風;帥翰林;;臍帶間充質(zhì)干細胞修復化療所致卵巢顆粒細胞損傷的體外實驗研究[A];中華醫(yī)學會第十次全國婦產(chǎn)科學術會議婦科腫瘤會場（婦科腫瘤學組、婦科病理學組）論文匯編[C];2012年

5 楊宏敏;宋翠淼;杜惠蘭;;逍遙丸含藥血清對體外培養(yǎng)的人卵巢顆粒細胞內(nèi)分泌功能及FSHR表達的影響[A];中國中西醫(yī)結(jié)合學會生殖醫(yī)學分會首屆學術年會暨生殖醫(yī)學專業(yè)委員會成立大會論文匯編[C];2014年

6 倪江;朱輝;;大鼠多囊卵巢顆粒細胞凋亡的實驗研究[A];面向21世紀的科技進步與社會經(jīng)濟發(fā)展（下冊）[C];1999年

7 何曉紅;楊利國;曹少先;;質(zhì)粒pEGS/2SS轉(zhuǎn)染對豬和牛卵巢顆粒細胞增殖和激素分泌的影響[A];第十次全國畜禽遺傳標記研討會論文集[C];2006年

8 邵康;吳小雪;盛晟;張佳;李維新;周杰;;組脂聯(lián)素對皖南花豬卵巢顆粒細胞性激素生成的影響[A];全國動物生理生化第十二次學術交流會論文摘要匯編[C];2012年

9 肖蘊祺;倪迎冬;;Kisspeptin-10對雞卵巢顆粒細胞孕酮分泌的影響及機制研究[A];全國動物生理生化第十一次學術交流會論文摘要匯編[C];2010年

10 郝紅娟;王惠蘭;張琰;張艷彬;;順鉑、VP-16、長春新堿、博來霉素對人卵巢顆粒細胞影響的比較[A];中華醫(yī)學會第三次全國絕經(jīng)學術會議暨絕經(jīng)相關問題學習班論文匯編[C];2011年

相關重要報紙文章 前3條

1 傅明暉;為Windows XP安裝光盤集成SP1[N];中國電腦教育報;2004年

2 鄧富強;制作集成SP1的Windows XP啟動光盤[N];中國電腦教育報;2003年

3 鄧富強;制作集成SP1的Windows XP啟動光盤[N];江蘇經(jīng)濟報;2004年

相關博士學位論文 前10條

1 吳少亙;微小RNA-132在卵巢顆粒細胞中的功能研究[D];南京大學;2016年

2 龍旭;基于PI3K/AKT信號通路研究新加歸腎丸調(diào)節(jié)大鼠卵巢顆粒細胞增殖、凋亡的分子機制[D];成都中醫(yī)藥大學;2015年

3 陸湘;子宮內(nèi)膜異位癥卵巢顆粒細胞SF-1的表達及其啟動子甲基化的研究[D];上海交通大學;2015年

4 丁玲玲;PDCD4基因在多囊卵巢綜合征患者中的表達及其相關性研究[D];山東大學;2016年

5 程靜;微囊化卵巢顆粒細胞長期體外培養(yǎng)及同種異體體內(nèi)移植的研究[D];浙江大學;2010年

6 鄔靜;大鼠卵巢顆粒細胞體外生殖毒性評價替代模型的建立與應用[D];湖南農(nóng)業(yè)大學;2011年

7 孫美艷;鈣激活氯離子通道ANO1在卵巢顆粒細胞中的表達與功能[D];吉林大學;2014年

8 侯曉明;GLI與AKT抑制劑對T淋巴白血病細胞凋亡與自噬的機理及聯(lián)合用藥研究[D];山東大學;2015年

9 呂燕華;不同炎癥表型哮喘患者血漿sRAGE的差異性表達及對哮喘控制和急性發(fā)作的預測作用探討：為期1年的隨訪研究[D];南方醫(yī)科大學;2014年

10 夏天;補腎調(diào)沖方對大鼠卵巢顆粒細胞增殖與分泌及其相關基因表達的影響[D];天津中醫(yī)學院;2005年

相關碩士學位論文 前10條

1 李攀;間充質(zhì)干細胞來源微囊泡對卵巢顆粒細胞的作用及機制研究[D];安徽醫(yī)科大學;2015年

2 張永芳;二甲雙胍對多囊卵巢綜合征卵巢顆粒細胞胰島素受體底物-1及其磷酸化表達的影響[D];寧夏醫(yī)科大學;2015年

3 鄒文兵;多種營養(yǎng)素對燃煤型氟中毒雌鼠卵巢顆粒細胞凋亡干預作用研究[D];貴陽醫(yī)學院;2015年

4 唐曉靜;黨參炔苷和木犀草素對卵巢顆粒細胞激素分泌的影響及其作用機制[D];中央民族大學;2015年

5 袁明明;微囊藻毒素-LR長時期低劑量暴露對雌性小鼠生殖功能的影響及其機制研究[D];南京大學;2014年

6 王梧蘇;BMAL1對豬卵巢顆粒細胞激素分泌與凋亡的影響[D];西北農(nóng)林科技大學;2016年

7 王珊;miR-4110對奶山羊卵巢顆粒細胞周亡調(diào)控作用的研究[D];西北農(nóng)林科技大學;2016年

8 孫麗萍;干細胞來源的exosomes對化療誘導卵巢損傷保護的機制研究[D];山東大學;2016年

9 楊s，

本文編號：1909876